樊建慧
- 作品数：24 被引量：45H指数：4
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- 发文基金：国家自然科学基金教育部人文社会科学研究基金辽宁省教育科学“十二五”规划课题更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学更多>>
- Caveolin-1调控肝癌细胞ST6Gal-Ⅰ表达与肿瘤粘附研究
- <正>目的:探讨Caveolin-1对肝癌细胞ST6Gal-I表达的影响及与肿瘤粘附行为的关系。材料和方法:利用Rea-time PCR和Western-blot等方法检测Caveolin-1在小鼠肝癌细胞系(Hca-F...
- 汪淑晶于生金樊建慧张嘉宁
- 文献传递
- 绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子表达载体pEGFP-C1-hri的构建及鉴定被引量：4
- 2006年
- 目的构建表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的表达载体pEGFP-C1-hri,为探讨人核糖核酸酶抑制因子抗肿瘤作用的分子机制打下基础。方法用亚克隆法,将目的片段从表达载体pGEX-6p-1-hri克隆到pEGFP-C1上,用双酶切筛选得到阳性重组质粒pEGFP-C1-hri,用脂质体法将其瞬时转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中,在荧光显微镜下检测其表达。结果pEGFP-C1-hri中插入了hri序列,绿色荧光高效表达于B16细胞浆中。结论pEGFP-C1-hri表达载体已成功构建。
- 李坤田余祥于丽华樊建慧杨帆崔秀云
- 关键词：人核糖核酸酶抑制因子绿色荧光蛋白
- 重组人核糖核酸酶抑制因子 基因的siRNA表达载体构建及B16细胞中基因沉默的鉴定被引量：5
- 2007年
- 人核糖核酸酶抑制因子(Human ribonuclease inhibitor, hRI)是细胞质中的一种酸性糖蛋白,可以与血管生长因子(Angiogenin, Ang)紧密结合从而抑制血管形成.利用全基因组合成法合成针对人核糖核酸酶抑制因子基因(hri)的发夹shRNA序列,亚克隆到siRNA表达载体pKD;重组载体经酶切鉴定后,用脂质体法与报告基因绿色荧光蛋白重组融合的人核糖核酸酶抑制因子的逆转录病毒载体pLNCX-EGFP-C1-hri共转染到小鼠黑色素瘤细胞B16中,在荧光显微镜下检测干扰效果.用Image-Pro plus 4.5软件对绿色荧光照片半定量分析干扰效率.结果表明,荧光显微镜显示B16中表达的绿色荧光被干扰,荧光强度半定量分析干扰效率可达80%以上.成功重组构建了针对hri的siRNA表达载体.
- 李坤田余祥陈海波杨帆樊建慧赵宝昌崔秀云
- 关键词：人核糖核酸酶抑制因子SIRNA基因沉默
- 融合蛋白GST-hRI的可溶性表达及对CCl_4引起的急性肝损伤的保护作用被引量：4
- 2009年
- 目的:观察可溶性表达的融合蛋白GST-hRI对CCl4引起的急性肝损伤的保护作用。方法:构建pGEX-6p-1-hri表达质粒。在0.5 mol/L IPTG浓度下,调整温度诱导目的融合蛋白的最大可溶性表达。用Western Blotting检测GST-hRI的表达,用亲和层析法对GST-hRI进行分离纯化。将纯化后的GST-hRI腹腔注射给BALB/c小鼠,预先保护7 d后,再腹腔注射CCl4造成急性肝损伤。检测小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平和肝脏的超氧化物歧化酶、黄嘌呤氧化酶、丙二醛、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧物酶指标,并在光镜下检测肝细胞的损伤程度。结果:0.5 mmol/L IPTG,26℃诱导表达8 h,超声破碎菌体所得到的上清中可溶性GST-hRI的表达量约占超声离心后上清总蛋白4.5%,与沉淀中的比例约为27%。与CCl4损伤组相比,GST-hRI治疗组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶和丙二醛水平明显下降(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平明显增加(P<0.05),黄嘌呤氧化酶水平基本没有变化。与hRI治疗组相比,GST-hRI治疗组的各项指标差异有统计学意义(P<0.05)。与维生素C处理组相比,GST-hRI处理组的各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:可溶性表达的融合蛋白GST-hRI具有对抗CCl4对小鼠肝损伤的作用,这为hRI的应用提供了实验基础。
- 杨明洁王艇樊建慧王冬梅崔秀云赵宝昌田余祥
- 关键词：急性肝损伤核糖核酸酶抑制因子CCL4抗氧化作用
- N-乙酰葡糖胺基转移酶Ⅳa对小鼠肝癌细胞中N-聚糖分支合成作用的研究
- 目的:探讨N-乙酰葡糖胺基转移酶IVa(Gnt-IVa)在糖蛋白N-聚糖分支合成及肿瘤转移中的作用。材料和方法:构建pcDNA3.1-Gnt-IVa表达载体,在无淋巴道转移力的小鼠肝癌Hepa1-6细胞中稳定高表达Gnt...
- 樊建慧汪淑晶于生金何静娜郑伟龙张嘉宁
- 关键词：肿瘤转移
- 文献传递
- Let-7c通过下调Mgat4a的表达抑制小鼠肝癌Hca-F细胞N-聚糖β1,6 G1cNAc分支结构的合成
- <正>目的:探讨Let-7c对N-乙酰氨基葡糖转移酶(GnT)及N-糖链合成过程中的影响。材料和方法:microRNA芯片及Haipin-RT-PCR检测let-7c在不同淋巴道转移潜能的小鼠肝癌细胞内表达的差异。脂质体...
- 郭艳杰李盛曲建华叶林汪淑晶樊建慧张嘉宁
- 文献传递
- 人核糖核酸酶抑制因子基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的构建含有人核糖核酸酶抑制因子(hRI)基因的重组腺病毒载体。方法以含有全长cDNA的pT7-RI为模板,PCR扩增hRI,经T载体克隆后,酶切亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,在BJ5183细菌内和pAdEasy-1同源重组。筛选阳性克隆,酶切、PCR及测序鉴定,线性化后脂质体法转染293细胞进行包装、扩增。通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR扩增目的基因等方法鉴定重组的腺病毒。结果酶切鉴定及PCR结果证明hRI基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度为1.5×1010pfu/ml。结论应用细菌内同源重组法成功构建了含hRI基因的重组腺病毒载体。
- 刘鹏赵宝昌樊建慧田余祥杨帆崔秀云
- 关键词：人核糖核酸酶抑制因子腺病毒载体基因治疗
- Let-7c通过下调Mgat4a的表达抑制小鼠肝癌Hca-F细胞N-聚糖β1,6GlcNAc分支结构的合成
- 目的:探讨Let-7c对N-乙酰氨基葡糖转移酶(GnT)及N-糖链合成过程中的影响.材料和方法:microRNA芯片及Haipin-RT-PCR检测1et-7c在不同淋巴道转移潜能的小鼠肝癌细胞内表达的差异.
- 郭艳杰李盛曲建华叶林汪淑晶樊建慧张嘉宁
- N-乙酰氨基葡萄糖转移酶干扰慢病毒载体系统的建立及应用被引量：2
- 2014年
- 目的构建针对N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(GnT)Ⅲ、Ⅳa和Ⅴ的RNA干扰(RNAi)慢病毒系统,并检测干扰慢病毒在体外小鼠肝癌细胞中对不同GnT表达的抑制作用。方法针对三种基因序列设计合成特异的shRNA序列,并构建干扰慢病毒表达载体,利用病毒包装细胞293T包装生产病毒,感染靶细胞Hca-F后,应用RT-PCR和免疫印迹检测干扰慢病毒对三种N-乙酰氨基葡萄糖转移酶表达的抑制。结果经测序证实三种干扰慢病毒表达载体构建成功,并获得高滴度的感染慢病毒。干扰慢病毒感染靶细胞后能够有效下调三种N-乙酰氨基葡萄糖转移酶的表达。结论干扰慢病毒可有效地抑制三种N-乙酰氨基葡萄糖转移酶GnT-Ⅲ、GnT-Ⅳa和GnT-Ⅴ的表达。
- 樊建慧何静娜汪淑晶郑伟龙靳利远张嘉宁
- 关键词：N-乙酰氨基葡萄糖转移酶慢病毒载体RNA干扰
- 高表达人核糖核酸酶抑制因子的乳腺癌细胞株的建立及其鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的建立稳定高表达人核糖核酸酶抑制因子(hRI)的真核细胞系:乳腺癌细胞系,为进一步研究hRI抗肿瘤、抗氧化的作用机制奠定实验基础。方法将hRI通过逆转录病毒载体(pLNCX-hRI)经过病毒包装细胞(PA317)包装后的高滴度病毒上清,感染乳腺癌(MCF-7)细胞系,经G418筛选后,运用RT-PCR、Western blot等方法进行鉴定hRI在MCF-7中的高表达。结果hRI克隆到乳腺癌细胞(MCF-7)基因组,并随着基因组稳定高表达hRI。结论利用逆转录病毒载体感染真核细胞后获得高表达hRI的肿瘤细胞株,从而为进一步研究真核细胞内hRI的抗肿瘤作用机制提供条件。
- 樊建慧刘鹏崔秀云田余祥
- 关键词：人核糖核酸酶抑制因子逆转录病毒乳腺癌细胞
