李尧华 作品数:84 被引量:150 H指数:7 供职机构: 首都医科大学宣武医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
帕金森病患者血清对α-突触核蛋白寡聚体形成的促进作用 2009年 目的研究帕金森病(PD)患者血清对外源性α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)寡聚体形成的影响,初步分析血清促进α-Syn寡聚体形成的机制。方法将重组人α-Syn加入PD患者和对照组血清中,37℃振荡孵育,用免疫印迹方法鉴定α-Syn寡聚体的形成情况,用ELISA分析α-Syn寡聚体的形成量。结果α-Syn在血清中振荡孵育后主要形成二聚体和十四聚体。与对照组血清相比较,PD患者血清具有促进α-Syn寡聚体形成的作用。在血清中加入还原性谷胱甘肽可明显减弱PD患者血清促进α-Syn寡聚体形成的作用。结论PD患者血清促进α-Syn寡聚体的形成,其机制可能与α-Syn的氧化修饰有关。 李雁 殷娟娟 李昕 吴燕川 刘光伟 李尧华 于顺关键词:Α-突触核蛋白 帕金森病 血清 寡聚体 一个小型人酪氨酸羟化酶基因启动子的分离和活性分析 2009年 目的探讨酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)基因上游调控区的功能。方法PCR法扩增人TH基因上游片段,插入pGL3-Basic质粒,构建一个表达荧光素酶的报告基因。将报告基因瞬间转染MES23.5、293及Cos7细胞,用Dual Luciferase Assay法测定目的DNA片段的启动子活性。结果测序结果表明,分离的DNA片段长度为520bp,与人TH基因-493/+27区一致。与pGL3-Basic质粒相比较,构建的报告基因在3种细胞中显著表达(P<0.01)。结论TH基因-493/+27区具有明显的启动子活性,构建的报告基因有助于研究TH基因表达的调节。 李尧华 叶懿文 高楠 李昕 于顺 杨慧 陈彪关键词:酪氨酸羟化酶 启动子 多巴胺 帕金森病 帕金森病患者血清低分子量蛋白质差异表达分析 被引量:4 2009年 目的探讨帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者区别于正常人的血清蛋白质差异表达。方法选择原发性PD患者35例和正常人35例,用弱阳离子交换(weak cationic exchange,WCX)磁珠捕获血清蛋白质组分,用MALDI-TOF-MS(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometer)检测各样品的蛋白质质谱,统计学筛选差异表达分子,监督神经网络算法建立区分模型,盲法验证。结果在PD组和对照组之间筛查到8个差异分子(非参数检验Z值范围为-4.458~-3.059,P<0.05)。以监督神经网络算法建立区分模型,其判断正确率为81.4%。对25例新样本的盲法验证结果显示,模型的正确率为76.0%。结论PD患者血清蛋白质的表达谱有别于正常人。蛋白质组学数据结合生物信息学方法可能有助于PD的诊断。 李尧华 叶懿文 李昕 于顺 杨慧 陈彪关键词:帕金森病 蛋白质组学 生物标志物 α-突触核蛋白促进大鼠原代培养神经元突起生长 被引量:9 2009年 目的研究人α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)对神经元突起生长的作用。方法原代培养新生大鼠大脑皮质神经元,细胞外添加α-Syn蛋白,测定不同时间神经元突起的长度;观察添加不同浓度的α-Syn蛋白后神经元突起的生长情况。结果α-Syn处理组神经元突起的平均长度在培养1h、2h和4h时均明显大于对照组,α-Syn的这一作用可被其特异性单克隆抗体阻断;向培养基中添加不同浓度的α-Syn后,神经元突起的长度随α-Syn浓度的增加而增加。结论α-Syn具有促进神经元突起生长的作用,并且呈明显的量-效关系。 刘光伟 王鹏 李尧华 李昕 何欣 于顺关键词:Α-突触核蛋白 神经元 突起 α-突触核蛋白抑制酪氨酸羟化酶基因-495^+25区调节活性 2008年 高楠 李尧华 于顺 李昕 陈彪关键词:Α-突触核蛋白 酪氨酸羟化酶 调节活性 蛋白抑制 PARKINSON 急性重复低氧对小鼠脑组织血氧饱和度、线粒体功能以及ATP水平的影响 被引量:8 2008年 目的:探讨急性重复低氧对脑组织血氧饱和度与线粒体功能的影响。方法:将BALB/c小鼠置于低氧密闭罐中,通过小鼠呼吸消耗罐内氧造成罐内低氧,以小鼠出现喘呼吸为低氧耐受极限,然后将小鼠转到另一低氧密闭罐中,依此类推,连续进行5次低氧。记录小鼠每次的缺氧耐受时间、局部脑组织血氧饱和度,测定每次低氧暴露结束时的脑组织的线粒体复合体I活性和ATP含量。结果:小鼠的缺氧耐受时间随缺氧暴露次数增加而显著延长。脑组织血氧饱和度在第1、2次缺氧暴露时急剧下降,但在第3、4、5低氧暴露时先小幅度下降再逐渐恢复至正常水平,然后再缓慢降低。脑组织线粒体复合体I的活性随着缺氧次数的增加逐渐被抑制,ATP含量在第1次低氧暴露结束时低于正常水平,在第3、5次低氧暴露结束时高于正常水平。结论:急性重复低氧导致脑组织血氧饱和度降低的速度减慢、线粒体功能抑制以及脑组织ATP水平增高,后者很可能是动物脑组织耐缺氧能力增强的重要机制。 谢胜男 李昕 李尧华 刘耀波 于顺关键词:低氧 小鼠 线粒体 氧饱和度 液相色谱法测定低氧重复暴露小鼠脑中腺苷酸含量 吴燕川 谢胜男 李欣 李尧华 于顺α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶基因启动子的影响 被引量:1 2007年 目的探讨α-突触核蛋白对多巴胺代谢的调节机制。方法以人基因组DNA为模板,PCR法扩增酪氨酸羟化酶(Tyrosine Hydroxylase, TH)基因区的部分DNA片段(-495^+25),将其插入质粒pGL3-Basic,构建荧光素酶报告基因重组质粒pGL3-THprom,转染多巴胺能神经元细胞系MES23.5和MES23.5/hα-Syn+。结果双荧光素酶活性分析表明,pGL3-Basic、pGL3-THprom和pGL3-Control在MES23.5细胞中表达的荧光素酶活性分别为5.60±0.67, 26.80±4.11和32.90±4.75,而pGL3-THprom在MES23.5和MES23.5/hα-Syn+中表达的荧光素酶活性分别为26.80±4.11和14.40±0.61,差异极显著(P<0.01)。结论这些结果提示扩增的DNA片段具有启动子活性,而α-Syn作为反式作用因子通过影响TH基因启动子的功能发挥对多巴胺代谢的负性调控作用。 高楠 李尧华 李昕 于顺 傅桂莲 陈彪关键词:酪氨酸羟化酶 基因表达 多巴胺 制备抗PINK1多克隆抗血清的多肽及其应用 本发明公开了制备抗PINK1多克隆抗血清的多肽及其应用。本发明的多肽,是如下a)或b)的多肽:a)序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的多肽;b)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸由a... 杨慧 李尧华 于顺 李继胜文献传递 Alpha-突触核蛋白促进多巴胺神经细胞NMDA受体的内在化 于顺 程芙蓉 李昕 刘光伟 李尧华 Andrius Baskys