汪天杰
- 作品数：11 被引量：32H指数：4
- 供职机构：汕头出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：广东出入境检验检疫局科技计划项目湛江市科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 一种检测副溶血弧菌和霍乱弧菌的多重DPO-PCR引物组合及方法
- 本发明提供了两组引物对，本发明还提供了所述的两组引物对在检测或辅助检测副溶血弧菌和霍乱弧菌，或制备检测或辅助检测副溶血弧菌和霍乱弧菌的产品中的应用；本发明同时还提供了含有该两组引物对的试剂盒及应用，以及基于两组引物对或试...
- 龙阳汪天杰魏霜马新华袁俊杰张娜杨卓瑜杨劲丁秀琼刘骁
- 文献传递
- 多重富集定量PCR(ME-qPCR)同时检测4种食源性病原弧菌被引量：7
- 2016年
- 【目的】溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌是4种重要的食源性病原弧菌,能够造成人类多种疾病,建立同时检测这4种食源性病原弧菌的检测方法是保障食品安全的基础。本研究旨在建立同时检测溶藻弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌的多重富集定量PCR(multiplex enrichment quantitative PCR,ME-q PCR)方法,并含扩增内标用于指示PCR反应的假阴性,创新一种高通量、高灵敏度、具备定量能力的检测方法,为这4种食源性病原弧菌的检测提供新方法。【方法】以细菌16S r RNA为扩增内标靶序列设计引物,并针对副溶血弧菌的collagenase、溶藻弧菌的gyr B、霍乱弧菌的omp W、创伤弧菌的vvh A,分别设计内、外2对特异性引物,首先将所有内、外引物混合,进行一个循环数较少(10—20 cycles)的高通量多重富集PCR将靶基因富集出来,由于循环数较少,各个基因得到均匀的扩增,每个基因均有4种可能的产物,每1种产物均能作为第二轮巢氏荧光定量PCR的模板,这增加了靶基因从模板中被富集出来的概率,然后将产物稀释后作为模板,利用内引物分别进行巢式荧光定量PCR检测各个基因,最后根据扩增曲线和熔融曲线分析结果。通过设置不同的第一轮多重富集PCR循环数(10、15和20个循环),优化ME-q PCR第一轮循环数。采用14株标准菌株的基因组DNA作为模板,评价ME-q PCR的特异性。并以4种弧菌基因组DNA混合物梯度稀释的样品(100、10、1、0.1、0.01和0.001 ng·μL-1)作为模板,对建立的ME-q PCR进行灵敏度和定量能力的评价。并将该方法应用于已分离到的69株疑似弧菌菌落的鉴定中,与传统生理生化鉴定结果进行对比。【结果】优化后,ME-q PCR的第一轮循环数确定为15,特异性评价结果显示该方法特异性强,灵敏度达0.001 ng,高于普通荧光定量PCR约1个数量级,并能有效指示PCR反应的假阴性,且拥有与普通荧光
- 魏霜汪天杰龙阳周广彪林春贵黄帅吴希阳
- 关键词：创伤弧菌溶藻弧菌扩增内标
- 中澳入境旅客携带物检疫的分析比较被引量：7
- 2016年
- 对中国和澳大利亚入境旅客携带物检疫情况进行了比较,着重从管理体制与机构、法律法规、现场查验、风险管理、人员培训、宣传手段等6个方面进行比较与分析。认为澳大利亚有一些先进经验与管理特色值得我们学习借鉴。针对我国入境旅客携带物检疫存在的问题与不足,结合实际情况,提出完善我国旅客携带物检疫工作的几点建议。
- 李艺娟陈小帆刘佳琪陈永红曾素红韦兵郑传发冯黎霞方剑锋何胜强朱静仪汪天杰
- 关键词：动植物检疫
- 澳大利亚进口宠物检疫政策及对我国的启示被引量：1
- 2016年
- 澳大利亚作为世界上少数的无狂犬病的国家之一,其对进口宠物的检疫要求非常严格,一直以来被公认为进口宠物检疫措施最严格的国家之一。笔者通过对澳大利亚进口宠物检疫政策进行研究,着重介绍了澳大利亚进口宠物的检疫程序及要求,总结其检疫监管特色,并针对我国进境宠物检疫监管存在的问题与不足,结合我国实际情况,提出完善我国进境宠物检疫监管工作的几点建议。
- 韦兵郑传发曹志玲汪天杰梁毅勇
- 双重DPO-PCR检测副溶血弧菌和霍乱弧菌被引量：7
- 2016年
- 根据副溶血弧菌collagenase基因和霍乱弧菌omp W基因,分别设计特异性DPO(dual priming oligonucleotide)引物,建立一种快速检测这两种弧菌的多重DPO-PCR方法,并对其特异性和灵敏度进行了评价。结果显示,设计的DPO引物特异性较强,副溶血弧菌和霍乱弧菌DNA可分别扩增出307 bp与463 bp的特异性条带,检测灵敏度均达0.1 ng/μL。该检测方法对退火温度不敏感。利用该方法对69株疑似弧菌菌株进行鉴定,结果与生理生化鉴定结果一致。该方法特异性强、灵敏度高,适合于对食品、水产品等中副溶血弧菌和霍乱弧菌的进行快速筛检。
- 魏霜马新华汪天杰龙阳纪强任娇吴希阳
- 关键词：副溶血弧菌霍乱弧菌
- 检疫犬基地建设与发展策略探讨被引量：1
- 2018年
- 检疫犬应用技术作为一种特殊的检验检疫手段,目前已被30多个国家或地区应用于检验检疫领域。许多国家或地区已建有自己的国家级工作犬训练基地。近年来,由于出入境业务量的迅速增长,我国对检疫犬数量的需求逐年攀升,明确要建成2个国家级检疫犬繁殖训养中心。检疫犬基地作为培养检疫犬的重要场所,其基地面积、位置规划、人力资源、种犬储备、幼犬来源等的科学合理规划,对保证其可持续发展具有重要意义。检疫犬基地的可持续发展,需要准确定位功能需求,搞好种犬繁育,统筹储备人力资源,建设生态环保基地,挖掘和利用社会资源,以及拓展其它功能建设,从而做到行业引领。
- 刘永松王彭军汪天杰韦兵董志凯丘金玉郑育洪罗高清黄法余
- 关键词：检疫犬可持续发展
- 浅析国际马术比赛期间进境赛马检疫监管的关键点
- 2015年
- 为提高对进境赛马的检疫监管水平,保障赛马健康和赛事顺利举办,对进境赛马的特点、检疫监管要求和主要工作环节进行了简述、分析,指出了赛马检疫监管工作的重点和难点,提出了比赛期间应加强赛马临床检疫、训练和赛时监管以及饲草、饲料使用监管等方面的建议。
- 陈永红汪天杰周仲芳游洪
- 关键词：赛马检疫监管
- 澳大利亚进境种羊副结核感染情况调查被引量：6
- 2015年
- [目的]为摸清澳大利亚进境种羊副结核病的感染情况。[方法]采用皮内变态反应试验(TST)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对6810头种羊进行调查。[结果]104头羊副结核病检测呈阳性,阳性率为1.53%。[结论]澳大利亚进境种羊副结核病的感染率虽然不高,但此病严重威胁着羊业的发展,应该高度重视该病的防控。
- 汪天杰刘永松韦兵
- 关键词：副结核病
- 一种重组的OmpK多表位多肽、构建方法及其应用
- 本发明涉及生物医药领域，具体而言，本发明涉及重组多肽、构建方法及其应用，更具体地，本发明提供了一种重组的OmpK多表位多肽及其编码的核苷酸、载体、细胞、疫苗以及其在预防弧菌感染的产品中的用途。实验证明，本发明提供的重组的...
- 张玉晴许如苏汪天杰张峥嵘吴松浩许晓升沈烨周铮宇
- 副溶血性弧菌外膜蛋白K的多表位串联表达研究
- 2018年
- [目的]设计和表达Omp K蛋白的多表位串联肽,综合评价其免疫效应。[方法]构建重组表达质粒p ET-32a-repis并进行原核表达,使用Ni-NTA纯化介质对表达产物进行纯化得到重组多表位串联肽(r EPIS),以r EPIS为免疫原免疫昆明小鼠,对r EPIS进行免疫原性和免疫保护性研究,Western-blot分析r EPIS的免疫反应性。[结果]r EPIS具有良好的免疫原性,能够刺激机体产生较高水平抗体,并且能够保护90%的昆明小鼠抵抗10LD50副溶血性弧菌的感染,具有良好的免疫保护效应,Western-blot结果显示重组r EPIS能够与免疫后鼠血清进行特异性结合,具有良好的免疫反应性。[结论]该研究制备的重组r EPIS具有良好的免疫特性,为副溶血弧菌多表位疫苗的研究奠定了物质基础。
- 张玉晴汪天杰许晓升张峥嵘许如苏
- 关键词：副溶血性弧菌免疫特性
