袁鸣
- 作品数：2 被引量：19H指数：1
- 供职机构：河南农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家高技术研究发展计划河南省农业科技成果转化项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 黄瓜cpSSR-PCR反应体系优化及应用被引量：1
- 2009年
- 叶绿体微卫星(chloroplast microsatellite,cpSSR)是近几年发展起来的新型高效分子标记,在植物系统发育和基因漂移研究中有广泛应用。在前期开发黄瓜cpSSR引物的研究基础上,本文研究了Taq酶量、MgCl2浓度、dNTPs浓度、模板DNA质量和浓度、循环次数等参数对cpSSR-PCR扩增效果的影响,获得优化的反应体系,即15μL体积包括:1×Taq酶缓冲液,0.5UTaq聚合酶,0.2μmol/L引物,0.2mmol/LdNTPs,1.5mmol/LMgCl2,约10ng模板DNA,循环25次。采用该优化体系,以已开发的黄瓜cpSSR引物,对12份黄瓜材料进行了重复性PCR扩增。结果发现国外种质中存在3种单倍型,而在国内种质中只检测到2种单倍型,说明在本研究所用的材料中,国外种质叶绿体遗传差异明显大于国内栽培种。此结果说明优化的cpSSR反应体系具有稳定性和可靠性。
- 胡建斌梁芳芳李建吾袁鸣董小结侯卫真
- 关键词：黄瓜CPSSR单倍型
- PAGE凝胶制备方法和银染方法的改进被引量：18
- 2009年
- PAGE凝胶分析技术已广泛运用于小分子量PCR产物的分离,但因操作环节多、耗时长,不利于大规模分子标记分析工作的开展。对PAGE凝胶的制备和银染方法作些改进,省去常规凝胶制备中亲和硅烷/剥离硅烷处理过程,以及常规银染过程中的固定和定影两步骤。与常规方法相比,该方法操作简便、耗时短、带谱的分辨率高,可代替常规方法用于SSR等标记的PCR产物的分离。
- 胡建斌李静袁鸣胡深李建吾
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶银染方法SSR标记
