许炳雯
- 作品数:13 被引量:40H指数:4
- 供职机构:大连理工大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学化学工程环境科学与工程更多>>
- 基因工程菌BphAB<sub>LA-4</sub>转化吲哚行为的研究
- 微生物单加氧酶和双加氧酶对吲哚的羟基化反应可以生成一种重要的染料靛蓝。具备这类功能的细胞色素P450单加氧酶及萘双加氧酶已有了广泛且深入的研究。但同样具备吲哚转靛蓝能力的联苯双加氧酶却没有详细的研究。本论文对联苯双加氧酶...
- 许炳雯
- 关键词:吲哚靛蓝基因工程菌固定化两相体系
- 一种苯酚降解菌及其转化吲哚制备靛蓝的方法
- 本发明属于生物工程技术领域,涉及利用一种野生型苯酚降解菌转化吲哚制备靛蓝的方法。其特征在于,采用一种能有效催化吲哚合成靛蓝的苯酚降解微生物菌株,它是蒙氏假单胞菌QM(Pseudomonas monteilii QM),保...
- 曲媛媛马桥许炳雯张旭旺李新亮周豪孔春雷曹湘禹周集体沈娥
- 文献传递
- 基因工程菌BphAB_(LA-4)转化吲哚行为的研究
- 微生物单加氧酶和双加氧酶对吲哚的羟基化反应可以生成一种重要的染料靛蓝。具备这类功能的细胞色素P450单加氧酶及萘双加氧酶已有了广泛且深入的研究。但同样具备吲哚转靛蓝能力的联苯双加氧酶却没有详细的研究。本论文对联苯双加氧酶...
- 许炳雯
- 关键词:吲哚靛蓝基因工程菌固定化两相体系
- 文献传递
- 细菌芳烃外二醇双加氧酶研究进展被引量:2
- 2012年
- 外二醇双加氧酶(EDOs)是一种多功能细菌芳烃开环氧化酶,在环境保护、化工合成及生物技术等领域中有着巨大的应用潜力.本文综述了EDOs自开发以来的研究成果,包括分类学研究,酶的催化机制,在生物降解、生物合成、生物技术中的应用及其开发改造新技术.EDOs属于3个进化关系相互独立的酶家族,它们利用活性位点金属离子Fe/Mn(II)与底物和氧气结合,通过形成一种烷基过氧化中间产物,使芳香化合物开环断裂.利用这一催化机制,EDOs可以广泛地降解多种环境污染物,同时,某些EDOs还能够参与生物活性物质的合成,并且在生物传感器等生物技术中也有着广泛的应用.近年来,结合宏基因组、杂交酶等技术手段,研究人员开发改造出更多的EDOs资源,旨在为EDOs的深入研究提供更全面的信息.
- 许炳雯李诗阳张强曲媛媛马桥李新亮周集体张旭旺周豪
- 关键词:生物降解生物合成生物技术
- 活性污泥宏基因组Fosmid文库的构建被引量:3
- 2012年
- 大插入片段宏基因组文库的构建是开发大片段目的基因及分析其结构与功能的基础.文中分别采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、试剂盒及琼脂糖包埋法提取活性污泥宏基因组DNA,其中琼脂糖包埋法获得的DNA片段大于23kbp,利用此DNA成功构建了以pCC1FOS为载体的Fosmid文库,该文库含有5280个克隆,平均插入片段长度为35~40 kbp,共包含约200 Mbp的宏基因组DNA.从此文库中随机挑选200个克隆,利用活性筛选方法快速筛选到了1个含有淀粉酶的阳性克隆,表明活性污泥Fosmid文库可用于功能基因的活性筛选,具有开发新基因的潜力.
- 苟敏曲媛媛周集体许炳雯曹湘禹
- 关键词:活性污泥FOSMID文库活性筛选淀粉酶
- 源于活性污泥宏基因组的2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶基因的克隆、表达及纯化
- 自然界中99%的微生物无法通过传统纯培养方法获得,因此,利用非培养技术获取自然界中新型功能基因已成为近年来的研究热点。本研究从活性污泥宏基因组出发,采用直接PCR法扩增得到2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶基因(bphC...
- 许炳雯曲媛媛马放苟敏张旭旺
- 关键词:活性污泥宏基因组基因克隆
- 文献传递
- 一种苯酚降解菌及其转化吲哚制备靛蓝的方法
- 本发明属于生物工程技术领域,涉及利用一种野生型苯酚降解菌转化吲哚制备靛蓝的方法。其特征在于,采用一种能有效催化吲哚合成靛蓝的苯酚降解微生物菌株,它是蒙氏假单胞菌QM(Pseudomonas monteilii QM),保...
- 曲媛媛马桥许炳雯张旭旺李新亮周豪孔春雷曹湘禹周集体沈娥
- 文献传递
- 活性污泥宏基因组DNA提取方法优化被引量:4
- 2012年
- 宏基因组DNA的成功获取是宏基因组学技术顺利开展的关键.利用溶菌酶-SDS-蛋白酶K法(LSK法)提取活性污泥宏基因组DNA,结合单因素法与表面响应法对提取过程的4个关键步骤进行条件优化,即预处理、细胞裂解、蛋白去除及DNA沉淀过程.确定影响DNA产量的重要因素:预处理缓冲溶液与DNA沉淀剂类型、CTAB质量分数、溶菌酶浓度、37℃水浴时间及SDS质量分数.确定LSK法提取宏基因组DNA的最佳条件:TENC预处理活性污泥;1.5%CTAB;0.5mg/mL溶菌酶,37℃水浴1.4h;2%SDS,200μg/mL蛋白酶,55℃水浴2.5h;异丙醇沉淀DNA 40min.在最佳条件下,活性污泥宏基因组DNA的最大产量为每g污泥170μg.本研究可为环境样品中高质量宏基因组DNA的提取提供有价值的参考.
- 苟敏曲媛媛周集体曹湘禹许炳雯王腾
- 关键词:活性污泥
- 靛蓝的微生物合成研究新进展被引量:27
- 2012年
- 靛蓝是一种广泛应用于印染、医药等行业的有机色素,利用微生物法合成靛蓝已引起国内外学者的广泛关注.本文综述了微生物法合成靛蓝的研究进展及动态.靛蓝的微生物合成可归纳为3个阶段:野生型微生物催化合成、基因工程菌全细胞催化转化及代谢工程调控转化.多数芳烃降解菌及其编码酶均具备催化吲哚合成靛蓝的能力,采用定向进化、宏基因组技术以及两相体系等对已知酶资源进行深尺度研究,将为靛蓝生物合成过程注入新的活力.同时,靛蓝合成过程中产生的羟基吲哚及靛蓝衍生物是新型药物及化工中间体,也具有较大的研究价值.然而,由于靛蓝合成过程涉及的中间产物及副产物间转化关系及合成脉络仍不明晰,靛蓝产率低,因此将分子生物学及代谢工程手段融入到靛蓝合成机理及产业化应用的探索将成为该方向的研究重点.
- 马桥曲媛媛张旭旺许炳雯周集体
- 关键词:生物合成靛蓝吲哚加氧酶绿色化学
- 一种生物法多级定向转化邻甲酚的方法
- 本发明属于生物工程技术领域,涉及用生物法转化邻甲酚类化合物。其特征在于,第一级生物转化反应时,反应液中苯酚羟化酶基因工程菌PH <Sub>IND</Sub>全细胞干重为20~40g/L,邻甲酚浓度为50~700mg/L,...
- 曲媛媛时胜男张瑞杰马桥张旭旺周集体周豪许炳雯李新亮孔春雷
- 文献传递