王新建
- 作品数：17 被引量：87H指数：5
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 奇异变形杆菌与沙门氏菌双重PCR检测方法的建立
- 目的:建立快速检测奇异变形杆菌与沙门氏菌的双重PCR方法。
方法:根据奇异变形杆菌尿素酶合成的正向调节因子R基因(ureR)和沙门氏菌属侵袭性抗原保守基因(invA)设计特异性引物,建立其双重PCR检测方法,并...
- 王慧朱瑞良谭燕玲魏凯王新建孙振红盛鹏程
- 关键词：奇异变形杆菌沙门氏菌
- 规模化肉种鸡场胚胎性细菌病的多重感染
- 解近年来造成规模化种鸡场鸡胚死亡率增加、孵化率降低的主要病原菌因素及多重感染的情况。本研究对山东某3个大型肉种鸡场17日龄～19日龄的死亡鸡胚进行细菌分离鉴定，经形态特性、生化特性、血清学试验及23S rRNA测序分析确...
- 谭燕玲朱瑞良王慧魏凯孙振红王新建
- AA肉种鸡中内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与分析
- 利用ALV-J gp85基因两侧的序列片段为引物,从山东潍坊某肉中鸡场送检的7日龄肉种鸡基因组中完整地扩增了内源性类ALV-J gp85基因。利用ALV-J env基因特异性引物不能扩增出长度为2.2kbp的目的片段,在...
- 郭文龙朱瑞良闫振贵马荣德朱明华王新建谭延玲王慧魏凯
- 关键词：聚合酶链式反应
- 文献传递
- 泰山松花粉多糖对小鼠免疫增强作用的研究被引量：20
- 2010年
- 【目的】研究泰山松花粉多糖对健康小鼠免疫功能的增强作用以及对免疫抑制小鼠的免疫恢复作用。【方法】用改进的水提醇沉法提取泰山松花粉粗多糖。取清洁级昆明小鼠(雌性)160只,随机分为8组,3个多糖组(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ),3个环磷酰胺(Cytoxan,CTX)-多糖组(Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ),另外2组为CTX对照组(Ⅶ)和正常对照组(Ⅷ)。Ⅰ、Ⅳ组多糖注射剂量为400mg·kg-1,Ⅱ、V组多糖注射剂量为200mg·kg-1,Ⅲ、Ⅵ组多糖注射剂量为100mg·kg-1,从第1天连续皮下注射7d;Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组于第1天每只每次腹腔注射75mg·kg-1CTX,隔1天注射一次,共计3次;Ⅷ组皮下注射生理盐水。第8天,所有小鼠腹腔注射1头羽份的ND冻干苗,分别在免疫后3、10和15d采取血液、脾脏和小肠,用β微量法检测血清抗体、全自动血细胞分析仪测定外周血淋巴细胞比率、流式细胞术检测脾淋巴细胞转化率,ELISA法检测小肠IgA含量。【结果】Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组各指标均显著高于Ⅷ组(P<0.05),其中Ⅰ、Ⅱ组与Ⅷ组相比差异极显著(P<0.01)。Ⅳ、Ⅴ组极显著高于Ⅶ组(P<0.01),Ⅵ组显著高于Ⅶ组(P<0.05),Ⅳ组结果与Ⅷ组差异不显著。并且免疫后10d的各组显著高于免疫后3d的各对应组(P<0.05),与免疫后15d的差异不显著。【结论】泰山松花粉多糖能提高正常小鼠和免疫抑制小鼠的抗体水平、血液淋巴细胞比率、脾脏淋巴细胞转化率以及小肠IgA含量,200mg·kg-1剂量的效果即非常显著,400mg·kg-1剂量能使CTX诱导的免疫抑制完全恢复到正常水平。
- 魏凯孙振红谭燕玲王慧王新建朱瑞良
- 关键词：环磷酰胺抗体免疫增强淋巴细胞IG
- 超强毒IBDV GX8/99株4株克隆化毒F20代免疫效果分析被引量：1
- 2012年
- 本研究将以vvIBDV GX8/99株4株克隆化细胞毒为研究对象,通过鸡胚成纤维细胞连传至20代,得到4株克隆化毒F20代:GX-IBDVE10C25CL1-20、GX-IBDVE10C25CL2-20、GX-IBDVE10C25CL4-20、GX-IBDVE10C25CL5-20。分别提取RNA,通过Nested-PCR、基因克隆、核苷酸序列测定和分析,从而摸索出了vvIBDV GX8/99株四株克隆株在细胞传代过程中VP2核苷酸序列和推导出的氨基酸序列的变化规律。与原始囊毒和D78疫苗毒相比,4个细胞适应毒克隆株F20 VP2高变区的约145个氨基酸中,有12个位点发生了相同的变异,变得与适应细胞的疫苗毒D78株基本一致。实验表明VP2高变区大多数氨基酸的变异与对细胞培养或组织的亲和性的关系更为密切。将4株克隆毒株的20代细胞毒免疫SPF鸡,40日龄进行攻毒实验,免疫效果明显,保护率几乎达到100%,二免后第14 d左右抗体浓度达到高峰。从抗体水平和病理组织学变化看,4株克隆化毒F20代中GX-IBDVE10C25CL4-20株免疫效果稳定,病理变化不明显,有望成为理想的疫苗株,为控制vvIBDV的感染提供一条新的途径。
- 王新建朱瑞良谭燕玲魏凯王慧王尊民赵庆友赵昌亮
- 关键词：细胞适应毒克隆VP2基因高变区免疫保护效果
- 禽波氏杆菌外膜蛋白A的克隆测序与生物信息分析被引量：5
- 2011年
- 本文旨在克隆禽波氏杆菌外膜蛋白OmpA的编码基因,并预测OmpA蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨禽波氏杆菌外膜蛋白OmpA在免疫保护中所起的作用。作者对禽波氏杆菌的外膜蛋白ompA基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学相关软件和方法,对禽波氏杆菌OmpA蛋白的二级结构和B细胞抗原表位进行预测。禽波氏杆菌ompA基因全长597bp,编码199个氨基酸。二级结构以无规卷曲为主,有少量的α-螺旋和β-片层,少见β-转角;推测OmpA蛋白有5个B细胞优势抗原表位区域、2个糖基化位点。本研究为进一步分析禽波氏杆菌免疫机理、制备单克隆抗体和设计表位疫苗等奠定理论基础。
- 谭燕玲朱瑞良王慧王新建魏凯孙振红盛鹏程
- 关键词：禽波氏杆菌外膜蛋白AB细胞抗原表位
- 芦荟粗提物抑菌及抗病毒作用的研究被引量：12
- 2011年
- 为研究芦荟粗提物对多种常见畜禽致病菌和病毒的体外抑菌和抗病毒作用,本实验采用培养基打孔法观察芦荟粗提物对致病菌的抑菌作用;采用含不同浓度芦荟粗提物的固体培养基培养致病菌观察其抑菌效果;采用细菌计数法分析致病菌在芦荟粗提物液体培养基中的增殖情况。分别采用细胞培养和鸡胚接种法检测不同浓度芦荟粗提物以及不同作用时间对传染性囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)增殖的抑制作用。结果表明:芦荟粗提物对供试菌均具有抑菌作用,其中金黄色葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、蜡样芽胞杆菌培养时出现明显的抑菌圈,直径(D)>14 mm;固体培养基中芦荟粗提物浓度大于40%时可形成可明显地减少菌落数;浓度大于80%的液体培养基中细菌生长到达对数期的时间比对照组延长至少4 h。IBDV与芦荟粗提物作用组的MTT OD570nm值均高于病毒对照组,并且随浓度的增大和时间的延长而升高;NDV与芦荟粗提物作用组的血凝价均低于病毒对照组,并且随浓度的增大和作用时间的延长而降低。
- 孙振红魏凯谭燕玲王慧王新建盛鹏程朱瑞良
- 关键词：抑菌抗病毒
- 鸡胚胎性病原菌多重PCR检测方法的建立被引量：14
- 2011年
- 为建立同时检测禽波氏杆菌(Bordetella avium)、沙门氏菌(Salmonella)、大肠杆菌(Escherichia coli)和绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)4种导致鸡胚死亡病原菌的多重PCR方法,本研究根据B.avium的ompA基因、Salmonella的invA基因、E.coli的phoA基因和P.aeruginosa的toxR基因序列,各设计一对特异性引物进行多重PCR反应,并对反应体系和条件进行优化。结果显示,4对引物分别扩增出597bp、724bp、372bp和278bp的目的条带;并且特异性强不与其他非目的菌发生反应。经优化B.avium、P.aeruginosa和E.coli多重PCR检测灵敏度达到104cfu/mL,而Salmonella为103cfu/mL。本研究建立的多重PCR方法为相关病原菌的快速检测提供方法。
- 谭燕玲朱瑞良王慧王新建魏凯孙振红盛鹏程
- 关键词：禽波氏杆菌沙门氏菌绿脓杆菌多重PCR
- 鸡奇异变形杆菌外膜蛋白的抗血清制备及其荧光标记抗体检测方法的建立
- 立鸡奇异变形杆菌(P.mirabilis)直接荧光标记抗体检测方法，本研究采用改良的方法提取了奇异变形杆菌OMP。以该OMP免疫健康新西兰家兔制备兔抗鸡奇异变形杆菌OMP高免血清，制得纯化的IgG,用FITC标记得到兔抗...
- 朱明华朱瑞良王慧孙寅剑马荣德谭燕玲魏凯王新建郭文龙
- vvIBDV GX8//99株克隆化毒免疫效果检测及其与VP2高变区相关性分析
- 传染性法氏囊病/(Infectious bursal disease, IBD/)是由传染性法氏囊病病毒/(Infectious bursal disease virus, IBDV/)引起鸡的急性、高度接触性传染病,主...
- 王新建
- 关键词：VVIBDV免疫原性VP2高变区
- 文献传递
