- 重组腺相关病毒载体表达抗表皮生长因子受体抗体对胰腺癌细胞株抑制作用的研究被引量：5
- 2011年
- 目的构建能在体内长期表达抗表皮生长因子受体（EGFR）抗体的重组腺相关病毒（rAAV）载体，观察其对人胰腺癌细胞株的抑制作用。方法将抗人EGFR单链抗体可变区（SCFV）基因插入腺相关病毒载体的Kpn Ⅰ和Bgl Ⅱ位点，构建成含抗EGFR单链抗体基因的重组腺相关病毒载体（rAAV-anti EGFR）。设立对照组（rAAV1-EGFP组）和实验组（rAAV1-anti EGFR组），观察抗EGFR单链抗体蛋白的表达情况。采用Western blot检测抗体蛋白的表达、CCK-8法和流式细胞仪检测6种人胰腺癌细胞株（PCT-3、SWl990、Capan-1、ASPC-1、MiaPaCa-2及PANC-1细胞）的抑制率和凋亡率。两组比较采用t检验。结果抗EGFR单链抗体蛋白能在6种人胰腺癌细胞株中表达，对照组和实验组胰腺癌ASPC-1细胞抑制率分别为1．1％±2．4％和15．1％±3．5％，两组比较，差异有统计学意义（t=6．598，P〈0．05）。对照组和实验组PANC-1细胞凋亡率分别为7．0％±3．0％和11．4％±2．5％，两组比较，差异无统计学意义（t=1．952，P〉0．05）；对照组和实验组SW1990、ASPC-1、Capan-1、PCT-3、MiaPaCa-2细胞凋亡率分别为1．1％±0．8％、1．5％±0．7％、1．7％±1．2％、1．1％±0．7％、2．2％±1．1％和17．6％±2．2％、46．9％±3．9％、20．0％±2．8％、12．1％±1．6％、31．1％±2．5％，两组比较，差异均有统计学意义（t=12．208，19．846，10．405，10．909，18．327，P〈0．05）。结论成功构建了携带抗EGFR单链抗体基因的rAAV载体，其表达的抗EGFR单链抗体蛋白对人胰腺癌细胞株有明显的抑制作用。
- 万世奇张太平王天笑郑莲芳李方李汇华
- 关键词：胰腺肿瘤表皮生长因子受体重组腺相关病毒载体
- 利用新型载体运转MDR1 siRNA以逆转胰腺癌化疗耐药性的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:以新型载体运转MDR1 siRNA导入胰腺癌细胞株后,观察其多药物耐药基因(MDR1)的表达及其对胰腺癌化疗耐药性的影响。方法:采用RNA干扰技术,构建可用于包装成自我复制rAAV病毒载体的质粒,以运转不同长度的MDR1 siRNA。采用实时PCR检测MDR1 mRNA的表达,Western印迹法检测总P-糖基化蛋白(P-gp)的表达水平,用流式细胞仪检测细胞表面的P-gp表达,并从不同层面检测胰腺癌细胞株P-gp表达的抑制率,从而筛选出最佳的质粒载体。采用MTT检测IC50值,进行各载体逆转胰腺癌细胞株化疗耐药性的研究。结果:拟用于构建自我复制rAAV病毒载体的25-mer MDR1 siRNA质粒能有效地将目的基因MDR1 siRNA导入胰腺癌细胞株,并予稳定的表达,发挥作用。导入胰腺癌细胞株的MDR1 siRNA能有效地在mRNA水平上沉默MDR1基因,显著抑制其表达,使其蛋白产物P-gp的表达明显减少,及其在细胞膜上的数量显著降低。结果能有效、显著地逆转胰腺癌细胞株的化疗耐药性,转染前SW1990/ADM细胞对ADM的IC50值约是转染后的50倍。结论:采用可用于构建新型sc-rAAV载体的质粒作为投递siRNA的工具,并选择MDR1为研究靶点,通过实验证实该策略在逆转胰腺癌化疗耐药性中的有效性。
- 洪智贤张太平赵玉沛李汇华李方郑连芳
- 关键词：胰腺癌化疗化疗耐药RNA干扰
- 椎动脉病变的手术和介入治疗进展被引量：1
- 2011年
- 随着高龄化社会的到来和诊断技术的进步,椎动脉(vertebral artery,VA)病变的发病情况逐渐被认识。对于手术、介入方式,本文对于VA重建术、VA腔内治疗、VA狭窄、夹层等治疗进展加以综述。VA解剖上分为V1～V4四段,由于V2和V4显露的难度,外科手术主要集中在V1和V3段。VA常见病变有栓塞、粥样硬化、夹层、大动脉炎。
- 任华亮郑月宏李汇华
- 关键词：椎动脉腔内治疗颈外动脉颈总动脉锁骨下动脉重建术
