张思楠
- 作品数：9 被引量：34H指数：4
- 供职机构：西华师范大学更多>>
- 发文基金：四川省教育厅青年基金四川省教育厅重大培育项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 1,4-二(2-苄硒乙氧基)蒽诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的研究
- 2016年
- 背景与目的:硒是人类生命活动中必不可少的微量元素之一,对人类健康的巨大作用是其他物质无法替代的。硒的小分子化合物1,4-二(2-苄硒乙氧基)蒽{1,4-bis[2-(benzylselanyl)ethoxy]anthracene,BSEA}具有杀菌消炎的作用,但BSEA的抗癌作用尚未见报道。该研究旨在探讨BSEA诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡及其作用机制。方法:不同浓度的BSEA处理人喉癌Hep-2细胞24 h后,采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞生长抑制率;在荧光显微镜下观察细胞形态;AnnexinⅤ-FITC法检测细胞凋亡;JC-1检测线粒体膜电位;酶标分析仪检测caspase-3和caspase-8活性;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分别检测Bax、XIAP mRNA和蛋白表达水平。结果:BSEA处理人喉癌Hep-2细胞24 h后,BSEA对其生长抑制呈剂量依赖性,IC_(50)为35.74μmol/L;80μmol/L BSEA处理的Hep-2细胞在荧光显微镜下可观察到明显的凋亡小体;磷脂酰丝氨酸外翻加剧;线粒体膜电位开始下降;caspase-3活性的影响呈剂量依赖趋势,而caspase-8活性未见显著变化;Bax的mRNA和蛋白表达水平上升,XIAP的mRNA和蛋白表达水平下降。结论:BSEA对人喉癌Hep-2细胞生长有明显的抑制作用,并能通过线粒体途径诱导细胞凋亡。
- 李莎张思楠秦大斌杨军伍春莲
- 关键词：HEP-2细胞细胞凋亡线粒体途径
- H_2O_2对人肝癌细胞Hep-G2凋亡的影响
- 2010年
- 探讨不同浓度H2O2对人肝癌细胞株Hep-G2细胞凋亡的影响.使用不同浓度(0.01、0.05、0.10、0.20、0.50mmol/L)的H2O2作用于Hep-G2细胞12h,通过丫啶橙-碘化丙啶(AO/PI)双重荧光染色法对Hep-G2细胞的形态变化进行观察;再进行DNA的提取和琼脂糖凝胶电泳观察DNA断裂情况.结果表明:不同浓度的H2O2处理后在荧光显微镜下可以区分正常对照细胞(0mmol/L)、染色质凝聚的早期凋亡细胞(0.01、0.05mmol/L)、细胞质皱缩和细胞核解体的晚期凋亡细胞(0.10、0.20mmol/L)和降解细胞(0.50mmol/L),在一定时间内随H2O2浓度的增加而增大,呈现浓度依赖性.DNA电泳结果显示发生凋亡的细胞基因组DNA形成弥散条带,从而表现出体外细胞凋亡的特征.因此,H2O2可以诱导Hep-G2细胞凋亡.
- 伍春莲房守敏耿文峰张思楠孙警辉李祥会
- 关键词：H2O2细胞凋亡DNA
- 正交试验法优化长春花愈伤组织继代培养条件被引量：1
- 2010年
- 研究了不同种类、不同浓度的植物生长调节物质组合对长春花愈伤组织继代培养细胞生长的影响.采用正交实验法设计长春花愈伤组织继代培养基,并连续继代四次.结果发现:经过四次继代后愈伤组织生长旺盛,呈颗粒状,疏松且含水量大,无褐化现象,且最佳继代培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 0.5mg/L+Vc 20mg/L.因此通过利用正交试验筛选激素浓度的配比可以对长春花愈伤组织的继代培养条件进行优化,为长春花悬浮细胞培养体系的建立提供最佳材料.
- 李祥会伍春莲房守敏孙警辉张思楠耿文峰杨军
- 关键词：愈伤组织6-BA2,4-D继代培养
- 茶多酚诱导卵巢癌COC1细胞凋亡的研究被引量：7
- 2011年
- 卵巢癌是女性生殖系统恶性肿瘤之一,而茶多酚具有抗肿瘤和抗氧化的作用,作者研究茶多酚对体外培养的卵巢癌COC1细胞凋亡的影响.采用不同浓度茶多酚处理卵巢癌COC1细胞,24h后分别采用AO/PI双染法和琼脂糖凝胶电泳法(DNA Ladder),观察和分析茶多酚对COC1细胞凋亡的影响.结果显示,低浓度茶多酚(≤500μg/mL)处理24h后,出现早起凋亡现象;而高浓度的茶多酚(2 000μg/mL)后,出现了明显的晚期凋亡现象;过高浓度(4 000μg/mL)处理,细胞出现死亡现象.不同浓度的茶多酚处理后,细胞均可检测到DNA Ladder,且随着茶多酚浓度的增加,DNA裂解程度加深,电泳中DNA Ladder更明显.实验结果表明,不同浓度茶多酚处理均可以诱导卵巢癌细胞株COC1产生细胞凋亡,研究结果为筛选新型的抗癌药物提供参考.
- 张思楠伍春莲陈杨琼孙警辉耿文峰杨军
- 关键词：茶多酚卵巢癌COC1细胞凋亡
- 茶多酚对Hep-G2细胞活性及形态的影响被引量：2
- 2011年
- 大量研究表明,长期饮茶尤其绿茶者,可大大降低各种癌变的发病率,而且对多种体内外肿瘤具有直接杀伤作用.作者通过采用不同浓度的茶多酚作用于体外培养的肝癌细胞株Hep-G2细胞,初步探讨茶多酚对Hep-G2细胞的凋亡作用.采用MTT法(噻唑蓝比色法)和AO-PI(吖啶橙-碘化丙啶)双重荧光染色法研究了茶多酚诱导Hep-G2细胞株的凋亡作用.MTT法研究结果表明,在一定的浓度范围内,茶多酚对Hep-G2细胞有明显的抑制作用,且存在良好的剂量效应关系,随着茶多酚浓度的升高,其对Hep-G2细胞的抑制率也升高.Hep-G2细胞经茶多酚作用后,细胞形态发生明显的变化,可见凋亡小体,荧光强度增强,细胞呈现凋亡现象.茶多酚在体外对Hep-G2细胞的增殖具有抑制作用,诱导其发生凋亡.研究结果为茶多酚的进一步开发应用奠定理论基础.
- 孙警辉伍春莲陈杨琼耿文峰张思楠
- 关键词：茶多酚MTT细胞凋亡
- 苦马豆素诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡研究被引量：4
- 2016年
- 苦马豆素具有广泛的抗肿瘤作用和免疫调节作用。本研究对苦马豆素诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的作用及其机制进行研究。通过不同浓度的苦马豆素处理Hep-2细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活性;荧光显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双标记检测细胞凋亡;JC-1检测线粒体膜电位;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测Bax和XIAP基因mRNA和蛋白质表达水平。在一定浓度范围内,苦马豆素抑制Hep-2细胞增殖,且呈剂量依赖性;荧光显微镜下细胞发生形态改变,并呈现典型的凋亡细胞特征;磷脂酰丝氨酸外翻加剧;线粒体膜电位逐渐下降;Bax的mRNA和蛋白质表达水平上升,XIAP的mRNA和蛋白质表达水平下降。苦马豆素通过调节细胞内Bax和XIAP的表达,并经线粒体信号途径诱导Hep-2细胞凋亡。
- 李莎张思楠杨军伍春莲
- 关键词：苦马豆素HEP-2细胞细胞凋亡线粒体途径
- 紫杉醇与白藜芦醇联合用药对人肝癌细胞HepG-2活性的影响被引量：4
- 2012年
- 作为两种较常见的抗癌药物,紫杉醇与白藜芦醇在临床试验中均证实具有良好的抗癌效果.本文意在研究紫杉醇与白藜芦醇单独及联合用药时对人肝癌细胞HepG-2活性的影响,探索两种药物联合应用时的药效变化.实验中通过CCK-8法测定了不同浓度的紫杉醇和白藜芦醇单独及联合用药时对人肝癌细胞HepG-2的活性影响,计算出其抑制率和半抑制率浓度,并通过金氏修正公式进行药效判定.结果发现当紫杉醇和白藜芦醇单独用药时,两者对HepG-2细胞的生长均有较高的抑制作用,在设定的药物浓度范围内,前后两者的抑制率分别达到了45.81%-81.80%和34.43%-93.60%,并且呈现出明显的剂量依赖性.当二者联合作用时,紫杉醇与白藜芦醇分别在在5-20μmol/L以及100-1000μmol/L的浓度范围内呈现出相加效果,且药品的半抑率制浓度均出现不同程度的降低,分别由单独用药时的1.47和122.07μmol/L下降至联合作用时的0.65和42.41μmol/L.据此判断,紫杉醇与白藜芦醇联合作用确实可显著增强药物对HepG-2细胞的抑制作用.二者具有相加抗肿瘤效果.
- 耿文峰伍春莲陈杨琼张思楠孙警辉
- 关键词：紫杉醇白藜芦醇人肝癌细胞HEPG-2CCK-8
- 松乳菇多糖含量的苯酚硫酸法检测研究被引量：15
- 2012年
- 采用水提醇沉,纤维素柱层析纯化制备松乳菇多糖,建立测定松乳菇多糖含量的方法.本文采用苯酚-硫酸法,分别考察该方法的测定波长、精密度、准确度及稳定性.结果表明,测定波长为490nm,样品松乳菇中多糖含量平均为56.0μg/mL,相对标准偏差(RSD)为0.47%,平均回收率为99.1%.苯酚硫酸法检测为松乳菇多糖的测定提供了一种快速简便可靠的方法.
- 陈杨琼伍春莲侯怡铃丁祥张思楠
- 关键词：松乳菇真菌多糖
- 提取航天诱变向日葵种子总RNA的一种有效方法被引量：1
- 2011年
- 目的:从航天诱变向日葵种子中提取高质量的总RNA。方法:采用改进的SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提一次,经LiCl过夜沉淀、DNaseⅠ处理、1/2体积的无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积的醋酸钠和2倍体积的无水乙醇沉淀总RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用PT-PCR鉴定RNA的质量。结果:提取的RNA电泳条带清晰,D260nm/D230nm、D260nm/D280nm值分别为2.09、2.00,其产量为35.30μg/100 mg,用PT-PCR能扩增出肌动蛋白基因片段。结论:采用该方法提取的总RNA纯度高、完整性好,适于进一步的分子生物学研究。
- 马西豹杨军张思楠崔小蓉汤泽生
- 关键词：RNA提取向日葵航天诱变多酚
