徐敏芳
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江苏大学药学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 突变A53Tα-synuclein基因核输入信号和核输出信号真核载体的构建及表达分析
- 2011年
- 目的:构建真核表达载体pRK5-A53T-SNCA-NLS、pRK5-A53T-SNCA-NES,瞬时转染SH-SY5Y细胞。方法:PCR扩增法获得含有SalI和NotI的目的片段A53T-SNCA-NLS、A53T-SNCA-NES,SalI、NotI双酶切载体pRK5,线性pRK5与目的片段经ligation high连接,酶切、PCR鉴定重组质粒pRK5-A53T-SNCA-NLS、pRK5-A53T-SNCA-NES。重组质粒通过Lipofactamine2000转染SH-SY5H细胞,免疫荧光法鉴定瞬转细胞。结果:真核表达载体pRK5-A53T-SNCA-NLS、pRK5-A53T-SNCA-NES构建成功,NLS、NES能介导突变基因A53T-SNCA翻译的α-synuclein蛋白在核内表达或胞质表达。结论:基因A53T-SNCA翻译的突变α-synuclein蛋白核内高表达或胞质高表达可能是家族性帕金森氏病发病机制中关键因素之一。
- 王颖钱进军赵康仁马瑞徐敏芳熊御云高静
- 积雪草酸对抗神经损伤的作用与保护线粒体有关
- 目的越来越多的证据表明,线粒体缺陷、兴奋性氨基酸神经毒性和氧化应激参与了神经退行性疾病的发病机制。因此,清除自由基、保护线粒体可能是防治神经退变性疾病的重要策略。积雪草酸(asiaticacid,AA),是积雪草提取物中...
- 高静熊御云徐敏芳丁红群
- 关键词：线粒体积雪草酸鱼藤酮H2O2
- 文献传递
- 胞质定位和核定位突触核蛋白慢病毒表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 目的:构建表达人突触核蛋白(α-synuclein)核定位和胞质定位基因(SNCA-NLS和SNCA-NES)的真核细胞表达慢病毒载体,并且观察重组质粒在293FT细胞中的表达情况。方法:采用PCR方法从质粒中扩增出目的基因,扩增出的目的基因与线性化后的载体PLVU-2A-EGFP在In-fusion重组酶作用下通过同源重组把目的片段连接到空载体上。目的片段和EGFP报告基因之间通过自剪切多肽2A连接。对重组质粒进行PCR、双酶切和质粒测序鉴定后,采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000将重组的质粒转染至293FT细胞中,用荧光显微镜检测基因在细胞中表达的情况。通过蛋白质印迹分析核定位和胞质定位基因(SNCA-NLS和SNCA-NES)在胞核和胞质中突触核蛋白的定向表达。结果:PCR、双酶切和质粒测序结果证明SNCA-NLS和SNCA-NES已正确地克隆到真核表达载体PLVU-2A-EG-FP中,并分别在细胞核和细胞质中定向表达。结论:成功构建了PLVU-SNCA-NLS-2A-EGFP及PLVU-SNCA-NES-2A-EGFP表达载体,为研究α-突触核蛋白在帕金森病发病过程中所起的作用奠定了基础。
- 徐敏芳钱进军高静马瑞赵康仁
- 关键词：慢病毒载体
- 保护线粒体、对抗氧化应激——积雪草酸防治PD的初步研究
- 目的:老年性痴呆(AD)、帕金森氏症(PD)等神经退变病的共同特征是特定区域神经元的不可逆损伤、死亡,至今缺乏理想的治疗药物。越来越多的证据表明,线粒体缺陷、兴奋性氨基酸神经毒性和氧化应激参与了神经退行性疾病的发病机制。...
- 高静熊御云徐敏芳丁红群刘健康
- 关键词：线粒体积雪草酸鱼藤酮
- 文献传递
