杨迪
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 合成DNA片段的分离及连接
- 1989年
- 研究设计了一段带终止信号的DNA序列,通过DNA合成仪分为四个片段合成。本文介绍经DNA合成仪合成DNA片段后的处理,纯化及连接过程.经测定DNA的连接效率在65％左右。
- 张建文何俊王虹翟朝阳杨迪刘洪岩杜丹萍胡凝珠郭仁
- 关键词：DNA片段基因工程
- 高含量人体必需氨基酸基因的化学全合成被引量：5
- 1990年
- 采用固相亚磷酰胺法合成了编码高含量人体必需氨基酸蛋白质的基因。该基因有300个碱基对,共编码94个氨基酸,其中92%以上为人体必需氨基酸。从该基因的两个方向均可被翻译成具有人体必需氨基酸的蛋白质。该基因选用了植物所偏爱的密码子,并间隔地插入了编码赖氨酸的密码子,使之所编码的蛋白质可被胰蛋白酶消化。
- 张晓东杨迪汪训明闵永洁谢毅王鄂生王启松
- 关键词：氨基酸基因
- 人α-心钠素全基因的化学合成被引量：4
- 1989年
- 用固相亚磷酰胺法(solid-phase phosphoramidite method)合成了人α-心钠素(简称α-hANP)的全基因。合成的α-hANP基因全长为96bp,包括编码α-hANP的结构基因、基因5＇端的谷氨酸(作为表达产物用内肽酶Glu-C专一裂解的位点)密码子GAA、基因3＇端的终止信号TGA及基因两端的接头部分。基因分7个寡聚核苷酸片段在DNA合成仪上合成,然后一次性酶促连接成为完整的α—hANP双链基因。化学合成的基因克隆到M13载体上,经分子杂交鉴定筛选出的α-hANP基因克隆株,用双脱氧链终止法进行序列分析,证明核苷酸顺序正确。
- 杨迪闵永洁施文王启松
- 关键词：心钠素化学合成基因
- 化学合成的人α-心房肽基因在SUC2启动子-信号顺序控制下的表达
- 1989年
- 本文报道将化学合成的人α-心房肽(α-hANP)基因与酵母分泌型表达载体YFD6A21重组,使α-hANP基因在蔗糖酶基因(SUC2)启动子-信号顺序指导下,在酵母菌中合成和分泌有活性的α-hANP。放射免疫分析表明:α-hANP基因只有在葡萄糖去阻遏条件下才能得到表达,而且其表达量与细胞浓度成正比。此外,95%以上表达产物被分泌到培养液中。
- 秦宁李育阳杨迪王启松
- 关键词：心房肽基因表达
- 合成的人γ-干扰素cDNA在大肠杆菌的高效表达被引量：5
- 1994年
- 合成了人γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）ｃＤＮＡ其特点是选用了大肠杆菌偏爱密码子，将合成基因克隆到含ＰＬ启动子的不同表达载体中，共获得９种不同的表达质粒，它们的ＳＤ与起始密码子ＡＴＧ间的距离（Ｄ）不同，在起始翻译区（ＴＩＲ）的最小自由生成能△Ｇ°ｆ２９８不同，故其表达量的差异也大，其中ｐＬＹ４－γ５表达的ＩＦＮ－γ的量占菌体总蛋白的６０％－８０％，为国际上所罕见。表达高的原因是由于选择（Ｄ）距离适当。
- 王子轩杨迪王启松李伯良吕兆海虞建良郑宏大范佩芳唐建伟钱民章郭海鸿姚曼华郑仲承刘新垣
- 关键词：基因表达CDNA大肠杆菌
- 基因的多点定位突变方法的研究——双点定位突变法改造人α心钠素基因被引量：3
- 1989年
- 定位突变作为基因工程和蛋白质工程研究中的一种基本方法,已广为应用。定位突变法可利用噬菌体M_(13)单链DNA作为基因载体,在化学合成的寡聚核苷酸引物的诱导下,把碱基突变导入基因的任何预定位置。但经典的方法常常需要通过碱性蔗糖梯度离心、凝胶电泳等耗时而复杂的手段富集经体外诱变的闭环双链DNA,突变基因的产率一般较低,且只进行碱基的单点突变。因此,当某些基因需要进行间隔一段距离的多点突变时。
- 杨迪谢毅施文闵永洁王启松
- 关键词：定位突变
