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多拷贝脑钠肽基因表达质粒的构建及其表达被引量：3: 2008年; 目的构建多拷贝脑钠肽(BNP)基因重组表达质粒,并探讨BNP基因的拷贝数与其表达水平的相关性。方法通过人工合成和PCR技术扩增BNP基因,将其克隆至载体pCW111中,构建表达质粒pBNP11,并通过亚克隆构建含有不同数量表达盒的正向串联表达质粒,分别转化大肠杆菌DH5α和BL21(DE3),经温度诱导表达,SDS-PAGE分析,并经激光扫描测定目的蛋白的表达量。结果测序及酶切鉴定证明1～3拷贝BNP重组表达质粒构建正确,重组蛋白在大肠杆菌DH5α和BL21(DE3)中均可获得表达,表达量分别为菌体总蛋白的8.12%、9.94%、和9.18%。结论已构建了多拷贝BNP的重组表达质粒,BNP的表达水平随BNP拷贝数的增加而升高,但并未成倍增加。; 易俊波买制刚卢海蓉黄德新李凌云林枫; 关键词：脑钠肽质粒拷贝数原核表达

人乳头瘤病毒HPV33型E6E7蛋白的表达及多克隆抗体的制备: 2016年; 目的表达人乳头瘤HPV33型病毒癌蛋白E6E7，并免疫小鼠制备抗体。方法从HPV33型基因组中扩增出E6E7的基因片段，通过基因测序加以证实；将其克隆至原核表达载体pET28a中，在大肠埃希菌中经IPTG诱导表达，经HIS亲核层析对重组蛋白进行纯化，收集重组蛋向免疫的小鼠阳性血清，经ProteinA／G亲核层析柱纯化得到多克隆抗体，同时将E6E7克隆至真核表达载体pCDNA3．1／HisC中，转染293细胞，分别采用免疫荧光法和Western Blot检测抗体的特异性．、结果用得到高纯度的重组蛋白E6、E7制备的多克隆抗体，具有良好的特异性。结论这种高纯度重组E6、E7蛋白和抗体有望用于HPV33型人乳头瘤疾病的临床检测及发生机制的研究。; 卢钧雄段炼王若伦易俊波; 关键词：宫颈肿瘤 E6

化学发光免疫分析法检测人血清孕酮被引量：4: 2007年; 目的研究用化学发光免疫分析法(CLIA)检测人血清孕酮(PROG)。方法采用竞争抑制法,用高亲和力的多克隆抗体包被,碱性磷酸酶标记孕酮,金刚烷增敏化学发光体系作为酶底物来检测PROG。并考察试剂的灵敏度、精密性、准确性、特异性和测定范围。将试剂盒置4℃存放14个月,检测质控血清的PROG含量,考察试剂的稳定性。并与进口试剂进行比较。结果CLIA法检测PROG灵敏度达0.1ng/ml;特异度99.5%;测定范围在0.1～200ng/ml之间;用PROG浓度分别为高、中、低的质控血清测定精密性,批内和批间变异系数均小于10%,回收率在91.7%～108.4%之间;与雌二醇、雌三醇和雌酮的交叉反应率低于0.1%,与睾酮和可的松无交叉反应;试剂在4℃存放14个月,质控血清的测定值均在规定范围内;与进口全自动化学发光试剂BeckmanAccessTM相比有较好的相关性。二者测定结果的符合率为99.2%。结论化学发光法灵敏度高,特异性好,稳定性强,检测范围宽,有很好的准确性和精密性,是现有放射免疫法的理想替代方法。; 杨青买制刚易俊波; 关键词：化学发光免疫分析法孕酮血清金刚烷

顶空毛细管气相色谱法测定重组人心钠肽中残留乙腈被引量：3: 2009年; 目的:建立重组人心钠肽中残留溶剂乙腈的气相色谱分离测定方法。方法:采用DB-624弹性石英毛细管色谱柱(30m×0.32mm,1.8μm),载气为氮气,氢火焰离子化检测器FID,进样口温度为250℃;检测器温度为250℃;柱温为40℃保持8min。分流比10∶1,水为溶剂,乙醇为内标物。结果:使用该方法被测物乙腈能得到良好的分离与测定,峰面积与浓度呈良好的线性关系,精密度良好。结论:方法准确可靠,可用于重组人心钠肽药品中有机溶剂残留量的检测。; 易俊波买制刚邱岗峰李凌云周兆平林枫; 关键词：顶空进样法毛细管气相色谱法乙腈

一种B细胞筛选方法及其在单克隆抗体制备中的应用: 本申请涉及一种B细胞筛选方法及其在单克隆抗体制备中的应用。该B细胞筛选方法包括如下步骤：S11、在Protein A蛋白基因的N端加上分泌表达的信号肽序列，在C端加上跨膜蛋白基因序列，得到融合外源基因；S12、将所述融合...; 易俊波周兆平买制刚刘立忠邹永东

Syntabulin诱发线粒体在微管上融合: 细胞中的线粒体处于经常运动、分裂与融合的活动状态。线粒体的不断分裂与融合确保了线粒体之间DNA的混合从而保证了线粒体代谢功能的正常运转。线粒体的融合是由一组dynamin类GTP酶所调节的,到目前为止的研究表明,这类分子...; 李凌云薛秀芬王晓红买制刚李世和易俊波许进英陈龙苏庆宁; 关键词：线粒体微管; 文献传递

一种改良型腺病毒及其系统的构建方法和应用: 本发明涉及一种改良型腺病毒及其系统的构建方法和应用，通过AD293细胞敲除fiber基因后，腺病毒颗粒的表面不再仅表达fiber蛋白，而是表达fiber与目标蛋白的融合蛋白，病毒颗粒的表面只有fiber与目标蛋白的融合蛋...; 易俊波张宇邹永东刘立忠; 文献传递

含有检测标签IgG的表达载体、构建方法及其应用: 本发明公开了含有检测标签IgG的表达载体、构建方法及其在目的蛋白的表达检测中的应用。该检测标签IgG为至少一个种属的IgG的恒定区基因；通过至少一个种属的IgG的恒定区基因与至少一个种属的二抗的直接反应实现目的蛋白的表达...; 易俊波苏庆宁买制刚卢海蓉周兆平林枫; 文献传递

体外复制的人线粒体DNA质粒及其构建方法: 本发明公开了一种体外复制的人线粒体DNA重组质粒，该重组质粒包含完整的人线粒体DNA和大肠杆菌复制子基因；大肠杆菌复制子基因插入人线粒体DNA的D‑LOOP区。其构建方法包括以下步骤：提取完整的人线粒体DNA；从pUC1...; 易俊波; 文献传递

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易俊波