张倩
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- RNA病毒致灾突变的分子机制
- RNA病毒始终处于差错致灾的边缘,推测这是RNA病毒准种在不破坏自身生活力的前提下保持其最佳适应度的一种策略。研究表明,高的遗传变异力作为一种生物学特性对于RNA病毒而言也许是有利的,这是进化的基础。但这一基础也可被作为...
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- 文献传递
- 口蹄疫病毒3D基因的克隆表达及功能分析被引量:1
- 2006年
- 利用RT-PCR技术扩增了口蹄疫病毒(FMDV)编码RNA依赖的RNA聚合酶的3D基因,并将其克隆到原核表达质粒载体pET-28a(+)中。3D基因经测序确认后在大肠杆菌BL-21中表达,表达产物纯化的目的蛋白进行Western-blotting检测,获得分子量约55KDa的单一3D基因表达产物。利用RNA体外复制体系和荧光定量PCR技术,证明纯化的3D基因表达产物RNA依赖的RNA聚合酶具有较高的酶活性,可以在体外从头合成FMDVRNA,且主要以引物依赖的方式合成病毒基因组。
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- 关键词:口蹄疫病毒荧光定量PCR
- 应用改良的实时TaqMan荧光定量RT-PCR技术检测口蹄疫病毒及其3D基因转录水平被引量:4
- 2006年
- 将改良的实时TaqMan荧光定量RT-PCR技术应用于口蹄疫病毒感染体内和体外的定量检测以及其3D基因转录水平分析。结果表明:对样品中口蹄疫病毒基因组RNA的检测灵敏度可达l0个基因拷贝,可同时检测病毒正负链复制水平且重复性较好,所测口蹄疫病毒3D基因转录水平可高达6.9×104拷贝/μL;与实时SYBRGreenⅠ染料RT-PCR技术比较,改良的实时TagMan荧光定量RT-PCR技术检测灵敏度高6.7倍。以上结果证实,改良的实时TaqMan荧光定量RT-PCR技术在病毒检测和基因表达水平分析方面有更高的灵敏度和特异性。
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- 关键词:口蹄疫病毒