李德华
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：重庆师范大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 牛肠激酶基因工程菌的构建、高密度发酵、纯化及活性鉴定被引量：5
- 2006年
- 肠激酶(enterokinase,EK)是一种专一识别DDDDK氨基酸序列、并水解K后肽键的丝氨酸蛋白水解酶.根据GenBank序列进行人工合成牛肠激酶轻链基因cDNA,测序正确后将其插入甲醇酵母分泌型载体pPICZαA,得到重组质粒pPICZαA/EKL,重组载体经线性化后转化Pichia pastorisSMD1168H,筛选得到重组牛肠激酶轻链工程菌.分别对重组酵母工程菌进行高密度发酵、rEKL(recombinant enterokinase light chain,rEKL)纯化、N端序列测定、生物学活性鉴定等研究工作.结果表明,发酵上清中rEKL含量高,纯化的rEKL专一性强、无其他杂酶活性、N端15个氨基酸序列与文献报道一致.
- 李德华苟兴华胡海洋徐琦刘忠荣吴洽庆余晓东
- 关键词：高密度发酵
- 五步蛇毒对大鼠海马组胺受体H_1 mRNA和蛋白质表达的影响
- 2006年
- 目的研究五步蛇毒对大鼠海马组胺受体H1mRNA及蛋白质表达的影响。方法用半定量RT-PCR和Western blot方法,检测腹腔注射五步蛇毒后不同时相大鼠海马组胺受体H1mRNA及蛋白质表达的变化。结果五步蛇毒处理后,大鼠海马组胺受体H1mRNA及蛋白质的表达在各时相点均发生变化,且其mRNA和蛋白质表达均为先下调后上调。结论五步蛇毒对大鼠脑区海马组胺H1受体mRNA和蛋白质表达都有影响。H1受体mRNA和蛋白质表达的改变对大脑的生理功能有一定的影响,可能是该蛇毒致脑功能障碍的分子基础之一。
- 李博余晓东李德华和七一余争平周舟
- 关键词：五步蛇毒海马
- 五步蛇毒对大鼠脑区海马组胺受体H_2 mRNA和蛋白质表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的研究五步蛇毒对大鼠脑区海马组胺受体H2mRNA及蛋白质表达的影响。方法用RT-PCR和Western blot方法检测五步蛇毒对不同时相点大鼠海马组胺受体H2mRNA及蛋白质表达的变化。结果五步蛇毒处理后,大鼠海马组胺受体H2mRNA及蛋白质的表达在各时相点均发生变化,且其mRNA和蛋白质表达均为先即时上调然后下调,最后又上调。结论大鼠海马组胺H2受体mRNA和蛋白质表达的变化对海马的生理功能有一定的影响。
- 李博和七一李德华余晓东周舟
- 关键词：五步蛇毒组胺组胺H2受体
- 牛肠激酶基因工程菌的构建、高密度发酵、纯化及活性鉴定
- 背景与目的 肠激酶(enterokinase,EK)是一种丝氨酸蛋白水解酶,广泛存在于的哺乳动物十二指肠粘膜,专一性的水解胰蛋白酶原,使其转化为具有活性的胰蛋白。它由两个亚单位(重链和轻链)组成的二聚体分子,两条链间由一...
- 李德华
- 关键词：高密度发酵
- 文献传递
