彭虎
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：三峡大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金湖北省卫生厅青年科技人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 基于核酸适配体检测平台的设计模式
- 2020年
- 核酸适配体可用作信号识别元件,具有高亲和力、高特异性、高稳定性和易被修饰的特性。核酸适配体的检测平台包括核酸适配体探针和核酸适配体传感器,可精确、实时地检测生物分子,对临床疾病相关生物标志物的检测有较大的应用潜力。现将基于核酸适配体检测平台的设计模式作一综述,讨论其研究现状、局限性和未来发展方向。
- 刘小慧彭虎张艳琼
- 关键词：核酸适配体设计模式
- 构建表达分泌型和无分泌型大鼠gremlin1的真核表达载体
- 目的：分别构建能表达分泌型和非分泌型gremlinI蛋白的真核表达系统。方法：采用普通PCR技术从本实验组构建的peDNA3．1(+)-gremlinl重组质粒中分别获得全长的大鼠gremlinl基因(gremlinl)...
- 万林燕张巧娟彭虎石慧柳长柏吴江锋
- 关键词：动物模型纤维化疾病真核表达载体
- 浅析穿膜肽联合双螺旋RNA结合域技术递送siRNA入胞新策略被引量：1
- 2013年
- RNAi是真核生物中普遍存在的,能够剔除特定基因表达的监控机制,是传染性疾病及恶性肿瘤基因治疗的理想策略.然而,人体内各种生物膜形成的天然屏障的存在,使得siRNA进行临床应用的效率低下.近年来,研究者们发现了一类能够以高效无耗能方式穿过细胞膜进入细胞内的穿膜肽,它能够通过连接后易位的方式将结合上的siRNA递送入胞.但是,穿膜肽与siRNA结合时,会发生团聚、沉淀而限制其入胞效率.而RNA结合蛋白中存在的双螺旋RNA结合域,可在不改变siRNA结构基础上,结合并屏蔽siRNA的负电荷,协助穿膜肽更好地递送siRNA入胞,发挥特异的基因沉默作用.据此,建立了一种新的具有高效应用潜力的siRNA运输方式,为细胞免疫、基因治疗等临床研究提供一些参考.
- 杨英桂彭虎柳长柏邹黎黎
- 关键词：SIRNARNAI
- gremlin1基因的诱变及其真核表达载体的构建
- 2013年
- 目的：分别构建全长、无信号肽、无核定位系统和既无信号肽也无核定位系统的大鼠gremlin1基因的真核表达载体.方法：采用PCR技术获得全长大鼠gremlin1基因（gremlin1）和无信号肽的gremlin1基因（gremlin1-DS）,以全长gremlin1为模板运用重叠延伸PCR获得无核定位系统的gremlin1基因（gremlin1-DN）,继而在gremlin1-DN的基础上去掉信号肽获得既无信号肽也无核定位系统的gremlin1基因（gremlin1-DS-DN）.分别将4组重组质粒转染到非洲绿猴肾细胞株cos7中,免疫荧光和蛋白免疫印迹检测gremlin1基因的表达.结果：构建的真核表达载体pEF1/Myc-HisC-gremlin1、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN和pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS-DN经PCR与酶切鉴定显示目的片段大小与预期结果一致；经DNA测序显示pEF1/Myc-His C-gremlin1中的gremlin1片段与Gene Bank中的gremlin1序列（NM-019282）完全吻合；pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS中的gremlin1基因缺失信号肽序列；pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN中的gremlin1片段实现了4个定点突变：433-435位的AAG（赖氨酸）、487-489位的CCA（脯氨酸）、490-492位的CCC（脯氨酸）、496-498位的AAG（赖氨酸）均突变为TTC（苯丙氨酸）；pEF1/Myc-His Cgremlin1-DS-DN中的gremlin1基因既缺失信号肽序列又实现了4个定点突变.将它们分别转染到cos7细胞后,免疫荧光和蛋白免疫印迹检测显示,4者均能在细胞内成功表达.结论：成功构建了pEF1/Myc-HisC-gremlin1、pEF1/Myc-HisC-gremlin1-DS、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DN、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS-DN的真核表达载体.
- 万林燕张巧娟彭虎夏鑫柳长柏吴江锋张艳琼
- 关键词：诱变真核表达
