王文东
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：复旦大学生命科学学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学文学更多>>
- 邻单胞菌邻苯二酚1,2-双加氧酶基因(tfd C)的克隆及其在大肠杆菌中表达被引量：8
- 2000年
- 根据已报道的邻苯二酚 1 ,2 双加氧酶基因 (tfdC)序列 ,设计PCR引物 ,从一株邻单胞菌 (Plesiomonas)的 pL1质粒上扩增到tfdC基因片段 ,连接到 pGEM T载体上 ,并转化大肠杆菌JM1 0 9菌株 ,筛选到阳性克隆。序列分析结果表明 ,PCR产物全长 80 1bp ,有一个阅读框 ,编码 2 55个氨基酸 ,与增氧产碱菌 (Alcaligeneseutroplus)的tfdC基因相比 ,在 693位相差一个碱基 (C→A) ,导致编码产物在 2 2 8位相差一个氨基酸。将目的片段克隆到 pBluescrip tIIKS质粒载体上 ,筛选到阳性克隆 pBt1 2G ,在大肠杆菌JM1 0 9中可表达邻苯二酚 1 ,2 双加氧酶 (C1 2 0 )的活性 ;将翻译起始密码子为ATG的目的片段克隆到 pET 30a质粒载体上 ,筛选到阳性克隆 pET30A ,在大肠杆菌BL2 1 (DE3) plysS中可表达目的蛋白。C1 2 0是芳香族化合物降解过程中的关键酶 ,为了进一步在草坪草中表达tfdC基因 ,利用草坪草降解环境中芳香族污染物 ,将该基因翻译起始密码子由GTG突变成ATG ,突变后的基因在大肠杆菌中可正常表达C1 2 0的活性。
- 马忠华罗如新夏怡丰王文东陈文峻蒯本科
- 关键词：PCR克隆
- 明末清初才子佳人小说研究
- 该文以大约产生在《金瓶梅》到《红楼梦》之间的《吴江雪》、《平山冷燕》、《玉娇梨》等27种才子佳人小说为主要研究对象.在纵向上对才子佳人小说的形成、发展、兴盛、衰落的全过程作系统的追根溯源的叙述,理清才子佳人小说的发展脉络...
- 王文东
- 关键词：才子佳人情节单元
- 文献传递
- 邻单胞菌邻苯二酚1,2-双加氧酶基因(tfdC)在拟南芥中表达的初步研究被引量：6
- 2002年
- 将从一株邻单胞菌中克隆到的一个新的邻苯二酚 1,2 双加氧酶基因 (tfdC)的起始密码子由GTG突变成ATG ,并克隆到农杆菌双元载体 pPZPY12 2中 ,利用农杆菌介导转化模式植物拟南芥 ,获得了转化植株 .经过PCR ,PCR Southern和Southerndotblot方法检测证实 ,tfdC基因已经整合到拟南芥基因组中 .邻苯二酚 1,2 双加氧酶酶活性检测表明 ,转基因植株具有一定的酶活性 。
- 王文东陈文峻罗如新蒯本科
- 关键词：外源基因表达植物修复
- 邻苯二酚1,2-双加氧酶(tfdC)基因在大肠杆菌和拟南芥中的表达研究
- 从一株具有氯苯降解能力的邻单胞菌中克隆到一个新的邻苯二酚1,2-双加氧酶(tfdC),通过序列分析表明,该基因拥有一个765bp的开放阅读框,编码255个氨基酸,与增氧产碱中tfdC基因具有高度的同源性.将该基因的翻译起...
- 王文东
- 关键词：大肠杆菌拟南芥克隆原核表达外源基因表达植物修复
- 文献传递
