李闯
- 作品数：11 被引量：16H指数：3
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省自然科学基金吉林省牧业管理局资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鹅细小病毒延边株VP1基因真核表达质粒构建及其在Vero细胞中的表达被引量：1
- 2012年
- 根据GenBank已发表的鹅细小病毒(GPV)B株基因序列,设计并合成1对含有Xho I和BamH I酶切位点的特异性引物,以提取的GPV基因组DNA为模板,经PCR扩增得到了1 163 bp的目的片段,并将该片段克隆至pMD-18T simple载体中,再将其亚克隆至真核表达载体pVAX1中,构建重组表达质粒pVAX1-VP1。经PCR鉴定、酶切分析和序列测定比较,证实了重组质粒的正确性。通过脂质体法将pVAX1-VP1转染Vero细胞,经间接荧光抗体检测,在Vero细胞表面可见特异性荧光。经RT-PCR扩增得1 163 bp的目的片段。该研究为GPV核酸疫苗的研制奠定了基础。
- 赵文婧鲁承杜秋明高建伟申峰勇张颖李闯袁娜房靖添
- 关键词：鹅细小病毒VP1基因真核表达
- 小尾寒羊溶菌酶基因的克隆与差异表达分析被引量：4
- 2013年
- 本试验从猪种布鲁氏菌S2疫苗株免疫雄性小尾寒羊构建的白细胞层SSH cDNA文库中筛选1段cDNA序列,经测序和BLAST同源性搜索比对发现其为溶菌酶重组片段,该片段大小为770bp,编码148个氨基酸残基,编码的蛋白质是一种天然抗感染物质,已提交GenBank,登录号为JX263305。经荧光定量PCR分析,与正常组羊相比,在S2免疫14和30d的羊白细胞层中该溶菌酶基因表达轻微上调,但差异不显著(P>0.05);在免疫40d时恢复到正常水平。这也进一步说明溶菌酶是一种存在机体内必不可少的天然免疫因子,为布鲁氏菌病有效防控方面的研究奠定了基础。
- 李闯徐云明唐峰邹德颖刘楠楠郭兴杨咏洁周玉柳增善卢士英鲁承任洪林
- 关键词：布鲁氏菌溶菌酶差异表达分析荧光定量PCR
- 羊主效多胎基因的研究现状被引量：4
- 2018年
- 排卵数和每窝仔数是羊的重要繁殖性状,具有很高的经济价值。但繁殖性状是低遗传力性状,按传统方法改良和提高家畜繁殖力,遗传进展缓慢,改良效果不佳。所以将传统改良和利用遗传标记的辅助选择(MAS)结合起来,找到与繁殖性能相关的基因,并将其作为遗传标记或直接导入其他品种羊中均可以有效地提高选择效果。现已经有众多研究人员在多种羊品种中发现了多个对生殖性状(包括排卵数和每窝仔数)具有重要影响的基因,如BMPR1B、BMP15、GDF9以及B4GALNT2等。本文对这些影响不同羊品种多产性及其遗传多样性的主要基因及其突变进行了综述。
- 李闯柳海星高见红乔佳琦
- 关键词：多胎性状基因
- 猪黄体不同发育时期活性氧及多种抗氧化酶变化规律的研究
- 黄体对维持卵巢功能及早期妊娠具有非常重要的作用。黄体的发育与退化涉及一系列的血管发生和细胞凋亡过程，而ROS也是导致细胞凋亡的重要原因之一。有研究表明ROS与多种抗氧化酶会影响多种动物黄体的发育和退化。但尚未有人对猪黄体...
- 李闯
- 关键词：抗氧化机制活性氧抗氧化酶
- 猪黄体不同发育时期活性氧水平及多种抗氧化酶mRNA表达量变化规律的研究
- 2019年
- 试验旨在研究活性氧(ROS)及抗氧化酶基因表达在猪黄体组织发育及退化过程中的变化规律,为诠释猪黄体抗氧化机制补充理论基础并提供新的思路。试验所用卵巢采自延吉屠宰场,将黄体从卵巢剥离后,通过其形态大小将黄体初步分为初期、中期、后期以及白体,然后通过检测孕酮水平准确区分中期及后期黄体;通过冰冻切片及DHE荧光染色技术检测各时期黄体ROS水平,通过实时荧光定量PCR对各时期黄体内锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱甘肽过氧化氢酶(GPx)的mRNA表达量进行检测。结果表明:猪黄体内ROS水平随猪黄体周期性发育进程出现规律性升高,即后期ROS水平显著高于其他时期(P<0.05);中期显著高于初期与白体(P<0.05);而初期与白体间差异不显著(P>0.05)。Mn-SOD、GPx1及GPx4基因的表达水平随黄体的发育进程则出现规律性的下降:初期及白体中这几个基因的表达水平显著高于中期与后期(P<0.05),中期显著高于后期(P<0.05)。对于GPx3基因,其在白体的表达量显著高于其他时期(P<0.05),初期表达水平显著高于中期与后期(P<0.05),中期显著高于后期(P<0.05)。CAT基因表达量不随黄体的发育而变化(P>0.05)。综合上述试验结果,ROS、Mn-SOD及GPx与猪黄体发育及退化有关;而ROS水平与Mn-SOD及GPx的表达水平呈现出相反的规律。
- 高见红李闯李闯方南洙方南洙李钟淑
- 关键词：活性氧锰超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化物酶
- 延边地区布鲁菌bp26基因的克隆、序列分析及蛋白结构预测
- 2012年
- 布鲁菌病（brucellosis）是由布鲁菌引起的人兽共患传染病，家畜牛、羊、猪最常发生，且可传染给人和其他家畜，其特征是生殖器官和胎膜发炎，引起流产、不育和各种组织的局部病灶。本病广泛分布于世界各地，目前在我国人畜间仍有发生，给畜牧业和人类的健康带来严重危害[1]。
- 申峰勇鲁承李闯高建伟赵文婧张颖袁娜丛艳昭
- 关键词：蛋白结构人兽共患传染病克隆生殖器官布鲁菌
- 绵羊细胞分裂周期蛋白42全长cDNA克隆、表达及单克隆抗体制备
- 布鲁氏菌是引起人兽共患布鲁氏杆菌病的病原体，具有高度传染性。近几年布病疫情日趋上升，严重危害人类健康及我国经济发展，对于布病的防治工作已是当务之急。近年来，细胞表面分子的抗原靶向性治疗成为一种非常有发展前景的治疗方法。C...
- 李闯
- 关键词：绵羊原核表达单克隆抗体
- 牛卵形巴贝斯虫PCR检测方法的建立及初步应用被引量：4
- 2012年
- 为建立牛卵形巴贝斯虫(B.ovata)快速检测方法,本研究根据GenBank中登录的B.ovata CCTη基因序列设计引物,建立了PCR检测方法。对该方法的最佳反应条件进行优化,并进行特异性、敏感性及临床样本检测试验。结果表明,建立的PCR方法扩增B.ovata CCTη基因片段大小为1 008 bp,与参考株序列同源性为100%。该方法对牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、牛瑟氏泰勒虫基因组DNA扩增结果均为阴性。最低可以检测样品中34个拷贝的DNA。通过对49份临床样本的检测,该方法比姬姆萨染色镜检阳性率高8.2%。本实验为B.ovata的诊断提供了一种特异、敏感的检测技术。
- 黄国明贾立军薛书江李闯焦石张守发
- 关键词：PCR
- 牛卵形巴贝斯虫伴侣素CCT_η基因的克隆与生物信息学分析被引量：3
- 2012年
- 对牛卵形巴贝斯虫延边株的伴侣素CCTη基因进行分子克隆,并利用生物信息学软件对CCTη基因进行了同源性、系统进化树、编码蛋白等电点、信号肽、跨膜区、糖基化位点及疏水性分析。结果显示,克隆的CCTη基因由1 008个核苷酸组成,其中编码335个氨基酸。与GenBank上发表的牛卵形巴贝斯虫CCTη基因序列(AB367928.1)同源性100%。CCTη基因编码蛋白等电点为7.32,不存在信号肽结构、跨膜区及糖基化位点。疏水性最大值3.38,最小值-3.79。本研究从CCTη基因方面近一步证实了该分离株的分子分类。
- 黄国明薛书江贾立军李闯张守发
- 布鲁氏菌疫苗接种羊白细胞层SSH CDNA文库构建及溶菌酶基因克隆分析
- 布鲁氏菌病是一种重要的人兽共患病,近年疫情急骤回升,危害我国畜牧业的健康发展.本研究以猪种布鲁氏菌S2疫苗株免疫雄性小尾寒羊,通过抑制性差减杂交技术构建白细胞层SSHN(c)DNA文库.经测序和(B)LAST一致性搜索比...
- 李闯LI ChuangXU Yun-Ming徐云明TANG Feng唐峰ZOU De-Ying邹德颖LIU Nan-Nan刘楠楠GUO Xing郭兴YANG Yong-Jie杨咏洁LU Shi-Ying卢士英ZHOU YU周玉L1U Zeng-Shan柳增善鲁承LU ChengREN Hong-Lin任洪林
- 关键词：布鲁氏杆菌
- 文献传递
