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人CR1-SCR1-3基因的克隆表达及对急性CI/R损伤的保护性研究: 杨绍俊张璇汪正清

人补体受体1型功能域SCR1-3基因的克隆表达及对急性脑缺血再灌注损伤的保护作用: 缺血性脑血管病及脑再灌注炎症损伤已成为目前严重威胁人类健康和生命的主要疾病之一。其发病原理比较复杂，研究表明：补体系统被过度激活而产生的炎症效应片段是导致脑缺血再灌注(cerebral ischemia and repe...; 杨绍俊; 关键词：克隆技术

肺癌细胞中NF-κB2基因表达及启动子区域甲基化状态分析: 2014年; 目的研究肺癌细胞和人正常支气管细胞(human bronchial epithelial cell,HBE)中NF-κB2的表达情况及其启动子区CpG岛的甲基化状态。方法采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测肺癌细胞和正常支气管细胞NF-κB2基因mRNA的表达情况;采用Western blot技术检测NF-κB2前体蛋白p100的表达情况;采用重亚硫酸盐测序(Bisulfite Sequencing PCR,BSP)技术检测NF-κB2启动子区CpG岛的甲基化状态。结果肺腺癌细胞株A549、肺鳞癌细胞株SK-MES-1和小细胞肺癌细胞株NCI-H446的NF-κB2 mRNA的表达分别是HBE细胞株的6.42±0.91倍(P<0.05,t=5.828)、2.78±0.52倍(P<0.05,t=3.219)、2.79±0.33倍(P<0.05,t=4.611);3种肺癌细胞中p100蛋白较HBE细胞均上调表达;4种细胞株中所扩增片段的CpG位点均呈非甲基化状态。结论肺癌细胞及HBE细胞中NF-κB2启动子区域的CpG位点处于非甲基化状态,说明NF-κB2基因表达情况与甲基化状态无直接关系,其启动子区的甲基化修饰未直接参与该基因的表达调控,可能存在其他相关的调控机制,有待进一步的探索。; 蒋文斌李时飞王丰许雪青杨绍俊贾双荣李发科商亚陈鸣; 关键词：甲基化

rs548234 T/C与中国西南地区汉族人群结核发生风险的关联性研究: 2013年; 目的在中国西南地区汉族人群中验证PRDM1-ATG5基因之间的rs548234 T/C单核甘酸多态性与结核病发生风险间的相关性。方法采用病例-对照研究设计,募集了234例结核病患者和208例健康对照个体。应用直接测序法对rs548234多态性进行分型,采用卡方检验和Logistic回归分析,校正性别和年龄等混杂因素的影响,评价rs548234位点与结核病发生风险,以及结核病亚型的遗传关联性。结果 rs548234位点在病例和对照组中的基因型分布均符合哈-温平衡。在整个研究人群中本位点与结核病的发生风险无遗传学关联。然而我们发现原发性肺结核病患者中CC基因型频率高于健康对照人群(CC vs TT:OR=2.14,95%CI=0.91～5.10,P=0.079;CC vs CT+TT:OR=2.50,95%CI=1.09～5.73,P=0.026),提示rs548234 C等位基因可能增加原发性肺结核病的发生风险。结论在中国西南地区汉族人群中PRDM1-ATG5基因之间的rs548234 T/C多态性位点可能参与了原发性肺结核病的发生发展。; 商亚杨绍俊张可珺邓少丽贾双荣李发科蒋文斌唱凯卢婷潘锋陈鸣; 关键词：结核病单核苷酸多态性

PBMC细胞因子水平有助于鉴别结核感染状态: 目的:研究在潜伏性肺结核感染和活动性肺结核患者的外周血单个核细胞(PBMC)中细胞因子的特异性表达谱,构建多基因表达谱分析模型,区分结核感染状态。方法:回顾性分析2013年4月至2014年4月,在我院就诊确诊的活动性肺结...; 谢小红李发科杨绍俊邓少丽; 关键词：活动性肺结核细胞因子; 文献传递

miRNA-155介导ESAT-6诱导巨噬细胞凋亡的分子机制及其在结核诊断中的作用: 目的:　　结核感染仍是世界公共卫生难题，据2014年世界卫生组织(World HealthOrganization，WHO)统计:2013年约有900万新增活动型结核病人，其中高达150万人因结核病而丧命。近年来随着多重...; 杨绍俊; 关键词：结核病; 文献传递

拉萨血站血液报废原因分析及对策被引量：3: 2018年; 目的探讨高原条件下血液报废原因及解决办法,有效降低血液报废率,提高临床血液制品用血效率。方法统计2009年至2016年拉萨血站血液制品存储和使用过程中的血液报废数据,对报废血液制品种类,报废原因及相关影响因素进行回顾性分析。结果 2009年至2016年本血站共采集经检测合格的血液制品63268 U,共报废3580 U,8年内总报废率为5.66%。2009年至2016年合格血液报废比例存在显著性差异(P<0.01),血液报废率总体呈下降趋势。血液报废品种最多的是新鲜冰冻血浆(45.68%),其次为悬浮红细胞(43.20%),新鲜冰冻血浆报废的主要原因为乳糜血和破袋,而悬浮红细胞报废的主要原因为血液过期。结论加强输血前宣传及饮食监督可有效降低乳糜血的发生率;在离心和移取技术环节上的技术改进则能有效降低破袋的发生率;完善血液周转机制,并积极鼓励当地藏族及官兵自助献血储血;加强血站人才队伍建设,是有效降低西藏地区血液制品报废率,提高血液资源利用水平的重要举措。; 齐宝宏杨绍俊; 关键词：血液制品血液报废

用于检测HBV拉米夫定和/或阿德福韦耐药性的多重连接探针实时荧光PCR试剂盒: 本发明属于生物技术领域，特别涉及用于检测慢性乙型肝炎耐药性的多重连接探针实时荧光PCR技术，所述多重连接探针实时荧光PCR试剂盒包括MLPA探针组、填充序列和通用引物组成，所述探针分别是针对HBV的P基因逆转录区的rtM...; 贾双荣陈鸣邓少丽李发科唱凯蒋文斌商亚杨绍俊; 文献传递

人补体受体1型衍生分子融合基因CR1-SCR2D的构建、表达及生物学活性鉴定被引量：1: 2014年; 目的构建和表达具有抑制补体生物活性的双功能域人补体受体1型衍生分子CR1-SCR2D。方法基于我室前期工作,将CR1-SCR1-3、人工α螺旋肽段linker、SCR15-17 3个DNA片段依次克隆到改造载体pPIC9k(+)和pPICZαB,构建出表达质粒pPICZαB-CR1-SCR2D;电转化毕赤酵母X-33得到阳性重组子,甲醇诱导目的蛋白CR1-SCR2D表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达结果;经纯化获得CR1-SCR2D并进行糖基化鉴定后,用CH50和AH50法鉴定目的蛋白在体外抑制补体的生物活性。结果成功构建了目的基因的表达质粒pPICZαB-CR1-SCR2D,基因测序正确;SDS-PAGE和Western blot证实目的基因在毕赤酵母中实现了分泌表达;经镍柱纯化后得到较纯的CR1-SCR2D,糖基化鉴定证明其存在糖基化;CH50法和AH50法结果显示CR1-SCR2D均有较CR1-SCR1-3和CR1-SCR15-17更好的抑制补体生物学活性。结论成功构建了双功能域人补体受体1型衍生分子融合基因CR1-SCR2D,在毕赤酵母中实现了CR1-SCR2D的分泌表达,该融合蛋白对经典/MBL途径及旁路途径补体激活均具有较好的抑制作用。; 路延之李庆伟杨绍俊张璇汪正清; 关键词：融合基因

1例慢性粒细胞白血病慢性期和急变期骨髓白细胞免疫表型的变化被引量：3: 2013年; 目的通过对1例典型慢性粒细胞性白血病患者慢性期(CML-CP)和急变期(CML-BP)骨髓髓系细胞免疫表型变化特征的描述,探讨流式检测骨髓细胞免疫表型在疾病诊断、预后中的意义。方法利用流式细胞术对1位CML患者慢性期及急变期骨髓白细胞免疫表型进行对比分析,并结合临床表现、外周血象、骨髓血细胞形态、FISH及FQ-PCR等相关检测结果。结果与CML-CP相比,CML-BP时该患者脾脏进行性增大;外周血象出现83%的异常原始细胞,FISH显示BCR-ABL阳性细胞比例由83%增加到99%;FQ-PCR显示BCR-BAL融合基因拷贝数增加;骨髓原始粒细胞由0.5%增加到79.5%。FCM显示:在CML-CP时,异常原始细胞CD34阳性,但髓系抗原CD33、CD65、CD16和CD14在该群细胞膜表面表达均为阴性,CD34阳性细胞胞浆中cMPO阴性,而CD33强表达;在CML-BP时,非原始粒细胞强表达膜CD33,同时发现有胞浆CD3跨系表达存在。结论 CML-CP时,CML多能干细胞可能存在异常分化过程;CML-BP时,CD33异常表达提示其参与CML急变的过程,CD33在CML-BP原始粒细胞胞浆表达可能具有普遍规律,这将有助于鉴别原发AML和CML-BP。; 张可珺帖儒修杨绍俊李响陈鸣; 关键词：流式细胞术慢性粒细胞白血病

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