李莹
- 作品数：9 被引量：21H指数：2
- 供职机构：上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 神经干细胞向少突胶质前体细胞的定向分化诱导(英文)被引量：11
- 2005年
- 本研究采用神经胶质瘤细胞株(B104 neuroblatoma cells,B104 cells)培养上清(B104CM)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF),将冷冻复苏的大鼠胚胎脊髓神经干细胞(neural stem cells,NSCs)定向诱导为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precusor cells,OPCs)。形态学和免疫组化的结果显示,诱导后95%以上的细胞具有双极或多极突起的典型OPCs 形态,并表达A2B5和血小板源生长因子受体-α(platelet derived growth factor receptor-α,PDGFR-α)等OPCs标志,所有PDGFR-α阳性的OPCs均不表达β-Tublin Ⅲ,其中仅少量细胞表达胶质原纤维酸性蛋白(glia fibrillary acidic protein,GFAP)。在B104CM 和bFGF共存的培养条件下,悬浮培养的OPCs可大量增殖形成少突胶质细胞球,该细胞球可通过传代继续扩增,且扩增的OPCs仍能维持其特有的形态和自我增殖的特性。撤去bFGF和B104CM后,OPCs能进一步分化为成熟的少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)或Ⅱ型星形胶质细胞。实验表明,诱导NSCs产生的OPCs在形态、增殖以及分化格局等方面均与已报道的存在于胚胎脑区的O-2A前体细胞相类似。该培养系统可为实验性细胞移植的研究提供丰富的细胞来源。
- 富赛里胡建国李莹尹岚金建强徐晓明陆佩华
- 关键词：神经干细胞少突胶质前体细胞碱性成纤维细胞生长因子
- 神经干细胞移植治疗创伤性脊髓损伤的免疫排异研究
- ＜正＞本实验旨在从免疫学的角度,阐明用同种异体神经干细胞治疗脊髓损伤的可行性和可能存在的问题,以期为将来用神经干细胞移植治疗脊髓损伤疾病的临床应用提供实验依据。实验中采用流式细胞术、RT-PCR和免疫组化等方法,检测体外...
- 尹岚富赛里李莹王小飞邹健杭勤陆佩华
- 关键词：神经干细胞MHC排斥反应
- 文献传递
- GAP-43干扰RNA表达载体的构建与鉴定
- 2005年
- 目的:构建GAP-43小干扰RNA(SiRNA)的表达载体并在大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12中验证其抑制效果。方法:利用设计软件根据GAP-43mRNA序列设计特异性SiRNA插入序列,体外合成该序列后将其定向克隆入真核表达载体pRNAT H1.1/Neo。以LipofectamineTM2000试剂转染GAP-43-SiRNA表达载体至PC12细胞中,以NGF诱导PC12细胞GAP-43的表达,以免疫组化方法鉴定GAP-43-SiRNA对GAP-43表达的抑制效果。结果:DNA测序证实合成的并被克隆入真核表达载体pRNATH1.1/Neo的SiRNA插入序列完全正确,GAP-43-SiRNA表达载体转染PC12细胞后可特异性抑制NGF诱导的PC12细胞的GAP-43的表达。结论:GAP-43-SiRNA表达载体构建成功,为后期研究GAP-43在少突胶质细胞前体上表达的意义奠定了基础。
- 胡建国富赛里李莹徐晓明陆佩华
- 关键词：GAP-43小干扰RNAPC12
- cDNA微阵列技术比较胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞的基因差异表达被引量：1
- 2005年
- 目的 从分子水平探讨脑和脊髓来源的神经干细胞(NSCs)的生物学特性,并鉴定这两种来源的NSCs 的分子表达差异。 方法 应用cDNA微阵列技术对脑和脊髓来源的NSCs的基因表达情况进行检测和比较,在成 功分离、培养和鉴定脑和脊髓两种来源的NSCs的基础上,抽提细胞总RNA并纯化、定量,以32P逆转录标记合成 cDNA探针。AltasTMcDNAExpressionArray(ClontechCo)与探针杂交、洗膜后在磷屏上曝光并扫描成像,以Arrayvision 5.1软件分析杂交结果。 结果 cDNA阵列膜上覆盖的1176个基因中,绝大部分基因表达无明显差异,但也有14 个基因在两种来源的NSCs中的表达有显著差异,其中8个在脑来源的NSCs中表达较高,6个在脊髓来源的NSCs 中表达较显著。在两种来源的NSCs都明显表达的基因中,许多分子如P 选择素(P selectin)、钙黏素(cadherin)、乙酰 胆碱受体α、cyclins、某些转录因子和原癌基因等可能在NSCs的自我更新(增殖)、神经球形成和保持不分化状态中 起重要作用。 结论 两种来源的NSCs的生物学特性基本相同,但也存在一定的差异。
- 胡建国富赛里李莹尹岚金建强沈天伟陆佩华徐晓明
- 关键词：神经干细胞脊髓CDNA微阵列
- 重建端粒酶活性的正常人成纤维细胞的成骨潜能研究被引量：9
- 2002年
- 目的 通过重建端粒酶活性延长人成纤维细胞寿命 ,并对其成骨潜能进行研究 ,为解决组织工程骨修复种子细胞老化问题提供实验依据。方法 将人端粒酶催化亚基 (h TERT)基因用电穿孔法导入正常人原代成纤维细胞 ,用 TRAP- PCR检测细胞端粒酶活性 ,用β-半乳糖苷酶活性测定评价细胞衰老情况。在此基础上用骨形成蛋白(BMP- 2 )和肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)联合诱导已重建端粒酶活性的成纤维细胞在体外培养条件下成骨 ,用四环素活体标记和茜素红染色显示钙盐结节形成。结果 转染 h TERT的人成纤维细胞能稳定表达端粒酶活性 ,培养超过 5 0代后细胞仍保持β-半乳糖苷酶阴性。经 BMP- 2和 TNF-α诱导后 ,转染后传 80代的人成纤维细胞仍可形成四环素标记和茜素红染色均为阳性的钙盐结节。结论 重建端粒酶活性。
- 汪铮李莹朱佑明邓廉夫易静汤雪明
- 关键词：端粒酶成纤维细胞成骨潜能
- 神经干细胞向少突胶质前体细胞定向分化诱导的新方法
- ＜正＞我们曾经报道了大鼠胚胎脊髓来源的神经干细胞（NSC）可通过神经胶质瘤细胞株的培养上清（B104CM）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的联合诱导而定向分化为表达A285和PDGFR-α的少突胶质前体细胞（OPCs...
- 富赛里胡建国李莹王艳霞金建强刘欣秋陆佩华
- 关键词：神经干细胞少突胶质前体细胞诱导分化
- 文献传递
- PDGF-AA instructs embryonic neural stem cells to differentiate into the oligodendrocyte lineage through the activation of Erk but not PI3K signaling pathway
- ＜正＞Platelet-derived growth factor-AA （PDGF-AA） has been used as a potent mitogen for the proliferation of olig...
- 胡建国富赛里李莹王艳霞蒋晓燕金建强陆佩华徐晓明
- 关键词：OLIGODENDROCYTES
- 文献传递
