张晓玉
- 作品数：10 被引量：23H指数：3
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 水甘油通道蛋白基因StFPS1对玉米大斑病菌生长发育及侵染能力的影响
- 本实验室在前期研究中已经获得了玉米大斑病菌水甘油通道蛋白基因StFPS1，本研究在此基础上，采用RNAi技术获得了该基因的沉默转化子;通过比较转化子与野生型菌株在生长发育、侵入能力及其对高渗透胁迫的反应，明确该基因的功能...
- 张晓玉
- 关键词：玉米大斑病菌RNAI技术生长发育侵染能力
- 文献传递
- 玉米大斑病菌水甘油通道基因StFPS1的RNAi载体构建
- 玉米大斑病(Northern Leaf Blight of Com)是威胁玉米生产的一个重要的叶部真菌病害，在流行年份常造成重大的经济损失.引起该病害的病原菌为丝状病原真菌，其无性态为大斑凸脐蠕孢(Exserohilum...
- 张晓玉田兰王玥张盼谷守芹韩建民董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌RNAI
- 玉米大斑病菌MAPK超家族的全基因组鉴定及途径模型建立被引量：15
- 2014年
- 【目的】从全基因组水平鉴定玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)的MAPK超家族基因,并对其进行系统进化、基因结构、多重序列比对及保守位点分析,构建玉米大斑病菌中的MAPK级联途径模型,为深入研究该植物病原菌中MAPK级联途径的功能奠定基础。【方法】利用玉米大斑病菌基因组数据库,通过基于隐马尔科夫模型的HMMER 3.0软件搜索基因组,鉴定并获得MAPK超家族成员序列、基因组定位信息;采用MEGA 5.0软件进行系统进化分析;通过GSDS工具进行基因结构分析;利用ClustalX、MEME工具分析MAPK蛋白激酶区的保守性及保守位点。【结果】在玉米大斑病菌基因组中发现了4个MAPK基因、3个MAPKK基因和3个MAPKKK基因。系统进化分析将MAPK分为Kss1/Fus3、Slt2、Hog1及Ime2 4类;MAPKK分为Pbs2、Ste7及Mkk1 3类;MAPKKK分为Ste11、Bck1及Ssk2 3类。基因组定位及基因结构分析表明,MAPK超家族散布在基因组中,且MAPK基因的结构最为复杂多样,MAPKK次之,MAPKKK结构最简单。多重序列比对与保守位点分析表明,玉米大斑病菌MAPK超家族的激酶结构域均高度保守,其中MAPK具有保守的"-TxY-"磷酸化位点,MAPKK含有保守的"-SD[V/I]WS-"磷酸化位点,MAPKKK含有"-G[S/T][V/P][F/M][W/Y]M[A/S]PEV-"特异性保守位点。【结论】全基因组分析表明,玉米大斑病菌中包括4个MAPK基因、3个MAPKK基因和3个MAPKKK基因。通过系统进化、基因结构及多重序列比对和保守位点分析,在玉米大斑病菌中构建了Fus3/Kss1-homolog、Slt2-homolog、Hog1-homolog和Ime2-homolog4条MAPK级联途径,其中Ime2 homolog为一条新发现的MAPK级联途径。该信息为深入解析植物病原真菌MAPK超家族的功能奠定了基础。
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- 关键词：玉米大斑病菌系统进化
- 不同毒性玉米大斑病菌侵染对感病玉米叶片PPO活性的影响被引量：1
- 2014年
- 以前期研究中筛选得到的强毒菌株和弱毒菌株为试材,旨在探讨不同毒性玉米大斑病菌侵染对寄主多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)活性的影响。在确定了检测玉米PPO活性的最佳反应体系及最佳酶活测定时间的基础上,建立了快速准确测定PPO活性的方法;探讨了玉米大斑病菌强毒菌株YC和弱毒菌株01-23T侵染对寄主PPO活性的影响,结果发现,在优化的最佳试验条件下,弱毒菌株01-23T侵染对寄主防御酶PPO的影响与强毒菌株YC有很大不同,前者比后者更容易引发寄主防御反应,使寄主防御酶活性升高、抵抗力得以维持。为深入探讨玉米大斑病菌与玉米之间的相互作用奠定了基础。
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- 关键词：多酚氧化酶玉米大斑病菌
- 不同毒性玉米大斑病菌侵染对感病玉米叶片PAL活性的影响被引量：4
- 2014年
- 利用从自然界中分离纯化的156株玉米大斑病菌菌株中筛选得到的强毒菌株YC和弱毒菌株01—23T分别接种感病玉米叶片，测定玉米叶片苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的动态变化。结果表明，与不接种对照相比，接种强毒菌株YC1～2d时，玉米叶片PAL活性显著降低；接种3～4d时，PAL活性略有上升但差异不显著；接种5d时，PAL活性又显著降低。接种弱毒菌株01-23T1-2d时，玉米叶片PAL活性略有降低但差异不显著，接种3～5d时，PAL活性上升但差异仍不显著。PAL是玉米抵抗玉米大斑病的一种重要防御酶，在侵染初期，只有降低玉米叶片的PAL活性玉米大斑病菌才能达到成功定殖的目的，可为明确玉米大斑病菌致病性的生化机制提供一定理论依据。
- 张晓玉张温典田兰巩校东张运峰谷守芹范永山
- 关键词：玉米大斑病弱毒菌株
- 玉米大斑病菌水甘油通道蛋白基因StFPS1超表达载体的构建
- 玉米大斑病(Northern Leaf Blight of Corn)是玉米上的重要叶部病害,在我国东华北、西北和南方山区的冷凉玉米产区较易流行,严重年份感病品种减产可达50％。引起玉米大斑病的致病菌为玉米大斑病菌(Se...
- 田兰张晓玉张盼王玥谷守芹董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌超表达
- 玉米大斑病菌转录因子StSte12的表达特性分析及其调控基因的筛选被引量：2
- 2013年
- 【目的】确定玉米大斑病菌转录因子StSte12在基因组中的位置,分析目的蛋白质StSte12的结构特征;明确StSTE12在病菌不同发育时期的表达情况;筛选可能受StSte12转录因子调控的基因,分析其匹配序列的结构特征,并比较它们在病菌的中表达情况。【方法】利用生物信息学方法,确定StSte12在玉米大斑病菌基因组中的位置并解析目的蛋白质StSte12的结构特征;利用Western blot技术分析StSTE12在病菌不同发育时期的表达规律;根据酿酒酵母Ste12转录因子的下游调控基因,筛选病菌中可能受StSte12调控的功能基因;并利用生物信息学方法得出下游调控基因的结合位点;利用RT-PCR技术,分析这些基因在StSTE12 RNAi转化子与野生型菌株中的表达情况。【结果】StSTE12的ID为105656,该基因位于scaffold_13正链的1061747-1064127位置;该蛋白具有Ste12-like蛋白特有的保守结构域(STE homeodomain和ZnF_C2H2锌指结构)及空间结构;StSTE12在附着胞时期表达量最大;筛选了部分StSte12调控基因,与StSte12的匹配序列为T\C GAAAC A\G,中间部分GAAAC非常保守;StKAR5在野生型中表达量小于StSTE12 RNAi转化子,StBEM2、StBUD8、StCHS7相反;StRAX2的表达量在野生型和转化子中一致。【结论】StSte12具有Ste12-like所特有的DNA结合结构域和空间结构;该蛋白在附着胞发育中发挥重要功能;筛选了部分StSte12的调控基因,其匹配序列可概括为T\C GAAAC A\G,且证实了这些基因受StSte12调控。
- 张长志李坡谷守芹巩校东杨阳范钰田兰张晓玉韩建民董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌转录因子调控基因
- 玉米大斑病菌StHog1互作蛋白的筛选
- 由玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)引起的玉米大斑病是威胁玉米生产安全的重要病害之一,常造成严重的经济损失.探明调控病菌生长发育及致病性的信号转导途径、寻找作用于信号转导途径重要节点的靶标药物对于有...
- 张晓玉田兰王玥张盼谷守芹韩建民董金皋
- 玉米大斑病菌STK2的基因组定位、蛋白质结构预测及其表达被引量：4
- 2013年
- 【目的】确定玉米大斑病菌STK2在基因组中的位置;解析目的蛋白质Stk2的结构特征;构建STK2真核表达载体,获得真核表达体系中的胞外分泌蛋白。【方法】利用生物信息学方法,确定STK2在玉米大斑病菌基因组中的确切位置,解析Stk2蛋白质的结构特征;根据STK2的ORF序列及真核表达载体pPIC9K的多克隆位点设计引物,构建真核表达载体,采用电击转化法将重组质粒转入宿主菌GS115中进行诱导表达,利用SDS-PAGE检测并鉴定目的蛋白质。【结果】玉米大斑病菌STK2的ID为91433,该基因位于scaffold_3正链的1561986-1563262位置;Stk2蛋白具有MAPK类蛋白激酶的特征性保守结构域,其二级结构主要以α螺旋和无规则卷曲为主,β折叠较少且主要存在于N端,其三级结构具有1个较小的N端域和1个较大的C端域;成功构建了STK2的真核表达载体pPIC9K-STK2,筛选获得了抗性转化子;在毕赤酵母菌中,经甲醇诱导得到了1个分子量约为41 kD的蛋白质组分且被分泌至胞外,该蛋白质的大小与理论分子量相符,推测Stk2蛋白已在宿主菌中表达并被分泌至胞外。【结论】玉米大斑病菌STK2位于scaffold_3正链的1561986-1563262位置;Stk2具有MAPK激酶的所有特征性保守结构域,属于典型的MAPK蛋白激酶;该基因能在真核细胞中表达,获得了可溶性分泌蛋白质,为Stk2蛋白的多克隆抗体制备及基因的功能研究奠定基础。
- 巩校东范钰李坡杨阳张长志田兰张晓玉范永山韩建民谷守芹董金皋
- 关键词：玉米大斑病菌生物信息学分析真核表达MAPK
- 玉米大斑病菌水甘油通道蛋白StFps1互作蛋白的筛选
- 玉米大斑病(Northern Leaf Blight of Corn)是玉米上的重要叶部病害,引起该病的病原菌为玉米大斑病菌.植物病原真菌生长在复杂的环境中会受到各种胁迫,与此相适应,病菌在进化过程中也形成了一系列的机制...
- 田兰张晓玉张盼王玥谷守芹董金皋
