许朝
- 作品数：14 被引量：20H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 尿路上皮癌抗原1基因沉默可抑制人胰腺癌细胞的体外迁移和侵袭被引量：4
- 2015年
- 目的 :检测尿路上皮癌抗原1(urothelial cancer associated 1,UCA1)在胰腺癌组织和细胞系中的表达情况,探讨靶向沉默UCA1基因表达对胰腺癌PANC-1细胞体外迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法 :应用实时荧光定量PCR法检测UCA1在胰腺癌组织及其癌旁组织和胰腺癌细胞系(PANC-1、SW1990、Bx PC-3和Capan-2)中的表达水平。分别构建插入针对UCA1基因的特异性sh RNA(UCA1-sh RNA)和阴性对照sh RNA(negative control-sh RNA,NC-sh RNA)的重组表达质粒,并将它们转染至胰腺癌PANC-1细胞中,随后采用实时荧光定量PCR法检测UCA1表达的变化。应用细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测沉默UCA1基因表达对PANC-1细胞体外迁移和侵袭能力的影响。蛋白质印迹法检测UCA1基因沉默对上皮-间质转化相关分子钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响。结果 :UCA1在胰腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.000 1),且UCA1在伴有转移的癌组织中表达水平高于无转移者(P=0.002)。4株胰腺癌细胞系中均能检测到UCA1 m RNA表达,其中PANC-1细胞中相对高表达(P<0.01)。UCA1-sh RNA转染PANC-1细胞后,UCA1的表达水平明显降低(P<0.01)。相较于NC-sh RNA转染组,UCA1-sh RNA转染后的PANC-1细胞体外迁移(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01)均明显降低。UCA1-sh RNA转染组细胞中vimentin表达水平明显下调(P<0.01),而E-cadherin表达水平则明显上调(P<0.01)。结论 :UCA1在胰腺癌中高表达,通过sh RNA转染靶向沉默该基因表达可明显抑制胰腺癌细胞的体外迁移和侵袭,其机制可能与UCA1调控上皮-间质转化有关。
- 许朝诸琦余跃张开光王巧民
- 关键词：胰腺肿瘤基因沉默肿瘤转移上皮-间质转化
- Stathmin在胰腺癌中的表达及意义被引量：1
- 2016年
- 目的探讨Stathmin在胰腺癌中的表达水平以及与临床、病理特征方面的关系。方法通过免疫组化法和原位杂交技术分别检测40例胰腺癌癌组织、27例胰腺癌旁正常组织中Stathmin及其mRNA的表达情况。结果 Stathmin在胰腺癌癌组织的阳性率显著高于胰腺癌旁正常组织(77.5%vs 7.4%),差异有统计学意义(P<0.05);Stathmin mRNA的表达阳性率也明显高于癌旁正常组织(80.0% vs7.4%),差异有统计学意义(P<0.05)。不同分化程度、有无淋巴结转移、有无远处转移以及TNM分期等方面胰腺癌组织之间的Stathmin表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Stathmin及其mRNA在胰腺癌组织的高水平表达,与胰腺癌的分化程度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期密切相关,提示Stathmin可能参与了胰腺癌发生、发展,Stathmin对胰腺癌的早期诊断及预后判断有重要意义。
- 黄敏余跃张旭丁飞高萌许朝胡闻
- 关键词：胰腺癌STATHMIN免疫组化原位杂交
- 尿路上皮癌抗原1基因调控胰腺癌细胞侵袭转移的研究
- 许朝
- EEF1A2基因慢病毒表达载体的构建及慢病毒表达系统的建立被引量：2
- 2013年
- 利用PCR方法合成EEF1A2的基因全长,经NotⅠ和NsiⅠ酶切后克隆到慢病毒载体pGLV5-EF1a-EGFP/Puro上。构建的重组质粒pGLV5/EEF1A2经PCR、酶切及测序鉴定正确后,利用慢病毒表达系统(pGLV5 Lentiviral Expression Systems),将重组质粒与包装系统质粒(pVSV-G,pGag/Pol,pRev)4质粒共转染293T细胞,收集培养上清并感染人胰腺癌SW1990细胞,经嘌呤霉素筛选出稳定过表达细胞株EEF1A2/SW1990。Real-time PCR和West-ern blot检测结果显示EEF1A2在EEF1A2/SW1990细胞中表达较原代细胞明显增高(P<0.05),MTT结果显示EEF1A2/SW1990细胞的增殖能力亦较原代细胞显著增强(P<0.05)。成功构建了EEF1A2基因的慢病毒载体质粒pGLV5-EEF1A2及其慢病毒表达系统,并筛选出稳定过表达EEF1A2的人胰腺癌细胞株EEF1A2/SW1990。
- 许朝胡端敏诸琦
- 关键词：慢病毒载体真核表达
- 同步化经皮电针联合深呼吸训练治疗对rGERD反流症状及心理状况的影响
- 余跃刘志韦瑞玲徐家琴许朝
- 长链非编码RNA在肿瘤发生发展中的作用及机制被引量：2
- 2012年
- 引言随着人类基因组计划的完成,令人惊讶的是,能够编码蛋白的基因仅两万多个,其在全基因组序列中的比重不足2%。然而基于全基因组瓦片芯片（whole—genometilingarray）及转录组测序的分析发现，基因组中至少90％的序列是活跃转录的，
- 许朝胡端敏诸琦
- 关键词：长链非编码RNA基因表达调控肿瘤发生
- 生长因子受体结合蛋白2在人类真核翻译延长因子1A2促进胰腺癌发生发展中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的明确生长因子受体结合蛋白2（GRB2）在人类真核翻译延长因子1A2（EEFIA2）促进胰腺癌发生发展中的作用。方法用腺病毒质粒Ad5／F35-EEFIA2转染胰腺癌细胞株SW-990（EEF-A2低表达），应用小干扰RNA（siRNA）技术下调胰腺癌细胞BxPC-3（EEF-A2高表达）中EEF-A2的表达水平，用RT—PCR及Western印迹方法检测SW-990和BxPC-3细胞株处理前后GRB2的表达。化学合成GRB2特异高效的siRNA干扰片段，干预胰腺癌细胞BxPC-3后通过MTT和Transwe--实验观察BxPC-3细胞增殖和运动能力的变化。统计学处理采用单因素方差分析。结果腺病毒Ad5／F35-EEF-A2转染人胰腺癌细胞株SW-990后，GRB2的mRNA和蛋白表达水平均明显升高（F-5．67和6．39，P均〈O．05）。EEF-A2-siRNA抑制BxPC-3胰腺癌细胞EEF-A2表达后，GRB2的mRNA和蛋白表达水平均明显下调（F-6．59和4．69，P均〈0．05）。BxPC-3在被转染siRNA—GRB2后，MTT结果显示72h时，siRNA-GRB2组吸光度值为1．22±0．14，与阴性对照组和空白对照组（1．42±0．15和1．39±0．15）相比，差异有统计学意义（F-6．63，P〈0．05）。Transwe--实验结果显示siRNA—GRB2组细胞侵袭能力减弱，24h后穿膜细胞数为（24．10±4．25）个，与阴性对照组[（54．72±5．24）个]及空白对照组E（51．26±6．23）个]相比，差异有统计学意义（F-55．00，P〈0．05）。结论GRB2是EEF-A2促进胰腺癌发生发展的关键分子。
- 胡端敏许朝诸琦
- 关键词：胰腺肿瘤转染
- 联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎内镜下的疗效观察
- 2018年
- 目的:观察美沙拉嗪口服与灌肠的联合应用治疗溃疡性结肠炎短期内黏膜愈合的疗效。方法:将84例溃疡性结肠炎患者随机分成实验组和对照组,实验组患者予以口服与灌肠的联合应用,对照组患者予以单一口服疗法,观察治疗2周后的内镜下黏膜愈合率及MAYO评分、不良反应的情况。结果:治疗2周后,整体分析发现:实验组黏膜愈合率(76.2%)高于对照组(50%),差异有统计学意义(P<0.05)。局部分析发现:实验组全结肠的黏膜愈合率优于对照组(P<0.05),且实验组对直乙状结肠的黏膜愈合率明显高于对照组(P<0.05)。治疗2周后实验组的MAYO评分(3.40±1.499)低于对照组(4.33±1.408),差异有统计学意义(P<0.05),且实验组不良反应发生率未见增加(P>0.05)。结论:美沙拉嗪的联合应用起效快,可在2周内快速愈合黏膜,建议对于中重度活动期溃疡性结肠炎,尤其是对直肠、左半结肠局部病变者提倡联合灌肠治疗2周。
- 杨宁吴正祥王巧民陈思苟雅雯许朝
- 关键词：美沙拉嗪溃疡性结肠炎
- PI3K/Akt信号通路抑制剂对胃癌细胞SGC7901中Skp2和NAG-1表达的影响及其效应被引量：6
- 2010年
- 目的研究PI3K/Akt信号转导通路靶向抑制剂LY294002对胃癌细胞SGC7901中S期激酶相关蛋白2(Skp2)和非甾体抗炎药诱导基因-1(NAG-1)表达的影响。方法将LY294002作用于胃癌细胞株SGC7901,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术AnnexinV2FITC/PI染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR检测NAG-1、Skp2 mRNA的表达情况,Western blot检测p-Akt(Ser473)和总Akt(t-Akt)的表达情况。结果LY294002可明显抑制SGC7901的生长,呈时间-剂量依赖性,并出现典型的细胞形态学改变;10、30、50μmol/L的LY294002作用12h后细胞凋亡率分别为(12.7±0.42)%、(36.5±0.45)%和(64.1±0.79)%,显著高于空白对照组的(2.3±0.36)%,差异均有统计学意义(P<0.01);LY294002可下调p-Akt的蛋白表达,而t-Akt的表达未发生改变;LY294002可上调NAG-1 mRNA的表达,并下调Skp2 mRNA的表达。结论阻断PI3K/Akt信号转导通路可改变胃癌细胞株SGC7901中Skp2和NAG-1的表达,并能明显抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与其抑制Akt磷酸化及调控NAG-1、Skp2 mRNA表达水平有关。
- 许朝姜藻
- 关键词：PI3K/AKTS期激酶相关蛋白2
- LY294002对胃癌细胞SGC7901增殖及相关调控因子的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:研究PI3K抑制剂LY294002对SGC7901胃癌细胞增殖凋亡及相关调控因子的影响。方法:MTT法测定细胞增殖,流式细胞术AnnexinV-FITC/PI染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR检测NAG-1、Skp2mRNA的表达情况。结果:LY294002可抑制SGC7901的生长,呈时间-剂量依赖性,细胞表现出形态学改变;经10、30、50μmo.lL-1的LY294002作用12h的凋亡率依次为(12.7±0.42)%、(36.5±0.45)%、(64.1±0.79)%,明显高于空白对照组的(2.3±0.36)%(均P<0.01);LY294002可上调NAG-1mRNA表达,下调Skp2mRNA表达。结论:LY294002可改变胃癌细胞株SGC7901Skp2和NAG-1基因的表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与其调控NAG-1、Skp2mRNA表达水平有关。
- 许朝姜藻
- 关键词：胃癌细胞PI3KSKP2NAG-1
