汪莉
- 作品数:5 被引量:5H指数:1
- 供职机构:第四军医大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制被引量:1
- 2005年
- 目的进行治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制研究.方法用细胞计数、ELISA和FCM分别检测细胞生长、抗体生成速度和抗原结合活性;冻存细胞复苏后及体外传代3个月,检测抗体分泌稳定性和克隆阳性率;进行无菌检查、细胞核型和同工酶谱分析,了解细胞遗传稳定性、外源因子污染和细胞间交叉污染情况.结果肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的细胞生长和抗体生成速度分别为0.047~0.052/h和1.1~1.4 pg/cell·h,与靶细胞FHCC98结合的阳性率达99%,平均荧光强度在200以上.冻存细胞复苏后及体外连续传代3个月后,其特异性抗体生成速度维持在1.0 pg/cell·h以上,培养上清抗体效价仍为1:1000.不同批次的生成细胞核型均符合杂交瘤细胞特征,外源因子检查阴性,无细胞间交叉污染.结论HAb18生产用种子细胞的细胞生长和抗体生成速率、抗体稳定性和特异性均符合已建立的规模化放大培养的种子细胞质控标准.
- 李玲米力刘蓉汪莉徐力青冯强田蓉陈志南
- 关键词:单克隆抗体HAB18种子细胞细胞培养细胞生长
- HAb18Gedomab1单抗的制备及功能研究被引量:1
- 2004年
- 目的:制备抗人HAb18G/CD147胞外区蛋白(HAb18Ged)的单抗HAb18Gedomab1,并对其理化性质和生物学功能进行分析鉴定. 方法:用HAb18Ged免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术, 融合并筛选分泌抗人HAb18Ged蛋白单抗的杂交瘤细胞株, 制备腹水,采用离子交换层析法纯化该抗体.采用流式细胞术、免疫组化等方法对其特异性进行鉴定,并通过明胶酶谱、I型胶原酶谱、重组基底膜降解实验研究该抗体的体外生物学功能. 结果:获得一株稳定分泌抗人HAb18G/CD147胞外区蛋白单抗的杂交瘤细胞株HAb18Gedomab1,滴度为:1:106, 纯化后HAb18Gedomab1单抗的纯度大于90%,抗体亚型属IgG1型.流式细胞术及免疫组化结果证明,该抗体与FHCC-98细胞膜抗原及肝癌组织均呈特异性结合.生物学功能研究表明,HAb18Gedomab1可刺激鼠成纤维细胞(3T3)分泌明胶酶MMP-2,MMP-9及胶原酶MMP-1, MMP-8,并具有促进基底膜降解的作用. 结论:HAb18Gedomabl单抗可特异识别HAb18Ged,刺激MMPs分泌,促进基底膜降解.
- 叶卉陈志南米力商澎骞爱荣蒋建利汪莉谢丽张敏
- 关键词:HAB18G/CD147单抗基底膜杂交瘤细胞株流式细胞术胞外区
- 免疫亲和层析纯化大肠癌相关抗原被引量:3
- 2004年
- 目的 :从培养的大肠癌细胞Hce 86 93中分离纯化并鉴定大肠癌相关抗原。方法 :利用流式细胞术选择高表达大肠癌相关抗原的大肠癌细胞系 ,分别用单去污及三去污裂解液裂解细胞。然后用 5株抗大肠癌单克隆抗体 (mAb)CYL 1~CYL 5进行Westernblot,分析与大肠癌细胞结合反应最强的mAb。以此mAb作为配基进行亲和层析纯化大肠癌相关抗原 ,纯化结果利用Westernblot法进行鉴定。结果 :大肠癌细胞系Hce 86 93上相关抗原的表达量最高 ;抗大肠癌mAbCYL 2与Hce 86 93的结合力最强。纯化所获与CYL 2特异结合的大肠癌相关抗原 ,Mr 约为 13× 10 3 。该抗原由Mr 为 6 0× 10 3 和70× 10 3 两种亚基组成。结论 :利用mAbCYL 2进行亲和层析 ,从大肠癌细胞系Hce 86 93中获得纯化的肿瘤相关抗原。
- 杨勇李郁王贤辉商澎汪莉骞爱荣姚西英陈志南
- 关键词:单克隆抗体
- 一株新的针对亲环素A的单域抗体抑制荷人RA滑膜-正常软骨免疫缺陷鼠嵌合体模型滑膜炎症和软骨侵蚀的研究
- 类风湿关节炎是一种常见慢性、自身免疫病,其病理特点为大量炎性细胞在滑膜的浸润和在滑液的渗出,由此导致滑膜增生、血管翳形成,最终造成关节软骨破坏。RA的病因及发病机制仍不清楚,目前治疗RA的生物制剂主要是以炎性细胞因子和炎...
- 汪莉贾俊峰王聪华马小魁廖成功付之光王彬杨向民朱平李郁陈志南
- 关键词:类风湿关节炎亲环素A单域抗体
- 文献传递
- 一株新的针对亲环素A的单域抗体抑制荷人RA滑膜-正常软骨免疫缺陷鼠嵌合体模型滑膜炎症和软骨侵蚀的研究
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- 汪莉贾俊峰王聪华马小魁廖成功付之光王彬杨向民朱平李郁陈志南
- 关键词:类风湿关节炎亲环素A单域抗体