张丽
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
- 供职机构：广东省农业科学院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 表达猪源流感病毒HA基因重组伪狂犬病毒的构建被引量：4
- 2009年
- 目的获得共表达H1N1和H3N2亚型猪源流感病毒(SIV)HA基因的重组伪狂犬病毒(PRV)。方法克隆H1N1以及H3N2亚型SIV的HA基因,将HA基因与PUC-TK转移载体进行酶切、连接来构建pUC-P-H1A-H3A重组表达质粒,用脂质体将其转染已感染PRV亲本病毒的Vero细胞,使其在Vero细胞内与PRV基因组发生同源重组。运用RT-PCR、间接免疫荧光等方法检测外源基因重组情况及其在Vero细胞内的表达,并通过Western-blot对表达产物进行免疫原性鉴定。结果实验结果显示,外源基因HA已重组入PRV基因组,并在Vero细胞中有效表达,且所表达蛋白具有免疫原性。结论HA基因重组PRV的构建成功为SIVHA基因重组PRV活载体疫苗的研究奠定了初步基础。
- 李敏向华张丽黄元王贵平宣华
- 关键词：SIVHA基因TK
- 广东番茄上首次检测到泰国番茄黄化曲叶病毒
- 泰国番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl Thailand virus,TYLCTHV）属于双生病毒科（Geminiviridae）菜豆金色黄花叶病毒属（Begomovirus）,由烟粉虱传播...
- 张丽李正刚佘小漫于琳蓝国兵汤亚飞何自福
- 关键词：番茄
- 文献传递
- 侵染广东省葫芦科作物的中国南瓜曲叶病毒的分子特征被引量：5
- 2021年
- 【目的】中国南瓜曲叶病毒(squash leaf curl China virus,SLCCNV)是危害葫芦科作物的主要病毒之一,可侵染南瓜、葫芦、冬瓜、黄瓜、甜瓜、哈密瓜,严重影响葫芦科作物生产。论文旨在探究SLCCNV广东分离物的分子特征、亲缘关系及其致病性,为SLCCNV的防控提供科学依据。【方法】从广东省湛江市雷州市和徐闻县、惠州市博罗县、河源市源城区以及佛山市高明区共采集53份疑似感染菜豆金色黄花叶病毒属(Begomovirus)病毒的葫芦科作物病样,提取总DNA,利用菜豆金色黄花叶病毒属通用引物AV494/CoPR进行PCR检测。选取PCR检测为阳性的样品进行RCA扩增、酶切、克隆及测序,获得各分离物基因组A组分(DNA-A)的全长序列;同时利用背向引物PCR扩增、克隆及测序,获得各分离物基因组B组分(DNA-B)的全长序列。将得到的SLCCNV广东分离物DNA-A和DNA-B全长序列在NCBI中进行BLAST分析,利用SDT1.2软件MUSCLE alignment方法对序列相似性作进一步比较分析,应用MEGA7软件对获得的SLCCNV广东分离物及已报道的SLCCNV分离物进行系统发育分析。采用同源重组技术,构建SLCCNV河源南瓜分离物的侵染性克隆,通过农杆菌介导注射接种南瓜子叶,测定其致病性。【结果】PCR检测结果表明,53份疑似病样中有52份感染了菜豆金色黄花叶病毒属病毒;进一步从南瓜、葫芦、冬瓜以及白瓜4种葫芦科作物病样中分别克隆获得8个SLCCNV广东分离物基因组全序列,DNA-A组分全长大小为2735—2739 nt,含有6个ORF,与已报道SLCCNV相同。DNA-B组分大小为2701—2721 nt,含有2个ORF,分别编码与病毒运动相关的蛋白BC1和BV1。序列相似性比较结果显示,广东不同分离物DNA-A组分核苷酸序列相似性在94.9%以上,与已报道的SLCCNV其他分离物的相似性在88%以上;所获得的DNA-B组分核苷酸序列相似性在86.7%以上,与已报道的SLCCNV其他分离物的相似性在83%以上。系统发�
- 张丽汤亚飞李正刚于琳蓝国兵佘小漫何自福
- 关键词：分子特征侵染性克隆
- 芜菁花叶病毒广东分离物的分子特征和序列分析被引量：2
- 2021年
- 芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)是一种(+)ssRNA病毒,基因组全长约为10 kb,根据其基因组系统进化关系,可划分为basal-Brassica(basal-B)、basal-Brassica/Raphanus(basal-BR)、Asian-Brassica/Raphanus(Asian-BR)、world-Brassica(world-B)、Iranian和Orchis共6个组(Yasaka et al.,2017)。该病毒寄主范围广、危害大,至少能侵染43科156属300多种植物。目前,TuMV在我国大部分地区均有分布,已成为危害十字花科蔬菜的优势病毒。
- 汤亚飞张丽李正刚蓝国兵于琳何自福佘小漫
- 关键词：芜菁花叶病毒寄主范围十字花科蔬菜分离物TUMV系统进化关系
- 田阳番茄曲叶病毒侵染性克隆及其构建方法
- 本发明属于生物基因工程技术领域，具体涉及一种田阳番茄曲叶病毒，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。以及由含有该序列的病毒侵染性克隆、重组菌，由本发明提供的田阳番茄曲叶病毒侵染性克隆的重组菌具有较强的病毒侵染性和致病...
- 汤亚飞何自福李正刚佘小漫张丽于琳蓝国兵
- 广东番茄上首次检测到泰国番茄黄化曲叶病毒
- 泰国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl Thailand virus,TYLCTHV)属于双生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色黄花叶病毒属(Begomovirus),由烟粉虱传播...
- 张丽李正刚佘小漫于琳蓝国兵汤亚飞何自福
- 关键词：番茄
- 番茄黄化曲叶病毒侵染危害海南番茄及其分子特征被引量：4
- 2020年
- 【目的】明确引起海南三亚、东方和陵水番茄黄化曲叶病的病毒分子特征,为防控该病害提供科学依据。【方法】以2019年2月从海南三亚、东方和陵水采集的15份疑似番茄黄化曲叶病样本为材料,采用菜豆金色花叶病毒属病毒的通用简并引物AV494/CoPR对15份样本进行PCR检测,并对PCR检测为阳性的样本进行滚环扩增(RCA)及基因克隆,获得侵染海南三亚、陵水和东方番茄的病毒基因组全序列,进而在GenBank数据库BLASTh程序进行相似性比对,利用SDT 1.2的MUSCLE alignment进行序列相似性比较分析,采用MEGA 6.0的邻接法(Neighbor-joining,NJ)构建系统发育进化树,明确所获得病毒分离物与已报道分离物的亲缘关系。【结果】获得侵染海南三亚、陵水和东方番茄的3个番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)分离物基因组全序列,其大小均为2781 nt,编码6个开放阅读框(ORF),其中病毒链上AV1和AV2基因,互补链上AC1、AC2、AC3和AC4基因。相似性比对分析结果表明,TYLCV海南分离物与墨西哥和美国分离物的相似性在99.0%以上,与来自我国不同省(市)的14个TYLCV分离物的相似性在98.0%以上。系统发育进化分析显示,海南三亚、陵水和东方3个分离物与墨西哥、美国及我国北京和江苏分离物聚集在一个小分支,进一步与来自我国其他12个省(市)、韩国、哥斯达黎加和澳大利亚的分离物形成一个分支。【结论】侵染海南番茄的TYLCV可能来自我国大陆的番茄等种苗和烟粉虱带毒传入,也有可能来自墨西哥和美国等其他国家。
- 汤亚飞周洋张丽张丽佘小漫佘小漫蓝国兵邓铭光蓝国兵
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒分子鉴定
