张志
- 作品数：103 被引量：631H指数：13
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划科技基础性工作专项广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 我国部分省份猪流行性腹泻的流行病学监测被引量：26
- 2014年
- [目的 ]为摸清我国猪群流行性腹泻的感染状况,[方法 ]从2011年底到2014年3月,对云南、广西等29个省份开展了猪群腹泻疫情流行病学调查,采集、收集了发生腹泻症状的发病猪群样品(新鲜粪便、肠道组织等),进行了猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等多种病原检测。[结果 ]在7021个调查猪场中,出现腹泻的阳性猪场4060个(57.83%)。在收集的1383份腹泻样品中,利用RT-PCR方法检测到PEDV阳性样本686份(49.58%),其中腹泻发病猪样品中PEDV的检出率为67.82%,675份组织样品共检测出PEDV阳性样本86份(12.75%)。[结论 ]这表明我国猪场PEDV的感染十分普遍。对S基因进行分子流行病学分析发现,我国PEDV流行毒株与已有PEDV毒株可以分为2个完全不同的进化分支G1和G2,G1以CV777和DR13等疫苗株和早期毒株为主,G2则以2011-2013年流行毒株为主,流行毒株之间的同源性为97.8%-100%,与疫苗株CV777之间的同源性为94.3%-94.5%。
- 张志董雅琴刘爽吴发兴邵卫星李晓成
- 关键词：猪流行性腹泻流行病学调查
- CSFV陕西分离株SXCDK全基因的克隆与分析被引量：4
- 2011年
- 【目的】分离猪瘟病毒（CSFV）SXCDK株,测定其全基因组序列,研究其分子特性及与其他毒株的亲缘关系,为猪瘟病毒分子流行病学研究积累材料。【方法】从陕西省西安市采集疑似猪瘟病料进行病毒分离,获得猪瘟病毒SXCDK株。根据GenBank上发表的猪瘟病毒全基因序列及相关参考文献,合成11对引物,应用RT-PCR技术分11段扩增CSFV分离株SXCDK基因,拼接后获得其全基因组（GenBank登录号：GQ923951）。利用DNAstar、ClustalX1.83和Mega 4.1等软件,对分离株SXCDK与其他猪瘟病毒毒株的核苷酸和氨基酸序列进行比较分析。【结果】CSFV陕西分离株SXCDK基因组全长12 296 nt,由373 nt的5′非翻译区、编码3 899个氨基酸的11 697 nt开放阅读框和226 nt的3′非翻译区组成。分离株SXCDK和其他毒株的核苷酸序列同源性为83.6%~96.2%,氨基酸序列的同源性为91.3%~97.8%。从进化的角度来看,分离株SXCDK与台湾分离株96TD的亲缘关系最近,两者之间的进化距离为0.038,分离株SXCDK与2006年陕西省分离株SXYL2006进化距离较远,两者之间的进化距离为0.065。CSFV SXCDK株属于2.1a亚群毒株。【结论】分离株SXCDK是我国内地首株已确定全基因序列的猪瘟病毒2.1a亚群毒株,与同亚群的96TD亲缘关系最近。
- 李玲伟张志吴发兴程伟杨若松张燕霞刘爽郑辉李晓成陈德坤
- 关键词：猪瘟病毒全基因
- 一种鹦鹉多重病毒检测引物、检测试剂盒、病毒检测方法及应用
- 本发明属于动物病原分子检测技术领域，具体涉及一种鹦鹉多重病毒检测引物、检测试剂盒、病毒检测方法及应用。本发明所述试剂盒分别利用鹦鹉喙羽病病毒的CP基因、鹦鹉幼雏病病毒VP1基因以及禽腺病毒hexon基因为模板，用特定引物...
- 李阳张志孙学强于晓慧路平尼博周晓翠徐天刚孙明军王琳
- 文献传递
- 禽流感病毒A/CHICKEN/GUANGDONG/3/01(H5N1)HA基因的克隆及其真核表达载体的构建
- 本研究克隆了一株鸡源AIV H5N1亚型PQ分离株的HA基因,并对其进行了序列分析.结果表明HA开放阅读框内含有1707个碱基,编码568个氨基酸,其中HA1 330个氨基酸,HA2 222个氨基酸.HA基因与HK156...
- 赵雪丽范根成 刘新文 李明义 岳华张志
- 关键词：HA基因真核表达载体
- 文献传递网络资源链接
- H5N1亚型禽流感病毒NS1的克隆和原核表达
- 2008年
- 利用RT-PCR技术扩增了一株H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的NS1基因,克隆到pGEM T-easy载体上,经序列测定和分析正确后,将该基因插入到pET-32a载体中构建原核表达载体pET-NS1,阳性重组质粒转化BL21感受态细胞,用1mmol/L的IPTG诱导和SDS-PAGE电泳后获得了分子质量约为51ku的NS1融合蛋白。通过Western-blotting发现NS1蛋白可与H5N1亚型AIV单因子血清反应。为建立H5N1亚型AIV野毒株和疫苗株的特异性鉴别方法奠定了基础。
- 袁凯张志张乐翠李晓成黄保续张燕霞
- 关键词：禽流感病毒非结构蛋白
- 我国南方某省猪繁殖与呼吸综合症病毒分离株分子流行病学分析被引量：8
- 2008年
- 根据GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)VR-2332的基因序列设计并合成了一对针对ORF5基因的引物,通过RT-PCR方法对我国南方某省部分地区分离的14个PRRSV分离株进行扩增,获得了大约773bp的DNA片断,将目的片断与pMD18-T载体进行连接并测序。应用DNAStar分析所测序列,并与LV、VR-2332、CH-1a、BJ-4、HB-1、HB-2、JX-1等毒株的序列进行比较。核苷酸序列分析表明:14株病毒的与JX-1ORF5基因同源性高达99.0%～99.8%,与CH-1a、HB-1、HB-2同源性达到91.4%～94.9%,与VR-2332、BJ-4同源性达到86.1%～87.6%,与LV同源性仅为55.2%～55.7%。氨基酸序列分析表明:与JX-1同源性高达97.5%～99%;与VR-2332、CH-1a、BJ-4、HB-1、HB-2同源性达到85.6%～94.5%;与LV同源性仅为55.7%～56.2%。可知这14株病毒与JX-1遗传关系较近,可归属同一基因亚群。
- 吴发兴解生亮张燕霞张志李晓成刘道新黄保续
- 关键词：ORF5基因进化树分子流行病学
- 4种猪群常见病毒基因芯片检测方法的建立与应用被引量：8
- 2012年
- 【目的】建立猪瘟病毒(CSFV)、高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)及猪细小病毒(PPV)的基因芯片检测方法,为这4种病的实验室诊断和流行病学调查提供一种快速、高效的病原学诊断方法。【方法】根据GenBank中CSFV、高致病性PRRSV、PCV-2、PPV的相关基因序列,设计合成相关引物,采用PCR方法得到具有荧光标记的PCR产物,然后与含有特定检测探针的芯片进行杂交,建立其基因芯片检测方法,并对该方法的灵敏性和重复性进行检测。应用建立的基因芯片检测方法,对150份临床样品进行检测。【结果】建立了针对CSFV、PRRSV、PCV-2和PPV 4种病毒的基因芯片检测方法,该方法对临床150份样品的检测结果显示,CSFV阳性样品有25份,高致病性PRRSV阳性样品有45份,PCV-2阳性样品有70份,PPV的检测结果全部为阴性,其中混合感染样品有18份。【结论】建立了对CSFV、PRRSV、PCV-2、PPV 4种猪群常见病毒的基因芯片检测方法,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。
- 杨若松姜金庆张志李晓成王建华任夫波张丽丽
- 关键词：基因芯片猪瘟病毒高致病性猪蓝耳病病毒猪圆环病毒2型猪细小病毒
- 猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2011年
- 本研究在CSFV 5′端非编码区设计一对引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的重组质粒为标准品,建立了一种检测CSFV的荧光定量PCR方法（FQ-PCR）,对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,可特异地检测CSFV,该方法在101~107拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,灵敏度可达10拷贝/μL,重复检测的变异系数均小于5%。临床样品检测表明建立的方法与套式PCR灵敏度相近。结果表明该方法重复性良好,可用于临床诊断。
- 任夫波张志张丽丽杨若松韩艳张燕霞李晓成单虎
- 关键词：猪瘟病毒荧光定量PCRTAQMAN探针
- 非洲猪瘟病毒结构蛋白p54的原核表达与反应原性鉴定被引量：6
- 2019年
- p54蛋白为非洲猪瘟病毒(ASFV)的主要结构蛋白之一,参与病毒对靶细胞的吸附与进入。为深入研究p54结构蛋白的抗原性,根据GenBank序列号(MK128995)对应的E183L基因序列,设计1对特异性引物扩增其整个CDS区,并克隆至pET-30a(+)载体,构建了表达p54蛋白的重组质粒pET-30a(+)-p54。用BL21(DE3)转化该质粒,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳,可见重组质粒表达出1条分子量约为20 kDa的特异性条带,且重组表达蛋白以融合表达蛋白形式存在于上清。进一步通过His亲和层析法纯化目的蛋白,用ASFV阳性血清进行蛋白质免疫印迹反应,发现表达的重组p54蛋白能与ASFV阳性血清产生特异性反应,表明p54蛋白表达成功。本研究为ASFV抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。
- 官丽娟邵钰任伟杰宫枫举韩同福邹艳丽孙学强孙学强吴晓东黄保续
- 关键词：非洲猪瘟病毒结构蛋白
- 河北省猪腹泻相关病毒的检测及猪流行性腹泻病毒S基因遗传变异分析被引量：7
- 2018年
- 为了解当前河北地区猪腹泻主要相关病毒流行情况,对2016年4月—2017年2月收集的河北地区腹泻样品,采用荧光定量PCR检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒,并对扩增获得的9株PEDV S基因进行测序和序列分析。结果显示,全年腹泻病发生率为9.70%,在春冬季节多发。其中猪流行性腹泻病毒检出率最高,为13.89%,其在仔猪中检出率为19.28%,在育肥猪中检出率为17.24%。对PEDV S基因氨基酸序列分析显示,目前河北省PEDV流行毒株分布在G2群中的2个进化分支,部分毒株发生多处独特氨基酸突变。本研究表明,2016年河北地区PEDV对仔猪的感染情况有所缓解,而对育肥猪感染率较高,PEDV流行毒株S蛋白进化分支和突变较多提示PEDV流行毒株毒力和抗原活性可能发生改变。
- 张若曦张志顾文源刘天驹李翀王建昌李彬袁万哲王玉清韩庆安
- 关键词：猪病毒性腹泻猪流行性腹泻病毒
