殷向静
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家葡萄产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 华东葡萄转录因子VpSBP3基因原核表达、纯化及多克隆抗血清制备
- 2013年
- 【目的】制备华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)转录因子VpSBP3基因抗血清,为研究VpSBP3基因功能奠定基础。【方法】构建华东葡萄转录因子VpSBP3基因重组原核表达载体pGEX-VpSBP3,转化大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3),以IPTG为诱导剂诱导目的融合蛋白的表达。切胶电透析回收诱导表达的VpSBP3融合蛋白免疫新西兰兔,制备VpSBP3抗血清。【结果】重组原核表达载体pGEX-VpSBP3在DE3中高效表达出了分子质量为68 kD的GSTVpSBP3融合蛋白。回收的目的融合蛋白免疫新西兰兔后得到了抗血清,经Western-Blot检测,抗血清的免疫-抗原反应良好。【结论】在27℃、0.7 mmol·L-1IPTG过夜培养的诱导条件下,融合蛋白GST-VpSBP3过量表达。免疫大白兔获得的血清特异性强,效价高,可用于VpSBP3基因功能分析。
- 王浩侯鸿敏殷向静宋军阳王西平
- 关键词：华东葡萄转录因子原核表达
- 华东葡萄抗白粉病VpMYBR1基因表达与功能分析被引量：6
- 2013年
- 【目的】从华东葡萄抗白粉病株系‘白河-35-1’中克隆VpMYBR1基因,并进行基因表达与功能分析,为揭示抗白粉病机制提供理论依据。【方法】采用RT-PCR和RACE技术克隆VpMYBR1基因cDNA全长序列,并利用半定量和定量RT-PCR技术进行不同器官和不同处理后的表达分析;通过花序浸染法转化拟南芥,对转基因及未转化对照植株抗白粉病鉴定、台盼蓝染色和抗病标记基因表达分析研究基因功能。【结果】VpMYBR1基因cDNA序列全长539 bp,有228 bp的完整开放阅读框,编码75个氨基酸,包含1个Sant/myb结构域,GenBank登录号为HQ284197;VpMYBR1基因在‘白河-35-1’不同器官中均有表达,且叶中的表达量最强,花序和果实中表达量最弱;VpMYBR1基因的表达在抗白粉病的华东葡萄‘白河-35-1’与感病的‘湖南-1’、抗病的毛葡萄‘商-24’叶片接种白粉菌6 h后达到最大值,而且在‘白河-35-1’中最高,达接种前的28倍。同样,VpMYBR1基因在SA、MeJA处理后的‘白河-35-1’中的表达量明显高于‘商-24’和‘湖南-1’;将VpMYBR1基因导入野生型拟南芥,提高了转基因株系的抗病性;台盼蓝染色和抗病标记基因表达分析表明,该基因可能通过过敏反应(hypersensitivereaction,HR)提高了转基因株系的抗病性。【结论】从华东葡萄克隆了VpMYBR1基因,基因表达及功能分析表明,该基因具有提高转基因植株白粉病抗性的功能。
- 侯鸿敏王浩殷向静闫琴王跃进王西平
- 关键词：华东葡萄白粉病功能分析
- 中国野生葡萄芪合成酶基因STS19及其启动子的克隆与功能分析
- 2023年
- 以中国野生山葡萄(Vitis amurensis Rupr.)‘通化3号’和刺葡萄(V.davidii Foex.)‘塘尾’为材料,克隆得到芪合成酶基因VaSTS19和VdSTS19。序列分析发现VaSTS19和VdSTS19的编码区均为1179 bp,编码392个氨基酸,定位于16号染色体,二者核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.81%和98.21%。亚细胞定位结果显示VaSTS19和VdSTS19均定位于细胞膜、细胞质和细胞核。将35S强启动子连接VaSTS19和VdSTS19转入番茄能显著促进STS19的表达及番茄中白藜芦醇的合成和积累。分别从两种材料中克隆得到VaSTS19和VdSTS19的启动子。顺式作用元件分析表明,二者启动子中均包含多个胁迫应答元件、激素应答元件及光应答元件。序列分析发现二者启动子序列与欧洲葡萄VST2启动子序列同源性为60%。转基因烟草叶片中二者不同长度启动子片段对SA和MeJA诱导响应明显。结果表明STS19的表达模式和白藜芦醇的合成可能与其上游启动子类型和调控有关。
- 刘慧殷向静方景浩高敏李智王西平
- 关键词：葡萄白藜芦醇功能分析启动子
- 铜离子对葡萄酒发酵中硫化氢产量的影响被引量：1
- 2012年
- 以陕西泾阳县的小白玫瑰为材料,根据亚甲基兰比色法,在不同铜离子浓度条件下定量测定发酵过程中产生的硫化氢气体量,以及酒中残留的S2-浓度。结果表明,发酵液中适当浓度的铜离子(0～0.8 mg/L)可以抑制发酵过程中硫化氢气体的生成,当添加0.4 mg/L铜离子浓度时,综合效果最佳。
- 刘富兵殷向静何娟刘延琳
- 关键词：葡萄酒发酵硫化氢
