肖志宏
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 截断型载脂蛋白E4对培养神经元细胞中神经细丝磷酸化的影响(英文)被引量：2
- 2006年
- 背景:神经细丝的磷酸化程度与阿尔茨海默病的发生密切相关,载脂蛋白E4是阿尔茨海默病公认的易患因子,但载脂蛋白E4对神经元细胞内神经细丝磷酸化的影响及机制尚不十分清楚。研究显示在阿尔茨海默病患者脑组织和体外培养的神经元细胞中,载脂蛋白E4蛋白C末端的272～299位氨基酸残基可被水解截去,产生truncated-apoE4片段,且与阿尔茨海默病的特征性病理改变神经纤维缠结中的磷酸化神经细丝相互作用。目的:在细胞水平观察truncated-ApoE4过度表达对培养的神经元中神经细丝磷酸化的影响。设计:非随机对照实验观察。单位:华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系。材料:实验于2005/12在华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学实验室完成。小鼠成神经瘤贴壁生长细胞株N2a由许华熙博士提供。方法:构建pEGFP-T-apoE4真核表达重组体,采用脂质体介导的方法分别将pEGFP-c3、pEGFP-apoE4和pEGFP鄄T-apoE4瞬时转染小鼠成神经瘤细胞株(N2a),24～48h后,免疫印迹技术检测神经细丝的磷酸化状态,测定糖原合酶激酶3、细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)的活性。主要观察指标:神经细丝的磷酸化程度及糖原合酶激酶3、细胞周期依赖性蛋白激酶5的酶活性。结果:转染组细胞内磷酸化神经细丝含量显著增多,糖原合酶激酶3酶活性显著增加,以pEGFP-T-apoE4转染组最为显著(P<0.05),细胞周期依赖性蛋白激酶5酶活性与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05)。结论押Truncated鄄ApoE4过度表达可通过激活糖原合酶激酶3而非细胞周期依赖性蛋白激酶5引起成神经瘤细胞株(N2a)细胞中神经细丝过度磷酸化,提示truncated鄄ApoE4可能参与了阿尔茨海默病的病理过程。
- 周洁陈娟肖志宏金光耀冯友梅
- 关键词：载脂蛋白E类糖原合酶激酶3细胞周期蛋白质依赖激酶类
- β-连环蛋白对转化生长因子β1活化HSC—T6细胞的影响被引量：4
- 2009年
- 目的观察β-连环蛋白对转化生长因子β1（TGFβ1）活化肝星状细胞（HSC）的影响。方法通过脂质体介导，将β-连环蛋白真核表达质粒[pcDNA3．1（＋）-β—catenin]和绿色荧光质粒pEGFP—N1共转染体外培养的HSC-T6细胞株，用逆转录PCR和Western blot法检测经TGFβ1刺激后两组细胞smad 3、β-连环蛋白mRNA及蛋白质的表达。组间比较采用方差分析。结果 β连环蛋白转染阳性的HSC—T6细胞株经TGF β1刺激后表达smad3、β-连环蛋白及其mRNA明显强于未转染β-连环蛋白基因的HSC—T6细胞，更强于正常培养的HSC—T6细胞，smad3 mRNA相对表达量分别为：0．642±0．011、0．501±0．021、0．511±0．019、0．356±0．017，F=135．304，P〈0．05,β-连环蛋白mRNA相对表达量分别为：0．783±0．021、0．543±0．033、0．538±0．024、0．212±0．019，F=267．340，P值均〈0．05。smad3蛋白质相对表达量分别为：0．892±0．012、0．124±0．011、0．130±0．021、0．003±0．001，F=2823．813，P〈0．05；β-连环蛋白相对表达量分别为：0．921±0．020、0．210±0．010、0．208±0．008、0．002±0．001，F=3440．982，P〈0．05。β-连环蛋白和smad3蛋白质的表达均与α-平滑肌肌动蛋白的表达显著相关（，=0．901，P〈0．01；／-=0．939，P〈0．05）。结论 β连环蛋白基因转染体外培养的HSC—T6细胞株，促使HSC表达smad 3、α-平滑肌肌动蛋白增强，提示β-连环蛋白能增强TGFβ1的致纤维化作用。
- 李文庭贺永文肖志宏马彦斌
- 关键词：肝纤维化转化生长因子Β1Β连环蛋白肝星状细胞
- 转化生长因子β1对大鼠肝星状细胞表达β-连环蛋白的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肝星状细胞(HSC)表达β-连环蛋白(β-catenin)的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)比较经不同浓度的TGF-β1刺激不同时间后HSC表达β-catenin、smad3和α-SMA mRNA的变化,并比较三者之间的关系。结果1ng/mlTGF-β1刺激2h后,HSC表达β-catenin mRNA、smad3 mRNA和α-SMA mRNA量最大,β-catenin mRNA表达与两者均具有明显的相关关系(r=0.947,P<0.01;r=0.950,P<0.01)。结论β-catenin在TGF-β1活化HSC的过程中发挥重要作用。
- 李文庭贺永文肖志宏
- 关键词：转化生长因子Β1Β-连环蛋白肝星状细胞
