林海波
- 作品数:7 被引量:3H指数:1
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
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- 猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究
- NA重组技术,将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置,获得重组质粒pBVpIL-6,转化大肠杆菌DH5α后,42℃诱导阳性表达菌.经SDS-PAGE检测发现目的蛋白获得了高效表达...
- 林海波张桂红詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚辛朝安
- 关键词:SDS-PAGEELISADNA重组
- 猪(杜长大三元杂)白细胞介素-6基因的克隆及序列分析被引量:1
- 2006年
- 分离猪(杜长大三元杂)外周血单核细胞(PBMC)进行体外培乔,经诱导刑LPS或ConA的诱导培养48h后,提取细胞总RNA,应用RT-PCR扩增猪IL-基因,并克隆到pMDl8-T载体后测序。结果成功获得猪IL-6基因重组质粒pMDpIL-6,序列分析发现所获得的猪IL-6cDNA长度为716bp.开放阅读框为636bp,编码211个氨基酸,相对分子质量约24ku,等电点5.5。所获得的猪IL-6与GenBank上已报道的不同来源猪的IL-6有单个氨基酸存在差异;与人和其他动物IL-6氨基酸序列的同源性为78.1%-90.1%,同时反映出IL-6基因具有种的多样性,不同种动物的IL-6基因亲缘关系越近,进化关系也越近。
- 张桂红林海波江经纬詹国英廖明
- 关键词:白细胞介素-6基因克隆
- 猪(杜长大三元杂)白细胞介素-6基因的克隆及序列分析
- 分离猪(杜长大三元杂)外周血单核细胞(PMBV)进行体外培养,经诱导剂LPS或ConA的刺激培养24h后,提取培养细胞总RNA,应用RT-PCR扩增猪PMBVIL-6基因,并克隆到pMD18-T载体后测序.结果成功获得猪...
- 林海波张桂红詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚辛朝安
- 关键词:基因克隆基因序列RT-PCR扩增
- 文献传递
- 猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究被引量:2
- 2006年
- 用DNA重组技术,将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置,获得重组质粒pBVpIL-6,转化大肠杆菌DH5α后,42℃诱导阳性表达菌。经SDS-PAGE检测发现目的蛋白获得了高效表达,表达量约占总蛋白的20%。表达的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经过变性溶解和复性后用酶联免疫吸附试验(ELISA)做定性定量检测。ELISA结果证实了所表达的蛋白为猪IL-6,复性后具有一定活性,并测出了复性后活性蛋白的浓度。
- 张桂红林海波詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚江经纬辛朝安
- 关键词:SDS-PAGEELISA
- 猪(杜长大三元杂)白细胞介素-6基因的克隆及序列分析
- 分离猪(杜长大三元杂)外周血单核细胞(PMBV)进行体外培养,经诱导剂LPS或ConA的刺激培养24h后,提取培养细胞总RNA,应用RT-PCR扩增猪PMBV IL-6基因,并克隆到pMD18-T载体后测序。结果成功获得...
- 林海波张桂红詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚辛朝安
- 关键词:白细胞介素-6基因克隆
- 文献传递
- 猪白介素-6的基因克隆及其原核表达研究
- 本研究分离猪(杜长大三元杂)外周血单个核细胞(PBMC)进行体外培养,经LPS或ConA诱导培养48h后,提取培养细胞总RNA,应用RT-PCR扩增猪IL-6基因,并克隆到pMD18-T载体后测序。
获得的猪I...
- 林海波
- 关键词:白细胞介素-6核细胞
- 文献传递
- 猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究
- 用DNA重组技术,将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置,获得重组质粒pBVpIL-6,转化大肠杆菌DH5α后,42℃诱导阳性表达菌。经SDS-PAGE检测发现目的蛋白获得了高效...
- 林海波张桂红詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚辛朝安
- 关键词:SDS-PAGEELISA
- 文献传递