张瑞晨
- 作品数：4 被引量：107H指数：4
- 供职机构：北京中医药大学中药学院生物制药系更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 何首乌不同分离部位对人正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞的杀伤作用被引量：26
- 2012年
- 目的:考察何首乌不同分离部位对人正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞的杀伤作用,寻找能明显杀伤肝癌细胞但对正常肝细胞生长影响较小的分离部位,并初步探讨其对2种细胞不同作用的机制。方法:何首乌70%乙醇提取物经AB-8型大孔树脂吸附,依次用水、50%乙醇和95%乙醇洗脱得到何首乌乙醇提取物的水洗脱部位(RW)、50%乙醇洗脱部位(R50)和95%乙醇洗脱部位(R95);体外培养人正常肝L02细胞及肝癌HepG2细胞,用含何首乌各分离部位的细胞培养液与细胞共同孵育一定时间后,MTT检测及倒置镜下观察药物对L02及HepG2细胞生长的影响,筛选具有区别杀伤作用的部位,考察其剂量和时间作用效应。进一步通过Giemsa染色观察药物作用后细胞核的变化,流式细胞术检测L02细胞周期和凋亡情况。结果:MTT和倒置镜下镜检结果均表明,R50对L02细胞和HepG2细胞具有明显的区别杀伤作用。Giemsa染色和流式细胞术结果表明,R50诱导2种细胞凋亡的程度不同:试验的各个时相下HepG2中凋亡细胞的比例均明显高于L02细胞(HepG2细胞中凋亡细胞的比例在24,48,72 h分别为83.62%,60.52%,74.49%,L02细胞中凋亡细胞的比例则分别为31.02%,20.57%,25.32%,2种细胞阴性对照组中凋亡细胞的比例在各个时相均小于5%),但对2种细胞的细胞周期没有明显影响。结论:何首乌提取物的R50部位对人正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞具有明显的区别杀伤作用,区别杀伤作用的本质是药物诱导2种细胞凋亡的程度不同。
- 张瑞晨张超孙震晓邓巧虹
- 关键词：何首乌肝癌细胞
- 何首乌提取物对人正常肝细胞L02周期阻滞及凋亡的影响被引量：61
- 2010年
- 目的:分析何首乌中致人肝细胞损伤物质的化学成分,初步探讨其致肝细胞损伤的机制。方法:生、制何首乌用70%乙醇提取,提取物经AB-8型大孔树脂吸附分离,依次用水、50%乙醇和95%乙醇洗脱得到生何首乌和制何首乌水洗脱物、50%乙醇洗脱物和95%乙醇洗脱物;生、制何首乌直接水煎煮得到水提物。体外培养人正常肝细胞L02,用含何首乌洗脱物和水提物的细胞培养液与细胞共同孵育一定时间后,检测药物对L02细胞生长的影响,筛选致肝细胞损伤成分。高效液相色谱法对有明显细胞毒作用的洗脱物进行成分分析,噻唑蓝法检测其对L02细胞增殖的影响,Giemsa染色进行形态学观察,流式细胞术检测L02细胞周期和凋亡情况。结果:生、制何首乌95%乙醇洗脱物对L02细胞有明显的生长抑制作用,其他组分对L02细胞的增殖无明显影响。成分分析显示,生、制何首乌95%乙醇洗脱物中大黄素含量最多,分别为(18.53±2.96)%和(10.28±1.34)%;何首乌95%乙醇洗脱物及大黄素可使L02细胞阻滞于S期,并诱导L02细胞凋亡。结论:何首乌95%乙醇洗脱物是何首乌中导致肝细胞损伤的主要物质,而大黄素是导致肝细胞损伤的成分之一。
- 张瑞晨刘斌孙震晓徐冬艳
- 关键词：何首乌肝细胞肝损伤蒽醌大黄素
- 何首乌R50部位诱导人结直肠癌细胞凋亡的作用机制被引量：13
- 2014年
- 目的考察何首乌R50部位对体外培养的人结直肠癌细胞活性的影响,探究其对人结直肠癌细胞周期和凋亡的作用。方法体外培养人结直肠癌HT29和HCT116细胞24 h,加入何首乌R50部位50-300 mg·L^-1继续培养24,48和72 h,MTT法检测细胞存活率;何首乌R50部位50,100和200 mg·L^-1分别与HCT116和HT29细胞作用48 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;何首乌R50部位100 mg·L^-1与HCT116和HT29细胞作用48 h,Giemsa染色检测细胞及核的变化,Western蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶原3和Pdcd4蛋白的表达。结果何首乌R50部位对HCT116和HT29细胞存活抑制作用显著,呈时间和浓度依赖性;不同浓度何首乌R50部位与HCT116和HT29细胞作用48 h后,对细胞周期的影响均不显著;但随着何首乌R50部位浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,200 mg·L^-1组HCT116细胞凋亡率由对照组的（5.85±0.35）%增加至（27.65±1.62）%（P〈0.05）,HT29细胞的凋亡率由（10.25±0.77）%增加至（35.35±0.35）%（P〈0.05）;何首乌R50部位100 mg·L^-1作用HCT116和HT29细胞48 h,Giemsa染色可见部分细胞出现细胞固缩、核染色质凝集、凋亡小体形成等细胞凋亡形态;胱天蛋白酶原3和Pdcd4蛋白表达均下降。结论何首乌R50部位主要通过诱导人结直肠癌HCT116和HT29细胞凋亡而使其存活率下降,并通过胱天蛋白酶依赖信号通路诱导人结直肠癌细胞凋亡,Pdcd4蛋白表达下调可能与其相关。
- 杨红莉李瑞婧李子木张瑞晨李宝赛孙震晓
- 关键词：HCT116细胞HT29细胞细胞凋亡
- 何首乌生品与炮制品对大鼠肝脏的毒理学研究被引量：26
- 2013年
- 目的:比较中药何首乌生品与炮制品对大鼠的肝毒性。方法:常规煎煮获取生何首乌与制何首乌水提物(分别命名为RPWE和PPWE);分别用RPWE和PPWE灌胃SD大鼠,均按何首乌生药量设低剂量组[20 g/(kg·d)]和高剂量组[40 g/(kg·d)],分别进行30 d及60 d实验;观察用药后大鼠的一般状况,并于实验结束时采集大鼠血液进行丙氨酸氨基转移酶(ALT)与天门冬酸氨基转移酶(AST)检测,同时测定大鼠肝重,计算肝脏系数,对大鼠肝脏进行常规组织切片和HE染色。结果:30 d及60 d实验中,给药组大鼠较空白对照组大鼠表现怠动、毛色不华且有腹泻现象,随着药物浓度的增大,怠动、毛色不华以及腹泻现象加重;灌胃60 d,给药组大鼠体重较空白组大鼠明显变轻,且给药浓度愈大,大鼠体重愈轻;30 d及60 d实验中,给药组大鼠肝脏系数均没有明显变化。大鼠血液生化检测发现,各给药组相对于空白对照组转氨酶(ALT、AST)没有显著性增加,但是灌胃60 d的大鼠肝脏切片HE染色发现均有不同程度的脂肪变性,炎性细胞浸润等。结论:生、制何首乌灌胃60 d,肝脏有轻度脂变及炎性细胞浸润。
- 张超张瑞晨孙震晓
- 关键词：何首乌灌胃HE染色
