蒋泓
- 作品数：38 被引量：124H指数：6
- 供职机构：佛山科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 结核分枝杆菌疫源追踪的基因检测分析被引量：2
- 2010年
- 目的探讨牛源性人结核疫源追踪的基因分析方法。方法采用复方PCR结核杆菌快速鉴定技术,针对特征性分枝杆菌标志基因(MTP40基因、α抗原基因和IS6110),对结核病人和患牛的标本,进行检测。结果患者标本结核分枝杆菌阳性;患牛标本牛分枝杆菌和结核分枝杆菌分别阳性。结论结核病奶牛不仅是人类牛型结核的可能来源,也可能成为人类人型结核的潜在来源。
- 万学勤曾方银唐冬生李万可兰蒋泓翁闪凡黄永芬
- 关键词：传染源PCR牛乳
- 人工锌指核酸酶的电子设计与结构模拟
- 2011年
- 以电子设计用于猪的多位点基因打靶的人工锌指核酸酶为例,探索如何电子设计优化理想的人工锌指核酸酶,以减少人工锌指核酸酶的毒性。采用OPEN电子设计方法,生物信息学方法的预测分析ZFP的立体结构,设计优化合适的连接体和间隔体组合,并通过突变优化Fok I异源二聚体。采用OPEN法设计三指ZF序列,并连接为ZFP序列,设计出长度为6 bp且富含AT碱基的spacer,加上长度为4个氨基酸残基的inter-domain linker,连接FokⅠ切割结构域双突变子异源二聚体,并通过各种软件工具对ZFN的空间结构进行模拟预测,所设计得到的ZFN的有效率超过50%。探索获得电子设计理想ZFN的方案,即特异性结合DNA的锌指蛋白、最佳的linker和spacer的长度与组合以及优化的特异性切割的Fok I异源二聚体切割结构域。
- 张勇蒋泓邓廷贤粟文俊杨莉珊唐冬生
- 关键词：锌指核酸酶锌指蛋白连接体
- 类转录激活因子效应物核酸酶介导的E-cad和Bmi-1基因联合干预鼻咽癌的体外研究被引量：8
- 2018年
- 目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,Bmi-1)基因联合干预对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法:构建多位点基因打靶载体p UC-DS1-E-cad-2ANeo-DS2(以下简称E-cad打靶载体)和p UC-DS1-Bmi-1 sh RNA-Zeo-DS2(以下简称Bmi-1打靶载体),将E-cad打靶载体、Bmi-1打靶载体及佛山科学技术学院分子医学研究院前期构建的TALEN载体以不同组合转染鼻咽癌CNE-2细胞。采用PCR检测靶基因的整合,Western印迹检测靶基因蛋白表达水平变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力变化。结果:靶基因E-cad和Bmi-1 sh RNA表达元件成功整合到鼻咽癌CNE-2细胞的基因组中;转染后鼻咽癌CNE-2细胞中E-cad的蛋白表达水平明显上升,Bmi-1的蛋白表达水平明显下降;干预E-cad及Bmi-1不影响细胞的增殖、周期和凋亡,但显著抑制细胞的迁移和侵袭能力,且E-cad和Bmi-1联合干预比单独干预更能显著抑制鼻咽癌CNE-2细胞体外迁移能力(均P<0.01)。结论:TALEN介导的E-cad和Bmi-1联合干预能有效抑制鼻咽癌CNE-2细胞的体外迁移和侵袭,可为人类癌症的基因治疗建立前期的实验基础。
- 罗婷婷严爱芬严爱芬刘连蒋泓冯翠兰刘芳刘芳周天鸿
- 关键词：鼻咽癌
- 脂质体转染巴马猪胎儿成纤维细胞条件的优化被引量：9
- 2011年
- 研究旨在脂质体介导基因转染巴马猪胎儿成纤维细胞时获得较高转染效率,同时以GFP为报告基因探讨影响外缘基因转染效率的参数,如DNA和脂质体的用量、转染的细胞数量及细胞与DNA与脂质体复合物的孵育时间。结果表明,6μgDNA与15μL脂质体转染8h,可获得较满意的转染效率。
- 粟文俊蒋泓唐冬生洪亚辉
- 关键词：脂质体成纤维细胞转染绿色荧光蛋白
- 蛋白芯片技术联合定量检测妇科肿瘤标志物的研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究C12联合检测多种肿瘤标志物对妇科恶性肿瘤诊断的意义。方法选取100例妇科良性病变、73例健康女性和病理确诊的81例妇科恶性肿瘤(卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌)病例的血清标本,利用HD-2001A蛋白芯片仪进行12种肿瘤标志(包括CA199,NSE,CEA,CA242,CA125,CA153,AFP,Ferritin,Free-PSA,PSA,HGH andβ-HCG)的联合定量检测,对比C12芯片检测系统检测妇科恶性肿瘤与良性病变及正常对照组的差异性。结果妇科恶性肿瘤组中CA199、CEA水平及阳性率均高于良性病变组和正常对照组,统计学差异显著(p<0.05)。卵巢癌中CA199和CA125、子宫颈癌和子宫内膜癌中CEA水平高于正常对照组,差异有显著性(p<0.05)。卵巢癌中CA199和CA125联合检测能提高阳性率。结论利用C12联合检测多种肿瘤标志物可以提高恶性肿瘤诊断的准确性,其中卵巢癌中CA199和CA125、子宫颈癌和子宫内膜癌中CEA肿瘤标志物蛋白芯片检测对筛查妇科肿瘤高危人群具有重要意义。
- 何宝贤陈姝刘芳蒋泓冯翠兰唐冬生
- 关键词：妇科肿瘤标志物蛋白芯片分子诊断
- 超级稻DAD1基因的cDNA克隆及其正反义表达载体的构建被引量：2
- 2006年
- 采用RT-PCR方法从超级稻幼苗中扩增DAD1基因的cDNA,并克隆测序,核酸序列表明该基因编码区为342bp,编码114个氨基酸残基.与GenBank发表的序列(XM_472334)相比,有3处碱基不同,分别为105bp处的C(GenBank的为T),148bp处的A(G),149bp处的C(T).将该基因分别正向和反向插入CaMV35S启动子后,构建了基因在植物中的正义、反义表达载体.
- 蒋泓周天鸿洪亚辉唐冬生萧浪涛
- 关键词：超级稻
- 奶牛rRNA基因的克隆及多位点基因打靶载体的构建
- 动物rRNA基因是一种GC含量高、结构复杂的重复序列。该研究经反复摸索后选用LA PCR法即LA PCR Taq酶结合Gc缓冲液来扩增奶牛复杂的rRNA基因重复序列，经测序鉴定最终克隆了奶牛的3个rRNA基因及其2个间隔...
- 蒋泓
- 关键词：基因打靶奶牛CRE/LOXP系统
- 文献传递
- 葡萄球菌耐药质粒转化大肠杆菌的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨葡萄球菌与大肠杆菌间耐药性传递的可能性。方法抽提金黄色葡萄球菌耐氯霉素质粒,转化至对氯霉素敏感的大肠杆菌体内,以氯霉素抑菌试验筛选获得耐药性的大肠杆菌,以琼脂糖凝胶电泳分析2菌耐氯霉素质粒的DNA分子大小。结果成功获得对氯霉素耐药的大肠杆菌,且可从其培养物提取出与耐氯霉素金黄色葡萄球菌相同大小的质粒DNA。结论葡萄球菌可能具有天然穿梭耐药质粒,在人工条件下可成功转化大肠杆菌使之获得耐药性。
- 李万可兰蒋泓黄永芬万学勤
- 关键词：葡萄球菌大肠杆菌耐药性质粒
- 碧冬茄花特异表达基因启动子PchsA的克隆与序列分析被引量：10
- 2003年
- 根据 Ingrid M.报道的碧冬茄花特异表达基因 CHSA启动子的序列设计并合成一对特异引物 ,以碧冬茄总DNA为模板 ,通过 PCR扩增出约 370 bp大小的 DNA片段 ,回收后克隆到 p U Cm- T质粒载体上 ,经转化、筛选确定重组子 ,酶切鉴定后送上海生工生物工程公司测序 ,得到片段长度为 370 bp.采用 DSgene分析软件进行序列分析发现其基本具有启动子的所有保守序列 ,TATA box,CCAAT box,Anther box,G- box,TACPy AT box,box1,box2 ,Capsite等 ,且经 Internet BL AST程序和 DSgene分析软件进行同源性对比和序列分析 ,显示序列与已报道序列同源性为 96 % .登陆 Gen Bank,ID号为 AY36 0 35 8.
- 洪亚辉蒋泓萧浪涛黄璜张文
- 关键词：基因克隆基因表达
- 基于BAC重组酶系统构建莱航鸡多位点基因打靶载体的研究被引量：4
- 2007年
- 以莱航鸡重复的rDNA基因间的间隔序列为靶位点,利用BAC重组酶系统构建含人干扰素基因的多位点基因打靶载体,为建立莱航鸡多位点基因打靶技术获得关键材料。首先构建BAC-TDN筛选载体,然后构建pYLVS-GID表达载体。将BAC-TDN筛选载体和pYLVS-GID表达载体共转化至大肠杆菌NS3529中,通过其Cre重组酶的作用形成BAC-TDN-VS-GID质粒,采用归位内切酶I-SceⅠ切除pYLVS质粒骨架,利用接头LS使之环化,构建成莱航鸡大容量多位点基因打靶载体BAC-TDN-GID。每次克隆均经酶切或PCR、测序等鉴定DNA片段的插入及插入方向。以该载体为材料的多位点基因打靶技术将提高基因定点整合效率,解决外源基因不能稳定表达、安全性等部分问题,突破了DNA重复序列不能作为外源基因整合靶位点的禁区。
- 唐冬生李芳蒋泓胡大林张细权李月琴周天鸿
- 关键词：基因打靶细菌人工染色体
