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草鱼BAC文库中TLR3基因的筛选及表达特征的研究被引量：3: 2010年; 【目的】从草鱼的BAC文库中筛选TLR3基因的阳性克隆,研究该基因在草鱼体内的表达规律,为进一步研究奠定基础。【方法】用同位素P32标记的探针,对53 216个BAC克隆以双份平行形式制备的DNA尼龙膜进行杂交筛选,用半定量方法检测TLR3在草鱼不同组织(鳃、心脏、肠、肝胰脏、肌肉、皮肤、脾脏、头肾和中肾)中的表达模式,用实时荧光定量RT-PCR研究草鱼感染呼肠孤病毒后不同时间TLR3的表达规律。【结果】获得了2个TLR3基因的阳性BAC克隆,该基因在被检测的9个组织中都有表达,其中在脾脏、皮肤中的表达量较高。在感染呼肠孤病毒后24 h,草鱼肝胰脏中TLR3的相对表达量显著升高(P<0.05);感染后48 h,其相对表达量恢复到正常水平(P>0.05)。【结论】成功筛选到草鱼TLR3的BAC克隆,该基因在草鱼体内不同组织中有广泛表达,并且参与了草鱼抗呼肠孤病毒的过程。; 杨春荣苏建国张荣芳董捷汪亚平张成勋; 关键词：草鱼 BAC文库基因表达

四种内参基因在草鱼体内和体外的表达稳定性评价: 本研究通过对p-actin、18S rRNA、GAPDH、EFla四种常用内参基因在草鱼不同组织间的差异表达、病毒感染条件下的时序表达、草鱼肾细胞GCRV感染和poly(I:C)刺激条件下的时序表达中的稳定性评价,为研究...; 张荣芳苏建国董捷杨春荣; 关键词：草鱼内参基因

草鱼TLR7基因的克隆与病毒感染条件下的表达研究: 草鱼(Ctenopharyngodon idella)是我国重要的淡水经济鱼类之一,也是我国养殖产量最高的鱼类之一,然而由草鱼呼肠孤病毒引起的草鱼出血病是危害草鱼最为严重的病毒性疾病,给水产养殖业造成了重大的经济损失,因...; 张荣芳; 关键词：草鱼内参基因基因克隆 MRNA表达; 文献传递

牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估被引量：4: 2012年; 采用RT-PCR扩增亚麻种子(Linum usitatissimumLinn)FAD3B基因,构建不同启动子的两种重组真核表达载体pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B和pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,通过qRT-PCR检测转基因细胞中FAD3B基因的表达水平。以不同过表达水平的转基因细胞为试验对象,评价9种候选内参基因ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2和HMBS的稳定性。根据GeNorm、NormFinder和BestKeeper 3种统计学算法得到的稳定性值对基因进行排序。结果显示,内参基因稳定性的综合排序为PPP1R11>EEF1A2>18S rRNA>RPS15A>GAPDH>HMBS>UXT>ACTB>SF3A1,其中PPP1R11和EEF1A2是最稳定的内参基因。稳定内参的选择可以更加准确地校正基因的表达水平,从而为阐述基因的功能奠定了坚实的基础。; 王子东苏建国段彪杨春荣高广琦康峰张荣芳胡晓明扈廷茂李光鹏; 关键词：转基因细胞内参基因 GENORM NORMFINDER

草鱼TLR7基因的克隆与双链RNA病毒感染条件下的表达模式: 本研究拟从机体本身的抗病毒免疫系统出发,克隆识别病毒单链RNA的模式识别受体TLR7基因,研究其在病毒感染条件下的表达模式,为草鱼出血病的抗病机理及抗病育种奠定基础,从分子水平为上草鱼出血病的防治提供思路.; 张荣芳苏建国杨春荣; 关键词：草鱼出血病受体基因; 文献传递

草鱼四种内参基因在体内外表达的稳定性评价: 在应用实时荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)技术检测基因表达的过程中，通常要选择合适的内参基因对目的基因的表达进行校正分析，从而提高qRT-PCR结果的准确性和可靠性。本研究通过对β-actin、18S rRNA、...; 张荣芳董捷杨春荣苏建国; 关键词：草鱼内参基因

次级共生菌的检测及三种共生菌对麦长管蚜温度适应性的影响: 麦长管蚜Sitobion avenae(Fabricius)是一种世界性的重要农业害虫，取食植物韧皮部汁液，传播植物病毒，能给小麦生产造成严重的损失。共生菌广泛存在于各种昆虫体内，它们与宿主之间已形成了密切的共生关系。目...; 张荣芳; 关键词：小麦害虫麦长管蚜拷贝数

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张荣芳