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小鼠白介素18与白介素1β转化酶共表达载体的构建及真核表达被引量：4: 2005年; 为了制备白介素18前体(proIL-18)和白介素1β转化酶(ICE)共表达肿瘤疫苗,从小鼠脾细胞克隆proIL-18和ICE基因,构建小鼠proIL-18和ICE共表达质粒(pIRES-proIL-18-ICE),经测序证实序列正确后,脂质体法转染小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210,筛选稳定表达细胞株。转染细胞RT-PCR及转染细胞培养上清IL-18ELISA检测结果表明,肿瘤细胞可以表达并分泌成熟的IL-18。培养上清的IL-18可显著诱导ConA刺激的小鼠脾细胞产生IFN-γ,表明其具有功能活性。生长曲线和细胞周期实验证实与未转染的肿瘤细胞相比,转染空载体pIRES、pIRES-proIL-18、pIRES-ICE、pIRES-proIL-18-ICE基因对肿瘤细胞生长增殖无明显影响。IL-18白血病瘤苗的成功制备表明,利用pIRES载体在同一肿瘤细胞中共表达的proIL-18和ICE能够完全模拟生理过程,在真核细胞内有效酶切,分泌出成熟并有功能活性的IL-18;构建的IL-18瘤苗为进一步评价其在小鼠体内的抗白血病效果奠定基础。; 徐玢马小彤董成亚石洋林永敏宋玉华吴克复; 关键词：肿瘤疫苗

胚胎发育相关基因(EDAG)的研究进展: 2005年; 胚胎发育相关基因(EDAG)是新近发现的基因,主要表达于人类造血系统细胞中,可能参与调控造血细胞的增殖、分化。将EDAG稳定表达于小鼠成纤维细胞系NIH3T3中,可导致NIH3T3发生恶性改变。白血病细胞系中EDAG高表达,可能与白血病细胞未分化状态的维持有关。另外还发现,EDAG的表达可以提高NF-kB的转录活性和DNA结合活性,推测NF-_kB可能是EDAG发挥调控功能的途径之一。; 石洋马小彤; 关键词：白血病细胞分化 NF-ΚB

小鼠IL-18基因修饰瘤苗的抗白血病作用研究被引量：7: 2007年; 我们在前期工作中成功制备了IL-18基因修饰的白血病疫苗,为了探讨IL-18基因修饰瘤苗的体内抗白血病作用,实验采用L1210小鼠淋巴细胞白血病模型,在小鼠体内接种IL-18基因修饰瘤苗,观察瘤苗对L1210细胞致瘤性的影响及免疫保护作用,并进一步对其抗白血病作用机制进行了探索。结果显示,IL-18基因修饰瘤苗能够明显延长荷瘤小鼠存活时间,大部分小鼠达到长期生存,且长生存小鼠用野生型L1210细胞二次攻击后大多数仍能长期生存,表明IL-18基因修饰瘤苗有显著的抗白血病作用,并可诱导小鼠产生免疫记忆和免疫保护。机制探讨发现,接种IL-18基因修饰瘤苗后,小鼠脾脏淋巴细胞对L1210肿瘤细胞的CTL及NK细胞杀伤活性明显高于对照组(P<0.05),提示IL-18基因修饰瘤苗能够显著增强抗肿瘤CTL和NK细胞反应。接种瘤苗可使小鼠IFN-γ水平升高,但与对照相比无统计学意义,提示IFN-γ可能在IL-18基因修饰瘤苗诱导的抗肿瘤免疫应答中作用不大。; 徐玢马小彤董成亚石洋林永敏吴克复; 关键词：白细胞介素18 肿瘤疫苗

小鼠β-防御素2肿瘤疫苗的构建及特性鉴定被引量：2: 2007年; 目的:构建分泌性小鼠β-防御素2(MBD2)真核表达质粒,转染L1210淋巴细胞白血病细胞,对转染细胞进行功能及特性鉴定。方法:RT-PCR法从小鼠皮肤细胞克隆MBD2成熟部分基因片段,用overlap PCR法将小鼠Igκ信号肽与MBD2成熟片段相连,构建MBD2分泌表达载体。经测序证实序列正确后,脂质体法转染L1210细胞,筛选稳定表达细胞株。RT-PCR、Western blot检测瘤苗MBD2的表达。Transwell法检测瘤苗分泌的MBD2对不成熟树突状细胞(iDC)迁移的作用。细胞计数、PI染色及FACS观察转染MBD2对肿瘤细胞增殖、细胞周期及MHCⅠ类(H-2Kd,H-2Dd)、Ⅱ类(I-Ad)分子及共刺激分子(CD80、CD860)表达的影响。结果:转染MBD2基因的肿瘤细胞表达并分泌MBD2,并以剂量依赖方式趋化iDC,表明具有生物学活性。转染MBD2基因对肿瘤细胞生长增殖、细胞周期及细胞表面MHC分子及共刺激分子表达无明显影响。结论:本实验成功构建了MBD2白血病细胞疫苗,为进一步体内评价抗白血病效果奠定了基础。; 马小彤徐玢董成亚石洋林永敏吴克复; 关键词：防御素天然免疫瘤苗急性淋巴细胞白血病

抗菌肽肿瘤疫苗的研制: 马小彤吴克复林永敏安莉莉徐玢石洋董成亚; 将一种天然免疫抗菌肽小鼠β-防御素2转染到白血病细胞，制备肿瘤疫苗，评价其抗瘤作用。结果表明，利用MBO2的天然免疫识别机制，启动了免疫系统对肿瘤的识别杀伤，具有显著的抗白血病效果。; 关键词：; 关键词：抗菌肽肿瘤疫苗天然免疫

小鼠白介素18瘤苗的构建及抗白血病作用研究: ＜正＞目的白细胞介素-18（IL-18）是多功能免疫调节因子,在感染、慢性炎症以及肿瘤等多种疾病的预防和治疗方面有重要意义。它能诱导T细胞、NK细胞产生IFN-γ促进Th1细胞发育、增殖和分化以及增强NK细胞活性,产生抗...; 徐玢马小彤董成亚石洋林永敏吴克复马小彤; 文献传递

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石洋