毕振威
- 作品数：92 被引量：102H指数：5
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 靶向新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重组双特异性纳米抗体及其制备方法和应用
- 靶向新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重组双特异性纳米抗体及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明从免疫羊驼的VHH噬菌体文库中筛选出两条分别针对新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重链抗体可变区序列，通过柔性连接肽连接后...
- 钱晶李丁谭业平毕振威王永山夏兴霞徐司雨诸玉梅
- 传染性法氏囊病病毒样颗粒与单克隆抗体组合双功能疫苗
- 本发明涉及传染性法氏囊病病毒样颗粒与单克隆抗体组合双功能疫苗，属于生物制药领域。运用基因工程技术，构建含传染性法氏囊病病毒强毒株VP2基因的重组杆状病毒，用昆虫细胞培养方法高效表达病毒样颗粒重组VP2蛋白；应用淋巴细胞杂...
- 王永山夏兴霞欧阳伟毕振威李月华刘华洁诸玉梅潘群兴王晓丽董晨红
- 文献传递
- 一种不受Hrd1泛素化降解的突变CDV H蛋白、突变CDV病毒及应用
- 本发明涉及一种不受Hrd1泛素化降解的突变CDVH蛋白、突变CDV病毒及应用，属于生物技术领域。对CDVH蛋白的第115位点氨基酸进行K115R突变，使得突变的CDVH蛋白不能被E3泛素连接酶Hrd1介导的泛素蛋白酶体途...
- 毕振威王文杰徐立波宋素泉
- 联合策略优化犬α干扰素的酵母表达被引量：1
- 2022年
- 前期研究在毕赤酵母中分泌表达了犬α干扰素(CaIFN),其活性较高但产量未达到理想水平。目前工作的重点是提高重组蛋白产量。构建含有1、2、4、6、8拷贝CaIFN基因的酵母转化子,其中KM-6CaIFN产量最高,与KM-1CaIFN相比提高了200.6%。共表达8种分子伴侣,其中Hac蛋白能够提高KM-6CaIFN和KM-8CaIFN的目的蛋白产量,提高幅度分别为32.1%和113.1%。在此基础上继续增加CaIFN拷贝数,可观察到KM-12CaIFN-Hac的产量最高,是KM-8CaIFN-Hac的1.33倍,同时是KM-1CaIFN的5.61倍。通过与梯度稀释的BSA进行蛋白质条带比较,评估KM-12CaIFN-Hac的靶蛋白产量约为581 mg/L,为目前报道中酵母产犬α干扰素最高值。
- 李丁李兰安允飞毕振威毕振威于晓明郑其升
- 关键词：毕赤酵母多拷贝分子伴侣
- 犬细小病毒JS12株VP2基因的分子特征及其在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2013年
- 从犬细小病毒病免疫预防失败病犬体内分离到1株犬细小病毒（CPV），命名为CPV—JSl2株。病毒可凝集猪的红细胞，对乙醚不敏感，pH3不能灭活病毒，pHl0可使病毒失去感染性，56。C作用60min病毒仍有活性，80℃作用30min可灭活病毒。序列分析时CPV—JSl2为CPV-2a亚型，VP2基因全长1755nt，编码584aa，与国外CPV毒株VP2基因的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别在98．9％～99．6％和98．39／6～99．7％之间，与国内和周边地区毒株VP2基因的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别在99．0％～99．7％和97．9％～99．7％之间；16个中国分离株处在不同组，CPV—JSl2株与韩国毒株DH426处在同一分支上，亲缘关系较近。对CPV—jsl2与免疫毒株VP2蛋白的立体结构分析比较，发现有9处氨基酸残基变异，其中6处位于衣壳蛋白表面，5处位于抗原表位区。将VP2基因在大肠杆菌中表达，重组VP2蛋白的分子质量为67．0ku，主要以包涵体的形式存在；Western—blot分析中重组VP2蛋白可与CPV阳性血清发生特异性反应。以纯化的重组VP2蛋白为抗原建立的CPV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。
- 李月华王永山毕振威夏兴霞欧阳伟刘华洁贾红姚火春
- 关键词：犬细小病毒VP2基因分子特征病毒变异原核表达间接ELISA
- 一种分泌高中和活性犬瘟热病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞1D7株
- 本发明涉及一种分泌高中和活性犬瘟热病毒（CDV）单克隆抗体的杂交瘤细胞株，属于生物技术领域。本发明从建立的82株分泌CDV单克隆抗体的杂交瘤细胞库中筛选出一株杂交瘤细胞1D7，用其制备的小鼠腹水抗体对CDV的病毒中和效价...
- 王永山毕振威夏兴霞孙婧范红结赵艳兵温海秦海斌张汇东
- 文献传递
- 免疫鸭体内副黏病毒的分离及其F基因的分子特征
- 2013年
- 为分析当地鸭副黏病毒流行状况及其融合蛋白(F)基因的序列特征,从江苏省某新城疫疫苗免疫过的鸭群中分离到1株病毒,经血清学试验和中和试验鉴定为鸭副黏病毒,命名为JS0920株。生物学特性分析,9日龄SPF鸡胚的半数致死量(ELD50)为10-5.3;9日龄SPF鸡胚的最小致死量平均死亡时间(MDT)为47.7h,1日龄SPF鸡脑内接种致病指数(ICPI)为1.875,6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)测定为2.7。用该病毒的培养物(鸡胚尿囊液)经肌肉注射攻毒,鸭的发病率为70%,死亡率为40%;鸡的发病率和死亡率均为100%。用RT-PCR方法扩增该分离毒株的F基因,序列分析表明,JS0920株与标准强毒株F48E9的核苷酸序列和氨基酸序列同源性最高,分别为99.2%和99.5%,与免疫预防用的LaSota株的同源性分别为89.0%和92.2%;其多肽裂解位点为112R-R-Q-R-R-F117,具有高致病性鸭副黏病毒毒株的分子特征;系统发育进化树分析,JS0920株与LaSota株的基因型不同,JS0920株为基因IX型,与F48E9株的亲缘关系最近。试验结果对认识当前DPMV的流行和变异现状以及疫苗研制具有重要的参考价值。
- 杨建朋毕振威欧阳伟王永山刁有祥
- 关键词：F基因分子特征
- 非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析及其在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2011年
- 为分析当地非典型犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性,根据已发表CDV的N基因序列设计引物,用RT-PCR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因,进行克隆和序列分析,结果表明:该非典型CDV的N基因与已发表的12个CDV强毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在96.6%～99.2%和97.9%～99.4%之间,与已发表的4个CDV疫苗弱毒株的同源性分别在93.2%～93.6%和96.4%～97.5%之间;在N基因系统发育进化树上,非典型CDV与12个强毒株处在同一亚群,而且与9个中国分离毒株的亲缘关系近于3个国外毒株。N基因在大肠杆菌中表达的重组N蛋白的分子量为62 ku,主要以包涵体的形式存在;用western blot分析,重组N蛋白可与CDV阳性血清发生特异性反应;以纯化的重组N蛋白为抗原建立的CDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。
- 毕振威王永山范红结王智群吴晓悠马金荣欧阳伟张海彬
- 关键词：犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因原核表达
- 一种犬瘟热、犬细小病毒病、狂犬病三联亚单位疫苗
- 本发明公开了一种犬瘟热、犬细小病毒病、狂犬病三联亚单位疫苗，属于兽用生物制品领域。本发明的亚单位疫苗是以重组犬瘟热病毒H蛋白、重组犬细小病毒VP2蛋白以及重组狂犬病病毒G蛋白作为抗原，是通过三种重组杆状病毒分别感染昆虫细...
- 钱晶王永山欧阳伟夏兴霞王晶宇马孙婷王晓丽诸玉梅毕振威
- ANP32A调控流感病毒聚合酶活性的机制研究
- 哺乳类的酸性核磷蛋白32A(ANP32A)与禽类存在物种差异性,限制了禽流感病毒(AIVs)聚合酶在哺乳类细胞中的活性。但是,ANP32A调节流感病毒聚合酶活性的机制还不清楚。鸡的ANP32A-X1(chANP32A-X...
- 毕振威
- 关键词：流感病毒
- 文献传递
