李梅基
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 供职机构：兰州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生更多>>
- 壳聚糖亲和磁性微球的制备、表征及其对凝血酶纯化性能的研究
- 本文通过化学共沉淀法合成Fe3O4纳米磁核，以壳聚糖为包裹材料包裹自制的磁核，制备了具有核/壳式结构的壳聚糖高分子磁性微球，并偶联肝素配基得到了一种新型亲和磁性微球，应用透射电子显微镜、红外光谱分析、X射线衍射等方法手段...
- 李梅基
- 关键词：壳聚糖凝血酶核壳结构化学共沉淀法
- 文献传递
- 壳聚糖螯合凝胶层析法纯化血液超氧化物歧化酶被引量：2
- 2014年
- 首先利用不同相对分子质量聚丙烯酸钠从动物血液中分离纯化出超氧化物歧化酶(SOD),探索不同相对分子质量聚丙烯酸钠对SOD提取酶活性的影响。鉴于离子交换层析和凝胶过滤层析纯化时所用材料较昂贵,探索出一条适合工业化大规模生产的纯化方法。利用壳聚糖、亚氨基二乙酸(IDA)和环氧氯丙烷等材料合成一种新填料,根据亲和层析原理去除杂蛋白质,获得电泳纯级超氧化物歧化酶,使酶活性进一步提高,并和离子交换层析和凝胶过滤层析方法相对照,以期自制填料能代替Sephedex,DEAE-sepherose-fast flow等传统昂贵填料,以适合工业化生产。结果显示,低相对分子质量聚丙烯酸钠在血液SOD提纯工艺中更为适用,超滤后的粗酶液经离子交换层析、凝胶过滤层析和壳聚糖亲和层析纯化后经SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳后呈明显的单一条带,单亚基分子量16 kD,比活力达5 585 U/mg和6 148 U/mg,4 739 U/mg;产品得率分别为18.1%和13.7%,15.5%;纯化后活性回收率分别为61.2%,50.8%,42.6%。表明壳聚糖亲和层析方法在新工艺后续纯化工艺中有望代替Sephedex DEAEsepherose-fast flow为基础的传统纯化方法,适合工业化大规模生产。
- 王保全平娟张永州黄继海李昭华董先智庞晓斌李梅基
- 关键词：相对分子质量聚丙烯酸钠血液超氧化物歧化酶
- 一种纯化凝血酶的磁性亲和微球及其制备方法和应用
- 本发明提供一种纯化凝血酶的磁性亲和微球，及其制备方法和应用，其中所述纯化凝血酶的磁性亲和微球包括磁核、包裹在所述磁核外部的高分子包裹材料和与所述高分子包裹材料偶联的配基，其特征在于所述配基能特异性亲和凝血酶。
- 董先智李梅基李昭华
- 文献传递
- 用壳聚糖亲和磁性微球纯化血浆凝血酶的研究被引量：11
- 2010年
- 通过化学共沉淀法合成纳米粒子Fe3O4磁核,以壳聚糖为包裹材料包被自制的磁核,采用乳化交联法制备了具有核-壳结构的磁性高分子微球-壳聚糖磁性微球,并偶联肝素配基得到了一种新型亲和磁性微球,应用SEM、FT-IR、XRD等对微球的粒径、形貌、结构和磁响应性进行了表征.考察了该亲和磁性微球对凝血酶的分离纯化性能,并与传统的DEAE离子交换色谱法进行了比较.结果表明,所得亲和磁性微球具有较窄的粒径分布、形状规整,粒径在50nm左右.对凝血酶一步吸附纯化获得了比活为1879.71U/mg的酶,得率85%,纯化倍数11.057,而传统柱层析法得率为72%,纯化倍数仅为5.33.制备了壳聚糖亲和磁性微球,并将磁分离技术应用于凝血酶的分离纯化,得到了较好的效果,这将对于凝血酶的纯化及生产具有一定参考价值.
- 李梅基李昭华胡建成董先智
- 关键词：壳聚糖凝血酶磁分离纯化
- 聚丙烯酸钠分离纯化血液超氧化物歧化酶方法及影响因素研究
- 2013年
- 目的以新鲜猪血为原料,首次利用不同相对分子质量聚丙烯酸钠作为分散剂来提纯血液超氧化物歧化酶(SOD),探索不同相对分子质量聚丙烯酸钠对血液超氧化物歧化酶提纯过程中酶活性的影响,进而确立最佳相对分子质量,并和传统血液提纯工艺进行比较,以期改进后的工艺能简化传统提纯流程。方法利用低,中,高相对分子质量的聚丙烯酸钠作为高效电解质和氯化铜为酶激活剂来改进传统血液提纯工艺,经溶血,热变,冷丙酮沉淀,超滤浓缩,分别经过凝胶过滤和离子交换色谱等步骤,得到高活性酶,比活力达5 585和6 148 U·mg^(-1),产品得率分别为15.2%和11.5%,纯化后活性回收分别为55.2%和45.8%,其聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶电泳显示酶呈现明显的单一条带,单亚基相对分子质量在16×10~3附近。结果通过实验现象和酶活性对照,不同相对分子质量的聚丙烯酸钠在血液提纯过程中所起的作用并不一致,固含3.45%低相对分子质量聚丙烯酸钠用量为溶血体积20%时适合作为超高效分散剂来提纯血液超氧化物歧化酶,中高相对分子质量的聚丙烯酸钠不适合工业化提纯应用。结论低相对分子质量聚丙烯酸钠在血液超氧化物歧化酶提纯工艺中更为合适,该工艺大大简化了传统的血液提纯工艺,适合工业化大规模生产.
- 王保全张永州平娟李昭华李梅基董先智庞晓斌
- 关键词：相对分子质量聚丙烯酸钠血液超氧化物歧化酶
- 一种纯化凝血酶的磁性亲和微球及其制备方法和应用
- 本发明提供一种纯化凝血酶的磁性亲和微球，及其制备方法和应用，其中所述纯化凝血酶的磁性亲和微球包括磁核、包裹在所述磁核外部的高分子包裹材料和与所述高分子包裹材料偶联的配基，其特征在于所述配基能特异性亲和凝血酶。
- 董先智李梅基李昭华
