王冬英
- 作品数：38 被引量：52H指数：5
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 采用胆囊检查法调查牛片形吸虫病流行情况被引量：8
- 2007年
- 为了解广西片形吸虫病的流行情况，本史采用胆囊检查法对广西黄牛和水牛片形吸虫病的流行情况进行了调查，结果表明广西水牛片形吸虫的感染率在60％-80％，黄牛感染率在60％左右，表明广西片形吸虫病感染非常严重。利用胆囊检查法进行片形吸虫病流行病学调查具有操作简单、经济、结果可靠等优点。
- 王冬英张为宇黄维义
- 关键词：片形吸虫水牛黄牛感染率
- 抗大片形吸虫Cat L1单克隆抗体的制备及其双抗体夹心ELISA检测方法的建立
- 2022年
- 【目的】制备抗大片形吸虫组织蛋白酶L1(rFgCat L1)特异性单克隆抗体,并构建其双抗体夹心ELISA检测方法。【方法】用1 mg/mL rFgCat L1蛋白分4次对5只BALB/c小鼠进行免疫,分离小鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合构建杂交瘤细胞,筛选强阳性杂交瘤细胞株,每只小鼠腹腔注射1×10^(6)个细胞制备单克隆抗体。ELISA法检测抗体效价及抗原表位,Western blotting法鉴定抗体亚型和特异性;结合抗rFgCat L1多克隆抗体构建双抗体夹心ELISA检测方法,并检测其敏感性和特异性;用建立的方法对20份阴性血清及阳性血清对照进行检测,筛选其阴阳临界值,并用47份山羊阳性血清及47份奶牛阳性血清对所构建的双抗体夹心ELISA方法进行验证。【结果】免疫后,4只小鼠血清中抗体效价均>10^(4);取小鼠脾细胞与SP2/0融合后,共筛选到8株阳性杂交瘤细胞株,其中5D5和7G6为可稳定分泌抗体的强阳性株,抗体效价分别达2^(9)和2^(10),腹水效价分别达10^(7)和10^(8)。经Western blotting鉴定2株抗体均为IgG1型,轻链为Kappa型,均可特异性结合大片形吸虫排泄-分泌产物(excretory-secretory product,ESP)。由于2株抗体识别相同抗原位点,对比2株单抗的抗体效价,选择以7G6作为捕获抗体,抗rFgCat L1多克隆抗体作检测抗体构建双抗体夹心ELISA法。双抗体夹心ELISA法条件为:7G6以2μg/mL浓度包被,抗rFgCat L1多克隆抗体检测浓度为25μg/mL,酶标二抗稀释度为1∶4000,5%脱脂奶粉封闭,显色时间为25 min。经验证,该方法可识别的最低抗原浓度为0.625μg/mL,并且可特异性识别大片形吸虫抗原。利用构建的双抗体夹心ELISA方法对阳性的奶牛和山羊血清样本进行抗原检测,抗原检出率分别为72.3%及78.7%。【结论】本研究成功制备抗rFgCat L1单克隆抗体并构建大片形吸虫病双抗体夹心ELISA检测方法,结果可为研发低成本、快速诊断试剂盒提供良好的理论依据及物质基础。
- 王乐铭王瑜瑞曾子轩饶国顺吴正姣靳纬坤王冬英
- 关键词：大片形吸虫单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 桂林市牛羊产业发展状况分析及对策
- 2023年
- 随着社会的发展和人民生活水平的提高,对肉类的需求逐步由传统的猪肉、鸡肉和鱼肉向牛肉等高档肉类消费转变。近年来,肉牛肉羊养殖产业市场行情稳中向好,大力的政策扶持使得大量的社会资本进入到牛羊养殖领域,各地牛羊草食动物养殖蓬勃发展,产业迅速扩大发展也逐渐暴露了制约产业发展的问题,牛羊养殖企业难赚钱、不赚钱、亏本经营的现象愈发普遍。本文调查和跟踪了桂林市牛羊产业发展状况,阐述了广西牛羊产业发展存在的共性问题,总结了养殖盈利运营的一些好的经验做法,为桂林以及广西牛羊产业高质量发展提供参考。
- 郑自华张瑞门韦英明蒋钦杨潘艳王冬英吴双燕
- 关键词：牛羊产业
- 一种猪用发酵桑树蛋白饲料及其制备方法
- 本发明公开了一种猪用发酵桑树蛋白饲料及其制备方法，属于饲料加工技术领域，该猪用发酵桑树蛋白饲料，包括以下原料：全株桑树700～850份、糖蜜50～60份、豆粕100～250份、复合微生物A 25～53份、复合微生物B 2...
- 江明生黄大安韦英明蒋钦杨黎江黎彤王冬英
- 文献传递
- 广西黄曲霉、烟曲霉遗传多态性分析
- 王冬英黄维义Jacques GUILLOT
- 大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A的原核表达及不同时期表达水平分析
- 2023年
- 【目的】克隆大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A(Ser/Thr protein phosphatases 2A,PP2A)基因并构建原核表达载体,获得原核表达蛋白,为探究PP 2 A基因功能及其在大片形吸虫的发育中的作用奠定基础。【方法】提取大片形吸虫成虫虫体组织总RNA,应用RT-PCR方法扩增PP 2 A基因的完整编码区序列,并以双酶切的方式连接pET-28a(+)载体;经酶切、测序鉴定后获得阳性质粒pET-28a-PP2A,将pET-28a-PP2A重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行IPTG诱导表达,并对重组蛋白的诱导条件进行优化;通过SDS-PAGE及Western blotting检测大片形吸虫PP 2 A基因的表达效果;应用实时荧光定量PCR检测PP 2 A基因在大片形吸虫虫卵、囊蚴、6周龄童虫和成虫阶段中的表达情况。【结果】克隆的大片形吸虫PP 2 A基因编码区序列长1161 bp,编码386个氨基酸,分子式为C_(1980)H_(3105)N_(535)O_(566)S_(24),分子质量为44.23 ku。生物信息学分析结果显示,大片形吸虫PP 2 A基因编码的蛋白为PP2Ac,分子功能为信号转导(GO:0004871),生物学过程为蛋白去磷酸化(GO:0006470),细胞组分为细胞质(GO:0005829)。PP2A蛋白无信号肽,不存在跨膜结构域,为亲水性蛋白,共含有37个磷酸位点。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,大片形吸虫PP2A在30℃、0.8 mmol/L IPTG诱导6 h时表达量最大,表达产物主要以包涵体的形式存在,且Western blotting检测结果显示,重组蛋白可被抗His标签识别;实时荧光定量PCR结果显示,PP 2 A基因在大片形吸虫6周龄童虫阶段表达量最高,极显著高于其他阶段(P<0.01);在囊蚴阶段的表达量最低,与虫卵阶段差异不显著(P>0.05)。【结论】本研究成功构建了大片形吸虫PP2A原核表达载体并获得相应蛋白,为研究PP 2 A基因在大片形吸虫生长发育中的功能奠定了基础。
- 章志涛李祥龙孔令丽罗雨昕王冬英
- 关键词：大片形吸虫原核表达
- 牛粪尿一体化有机肥及其制备方法
- 本发明公开一种牛粪尿一体化有机肥及其制备方法，属于有机肥加工技术领域。所述牛粪尿一体化有机肥是以发酵垫料、微生物制剂、除臭灵、水为原料，通过垫料预处理，并添加微生物制剂进行发酵，将发酵好的垫料铺设于牛舍中，每3～6个月清...
- 韦英明江明生蒋钦杨陈海兰王冬英林波黎江黄大安
- 文献传递
- 水牛外周血来源树突状细胞体外诱导培养与鉴定
- 2020年
- 为了建立一种体外诱导培养水牛外周血来源树突状细胞(dendritic cell,DC)的方法,试验分离了水牛外周血来源的单个核细胞(PBMC),在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL-4)联合作用下进行诱导分化,并以LPS诱导的未成熟树突状细胞发育为成熟树突状细胞作对照组,通过显微镜(光学显微镜、扫描电子显微镜、透射电子显微镜)和流式细胞术分别对获得的细胞进行形态学观察和表型鉴定。结果表明:PBMC在50 ng/mL GM-CSF和50 ng/mL IL-4体外持续作用6 d后,流式细胞术检测表现出CD11chighMHCⅡmedCD40medCD86low的表型特征,与未成熟树突状细胞的一般表型特征相符。培养至第4天,圆形的PBMC开始呈现出不规则状态;培养至第6天,可在细胞膜上观察到小的微绒毛、突起和细胞聚集等未成熟树突状细胞的形态特征,与表型鉴定结果一致。在LPS的进一步作用下,PBMC呈现出成熟树突状细胞的典型形态。说明GM-CSF和IL-4联合作用可以获得未成熟树突状细胞,并且该细胞可以在LPS的进一步作用下发育成熟,通过该方法可以获得足量的水牛树突状细胞以满足试验需求。
- 杨曦梅雪芳曾子轩王冬英黄维义
- 关键词：树突状细胞水牛光学显微镜透射电子显微镜
- 胆囊检查法检查片形吸虫感染情况被引量：3
- 2007年
- 通过检查从南宁市肉联厂收集的918个水牛胆囊、229个黄牛胆囊的病变和其中的虫卵与虫体,证明广西水牛片形吸虫的阳性率为57.24%,黄牛阳性率为52.8%,感染非常严重。调查发现黄牛和水牛在片形吸虫感染后肝脏和胆囊的病理变化表现出很大的差异,黄牛病理损伤轻,肝脏和胆囊中虫体少;水牛则肝脏和胆囊的病理损伤严重,肝脏和胆囊中虫体多。
- 王冬英黄维义张为宇吴文德
- 关键词：片形吸虫水牛黄牛感染率
- 中华穿山甲感染婿捲线虫(Gendrespirura sp.)的报告被引量：1
- 2016年
- 中华穿山甲（Manis pentadactyla,Chinese Pangolin）主要分布在中国（江苏、浙江、湖南、安徽、广东、广西、贵州、江西、海南、福建、云南、台湾等地）、尼泊尔、缅甸、印度支那和泰国北部,我国被列为二级重点保护野生动物,并且被《中国濒危动物红皮书·兽类》定为易危级[1]。穿山甲以蚂蚁、白蚁为食,对控制白蚁的数量,保护森林和维护生态平衡有重大的意义,但由于蚂蚁、
- 陆珂静闫鼎羽任怡静黄维义王冬英
- 关键词：穿山甲线虫野生动物濒危动物生态平衡
