张志仁
- 作品数：12 被引量：53H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学环境科学与工程生物学更多>>
- CpG-ODN被小神经胶质细胞摄取的特点及其在小神经胶质细胞内的分布
- 目的:CpG-ODN为强有力的免疫刺激剂,在抗肿瘤,抗感染等方面具很强的临床实用价值。为明确小神经胶质细胞摄取CpG-ODN的机制和特点,为其在神经系统的应用奠定基础,我们研究了CpG-ODN在小神经胶质细胞内的分布和摄...
- 张志仁张桂梅冯作化
- 关键词：细胞内分布
- 文献传递
- H22肿瘤细胞aptamer的筛选与结构分析被引量：4
- 2006年
- 目的:获得与H22肿瘤细胞特异性结合的aptamer。方法:利用SELEX技术,以小鼠DC细胞为反筛选细胞,以H22肿瘤细胞为靶细胞,从体外合成的80bp随机单链DNA文库中筛选出能与H 22肿瘤细胞特异结合的aptamer。采用荧光标记引物法检测aptamer与H 22肿瘤细胞的亲和力。所获得的aptamer采用MACAWv2.05软件进行aptamer序列的一级结构同源序列比较,用DNASIS v2.5软件计算分析序列最低二级结构能量值,获得其二级结构模拟图。结果:本实验设计的文库序列:5′-CGTCGCTGCACATTCCG-N46-CGCACAGCTGGGA GTAC-3′具有较高的扩增效率,适合于aptamer与以细胞为靶物质的筛选。经过11轮循环筛选,随机单链DNA文库与靶细胞结合的荧光强度从1%上升到59%,结合曲线进入平台期,表明结合已基本处于稳定状态,因此可以判断aptamer与靶细胞的结合基本已经处于饱和状态。对所获得的32个aptam er进行测序,然后进行一级结构和二级结构分析。一级结构分析获得5个保守序列:AGGGA、AGAAGG、GTGAXAA、ATAGT、CAAGG,其余10个aptamer无同源序列。二级结构分析表明,aptamer形成的茎环、凸环结构可能是与H 22肿瘤细胞特异性结合的结构基础。亲和力检测结果表明第24号aptamer具有最强的亲和力。结论:利用随机单链寡核苷酸文库成功获得与H22肿瘤细胞特异结合的aptamer,其一级和二级结构与亲和力密切相关。
- 周宇凡张桂梅冯作化袁野张志仁
- 关键词：SELEXAPTAMER
- 完整弓形虫P35重组蛋白IgM-酶联免疫吸附测定法检测弓形虫急性感染被引量：5
- 2003年
- 为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35 GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断 ,构建了可表达P35 GST的JM10 9细胞株 .采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹 (Westernblot)分析所表达的蛋白质 ,并用纯化的重组蛋白进行IgM 酶联免疫吸附测定法 (IgM ELISA)检测不同病人血清中的抗 P35抗体 .SDS PAGE分析发现P35 GST重组蛋白的大小约 6 0ku ,为一亲水性蛋白 ,蛋白质印迹分析表明该蛋白与弓形虫阳性感染病人的血清有特异性反应 .利用P35 GST为抗原 ,对 6 0例血清进行IgM ELISA分析 ,发现P35 GST可明显区分近期感染和既往感染 ,在弓形虫的诊断上有很大的应用前景 .
- 吕斌吴少廷周宜开徐顺清张仁利高世同林敏张志仁
- 关键词：弓形虫感染
- 多聚鸟嘌呤序列对小神经胶质细胞摄取CpG-ODN和诱导分泌细胞因子的影响
- 目的:CoG-ODN可诱导Th1型免疫反应,在抗肿瘤,抗感染等方面具很强的临床实用价值。但未修饰核酸容易降解,细胞摄取效率低。而硫代修饰核酸虽然具有很好的稳定性,却有细胞毒性。多聚鸟嘌呤可形成四聚体结构,增强核酸稳定性,...
- 张志仁张桂梅冯作化
- 关键词：免疫激活
- 文献传递
- CpG-ODN被胶质母细胞瘤细胞摄取的特点及其在胶质母细胞瘤细胞内的分布
- 目的:胶质母细胞瘤为最常见和恶性程度最高的脑部肿瘤之一,由于传统治疗方法疗效较差,胶质母细胞瘤成为肿瘤基因和免疫治疗研究的一个活跃研究领域。虽然实验肿瘤治疗发展很快,但目前关于细胞如何摄取治疗性的寡核苷酸,以及寡核苷酸在...
- 张志仁张桂梅冯作化
- 关键词：胶质母细胞瘤细胞内分布
- 文献传递
- 虫荧光素酶报告基因用于二噁英类化学物质的检测被引量：14
- 2001年
- 虫萤光素酶报告基因检测二英类化学物质与传统的EROD法比较 ,灵敏度及线性范围均优于EROD法 ,并且检测时间缩短 ,操作简便。
- 张志仁徐顺清周宜开任恕刘志伟
- 关键词：二恶英虫荧光素酶报告基因环境污染物生物监测
- 二恶英反应增强子调控的虫荧光素酶报告基因质粒的构建被引量：4
- 2001年
- 为加强二恶英类化学物质的快速筛选和半定量检测 ,我们构建了一在二恶英反应增强子调控下的虫荧光素酶报告基因质粒。二恶英反应增强子来源于pHAV质粒 ,MMTV启动子来源于 pCatM质粒 ,上述两者连接后与虫荧光素酶载体连接 ,转染人HepG2肝癌细胞 ,以 2 ,3,7,8 四氯代二苯并二恶英 (TCDD)诱导报告基因表达后检测虫荧光素酶活性。结果表明该质粒中虫荧光素酶的表达受二恶英反应增强子的调控 ,且在一定浓度范围内虫荧光素酶的活性与TCDD的量呈线性关系。研究显示该质粒转染的细胞株有望用于快速筛选及半定量检测二恶英 ,可进一步加强研究作为二恶英类化学物质监测的常规方法。
- 张志仁徐顺清周宜开任恕吕斌
- 关键词：虫荧光素酶报告基因质粒
- 一株受二噁英类化学物质诱导表达的萤光素酶肝癌细胞系被引量：8
- 2001年
- 构建了一对二英类化学物质敏感的人肝癌细胞株 ,用于二英类化学物质生物筛选和快速半定量检测 .首先构建一在二英增强子调控下的萤光素酶报告基因质粒 ,该质粒转染入人肝癌细胞株HepG2 ,筛选稳定转染细胞株 .2 ,3,7,8 四氯代二苯并二英 (TCDD)诱导稳定转染细胞株萤光素酶表达 ,发光检测萤光素酶活性 .该细胞株用于TCDD检测 ,检测下限为 1 1pmol L ,线性范围为 1～ 10 0pmol L .
- 张志仁徐顺清周宜开任恕刘志伟吕斌徐永俊
- 关键词：肝癌细胞系
- TLR配体对大鼠脊髓神经干细胞增殖的影响被引量：2
- 2006年
- 目的研究某些ToU样受体(TLR)的配体对脊髓神经干细胞(NPCs)增殖的影响。方法大鼠经单次腹腔注射TLR不同配体,用BrdU跟踪标记增殖的NPCs。结果硫代磷酸含CpG的寡核苷酸(PSCpG-ODN)未引起脊髓NPCs的明显增殖,而PolyI：C、LPS与R848可引起BrdU^+细胞显著性增加。注射PolyI：C或R848的大鼠脊髓BrdU^+细胞密度于注射后2～3 d达最高,随后快速降至正常水平。伴随NPCs增殖的还有中枢神经系统(CNS)先天免疫系统的激活,如神经小胶质细胞的活化。结论某些TLR的配体被TLR识别后可能参与脊髓内正常神经细胞的发生过程,提示机体的先天免疫反应可能与组织再生过程紧密相关,对开发促进脊髓损伤再生修复的药剂来说是一有价值的工具。
- 苏艳华张志仁王先良Hermann J Schluesener徐顺清
- 关键词：神经干细胞TLR增殖小胶质细胞脊髓
- 二恶英类化学物质的检测方法被引量：8
- 2002年
- 本文介绍了 2 0世纪 60年代以来二恶英类化学物质的检测方法。重点介绍了色谱法、免疫法和生物法 ,并对各种分析方法的优缺点进行了评述。提出了各方法运用的适用范围 ,为建立二恶英类化学物质分析方法提供了依据。
- 张志仁徐顺清周宜开任恕
- 关键词：二恶英色谱法免疫法生物法环境污染物环境监测
