王青柏
- 作品数：22 被引量：78H指数：5
- 供职机构：广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室更多>>
- 发文基金：广东省科学院分析测试基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 溶藻弧菌Ⅲ型分泌系统vscC基因缺失株的构建被引量：1
- 2012年
- [目的]构建未引入任何遗传标记物的溶藻弧菌vscC基因框内缺失突变株。[方法]首先以溶藻弧菌ZJ51-O基因组DNA为模板,用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)扩增法构建体外vscC基因缺失片段;扩增产物经酶切后连接至自杀质粒pDM4,再转化入大肠杆菌SY327进行克隆,筛选阳性克隆子并进行PCR分析鉴定;提取阳性克隆子的自杀重组质粒pDM4-△vscC,用热休克法将其转入到大肠杆菌S17-1中,再经接合生殖的方式将自杀重组质粒导入溶藻弧菌ZJ51-O菌株中,利用抗生素筛选策略与蔗糖反向筛选系统,挑选疑似目的突变菌株,最后利用PCR鉴定与测序分析进行确证。[结果]溶藻弧菌ZJ51-O的vscC基因框内缺失突变株构建成功。[结论]该研究为进一步研究vscC基因的功能和T3SS在溶藻弧菌致病过程中所起的作用奠定基础,同时也为溶藻弧菌的其他基因突变株的构建和研究提供了参考和试验经验。
- 王青柏胡超群陈偿徐鹏
- 关键词：溶藻弧菌同源重组
- 电感耦合等离子体质谱法测定土壤/沉积物中16种重金属的研究被引量：17
- 2012年
- [目的]采用Carius管密封溶样技术,建立了王水消解—电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)直接测定土壤/沉积物中16种重金属元素的分析方法。[方法]190℃下王水消解样品,稀释后即可直接测定。[结果]ICP-MS测定时,乙醇不仅对As、Se的检测信号有较明显的增敏作用,而且对复合离子40Ar35Cl+、35Cl16O+、37Cl16O+的形成有一定的抑制作用。[结论]该方法应用于一系列土壤和水系沉积物国家标准物质,所得结果与推荐值相吻合,方法精度优于5%,方法检出限(3σ,DF=1000)为0.001 mg/kg(Cd)～0.774 mg/kg(Cr)。
- 徐鹏李良秋马连营王青柏张丽明
- 关键词：重金属乙醇
- 用环介导等温扩增方法检测副溶血弧菌的试剂盒及方法
- 本发明涉及一种用环介导等温扩增方法检测副溶血弧菌的试剂盒及方法，该试剂盒包括LAMP反应液A、下游内引物DNA聚合酶B、显色剂C；其中LAMP反应液A中的上游内引物为：tctggtcagcaagcagcagttttttc...
- 任春华胡超群罗鹏王青柏
- 文献传递
- 用环介导等温扩增方法检测河流弧菌的试剂盒及方法
- 涉及一种用环介导等温扩增方法检测河流弧菌的试剂盒及方法，试剂盒包括(1)LAMP反应液A，其中上游内引物为：gtgccttccacatcaccaggattttggtgacctgatcgtcacac；下游内引物为：tccg...
- 任春华胡超群罗鹏王青柏
- 文献传递
- 溶藻弧菌III型分泌系统vscC基因缺失株的构建(英文)
- 2012年
- [目的]构建未引入任何遗传标记物的溶藻弧菌vscC基因框内缺失突变株。[方法]首先以溶藻弧菌ZJ51-O基因组DNA为模板,用重叠延伸PCR(gene splicing by overlapext ension PCR,SOE-PCR)扩增法构建体外vscC基因缺失片段;扩增产物经酶切后连接至自杀质粒pDM4,再转化入大肠杆菌SY327进行克隆,筛选阳性克隆子并进行PCR分析鉴定;提取阳性克隆子的自杀重组质粒pDM4-△vscC,用热休克法将其转入到大肠杆菌S17-1中,再经接合生殖的方式将自杀重组质粒导入溶藻弧菌ZJ51-O菌株中,利用抗生素筛选策略与蔗糖反向筛选系统,挑选疑似目的突变菌株,最后利用PCR鉴定与测序分析进行确证。[结果]溶藻弧菌ZJ51-O的vscC基因框内缺失突变株构建成功。[结论]该研究为进一步研究vscC基因的功能和T3SS在溶藻弧菌致病过程中所起的作用奠定基础,同时也为溶藻弧菌的其他基因突变株的构建和研究提供了参考和试验经验。
- 王青柏胡超群陈偿徐鹏
- 关键词：溶藻弧菌同源重组
- 用环介导等温扩增方法检测拟态弧菌的试剂盒及方法
- 涉及一种用环介导等温扩增方法检测拟态弧菌的试剂盒及方法，试剂盒包括LAMP反应液A、Bst DNA聚合酶B、显色剂C，其LAMP反应液A中上游内引物为：gcggtcgtgggttacatttccattttaaggccaa...
- 任春华胡超群罗鹏王青柏
- 文献传递
- 三种微生物鉴定技术的分析与应用被引量：5
- 2019年
- 本文分别从生化水平、基因水平、蛋白质水平三个水平上介绍三种典型的微生物鉴定技术VITEK?2 Compact、16S r RNA基因测序和MALDI-TOF MS,阐述不同微生物鉴定技术的局限性、优化方案及联用技术,并分析比较三种鉴定技术的优缺点以及其在食源性病原菌监测方面的应用。
- 曾绮文王青柏朱红惠
- 关键词：生化测序蛋白指纹图谱
- 微生物检测内部质量监控评价方法被引量：1
- 2019年
- 本文主要介绍微生物检测内部质量监控几种常用的评价方法,为微生物检测实验室制定合理、有效的内部质量监控计划及其结果评价方法提供参考。
- 王青柏曾绮文谭雨婷李良秋
- 关键词：微生物
- 固体进样-石墨炉原子吸收光谱法测定土壤中重金属被引量：35
- 2015年
- 采用直接固体进样-石墨炉原子吸收分析技术,研究了基体改性剂、灰化温度和原子化温度对土壤中As,Cd,Zn,Sn,Hg,Pb,Cr,Cu和Mn 9种重金属含量分析的影响。当As,Cd,Zn,Sn和Hg等元素使用Pd(NO3)2+M g(NO3)2作为基体改进剂时有利于吸光度的增加,而NH4H2PO4作为基体改进剂有利于Pb,Cr,Cu和M n吸光度的增加。方法应用于国家标准物质,结果与推荐值相吻合,方法 RSD优于7.0%,各种重金属方法检出限均低于0.1223 ng。
- 徐鹏王青柏姜雅红
- 关键词：石墨炉原子吸收重金属
- 拟态弧菌全长toxR基因的克隆和序列分析被引量：2
- 2008年
- 对克隆的拟态弧菌Vibrio mi micus的全长toxR基因及进行相关的序列分析。根据已发表的其他几种弧菌toxR基因两翼核苷酸序列,设计和合成上下游简并引物,以拟态弧菌1.1969标准株的基因组DNA为模板进行PCR扩增,将获得的1.3kb扩增片断进行克隆、鉴定和测序,并将该序列提交至GenBank(登录号为EF693743)。首次获得拟态弧菌840bptoxR基因全长核苷酸序列。与其它弧菌的相应序列分析比对显示,该序列与霍乱弧菌Vibrio cholerae的toxR基因有87%—88%的相似性,与鳗弧菌Vibrio anguillarum的toxR基因有75%的相似性,与副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus的toxR基因有45%的相似性。该基因编码1个含有279个氨基酸残基的蛋白质,其分子量为31.13kDa,等电点为5.35,并含有一个典型的转录激活区和一个跨膜区。系统发育树分析表明,几种常见致病性弧菌的toxR基因序列存在较大分歧,拟态弧菌能较容易与进化相近的霍乱弧菌鉴别区分开来。toxR基因全长核苷酸序列的获得将为拟态弧菌的菌种鉴定增添新的分子靶标,有助于其结构和功能的研究及通过突变分析鉴定出新的受toxR基因调控的致病基因。
- 王青柏胡超群罗鹏任春华
- 关键词：拟态弧菌致病性弧菌
