许静
- 作品数：9 被引量：26H指数：3
- 供职机构：暨南大学第二临床医学院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Warthin瘤样甲状腺乳头状癌的临床病理特征分析被引量：1
- 2021年
- 目的研究Warthin瘤样甲状腺乳头状癌的临床病理特征。方法回顾2002年1月至2020年3月深圳市人民医院符合Warthin瘤样乳头状癌特征的17例患者资料,通过细针穿刺(FNA)、HE染色、免疫组织化学染色及BRAF V600E/RAS基因检测进行分析。结果17例中女14例(82%),男3例(18%),年龄26~57岁,肿瘤直径0.5~3.2 cm。大体呈边界清楚的灰白或灰褐囊性实性结节,瘤组织呈宽大的实性乳头,表面被覆嗜酸性双层细胞,呈靴钉样突起,可见经典甲状腺乳头状癌的核特征,富含淋巴细胞的间质,周围伴砂砾体结构,似经典Warthin瘤样结构。11例(65%)伴桥本甲状腺炎,6例(35%)被膜累犯,6例(35%)淋巴结转移。免疫组化示肿瘤上皮细胞特征性表达CK、TTF-1、CK19、Galcetin-3,偶有MC、P53、TG、CD56阳性。Ki-67约15%,乳头间质以CD3阳性T淋巴细胞为主,散在IgG4、CD138、CD38阳性的浆细胞。qRT-PCR检测均有BRAF V600E突变,无RAS基因突变。术后随访8~196个月,无复发及新的转移。结论WLPTC是甲状腺乳头状癌的一类特殊亚型,年轻女性好发,具有特征性Warthin瘤样嗜酸性上皮和丰富的淋巴细胞间质,预后较好,充分认识有利于提高甲状腺肿瘤在术中冰冻诊断中的准确率,利于指导临床治疗。
- 许静马磊樊漪波杜丹凤颜彬
- 关键词：甲状腺乳头状癌WARTHIN瘤
- 微小RNA-21反义寡核苷酸对宫颈鳞癌SiHa细胞株细胞生物学特性影响的体内外实验研究被引量：7
- 2012年
- 目的探讨体内外微小RNA．21（miR-21）反义寡核苷酸对宫颈鳞癌SiHa细胞株细胞生物学特性的影响。方法miR-21反义寡核苷酸（miR-21-ASO）通过脂质体转染宫颈鳞癌SiHa细胞，即时定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测miR-21表达情况，采用四甲基偶氮唑盐（MTr）比色法、集落形成实验、流式细胞术等方法探讨抑制miR．21表达对SiHa细胞形态及生物学特性改变的影响。应用免疫组织化学MaxVision法、TUNEL（TdT—mediateddUTPnickendlabeling）细胞凋亡检测试剂盒检测移植瘤细胞增殖活性和凋亡情况。结果miR-21在SiHa细胞株中呈显著高表达，miR-21-ASO可使SiHa细胞中miR-21表达量显著降低（P〈0．05）。MTT法检测结果显示，转染miR-21-ASO后SiHa细胞的生长受到明显抑制（P〈0．05）。阴性对照组的细胞集落形成率为98．3％±2．0％，miR-21抑制组则为55．6％±1．4％，miR-21抑制组的细胞集落形成率受到明显抑制（P〈0．05）。流式细胞术检测显示，阴性对照组和miR-21抑制组的SiHa细胞凋亡率分别为6．7％±1．3％和29．4％±1．7％，miR-21抑制组的细胞凋亡率明显增加（P〈0．05）。裸鼠皮下移植瘤成瘤率，miR-21抑制组与阴性对照组的成瘤比例分别为3／8和6／8（P〈0．05）。裸鼠瘤体的Ki-67阳性指数，miR-21抑制组（42％）比阴性对照组（90％）显著下降。荧光TUNEL凋亡检测显示，miR．21抑制组裸鼠肿瘤细胞凋亡明显增多（P〈0．05）。结论miR-21-ASO可有效抑制宫颈鳞癌SiHa细胞中miR-21表达，影响癌细胞增殖活性，促进癌细胞凋亡，体内抑制SiHa细胞裸鼠移植瘤生长促进其凋亡。
- 王晓玫许静成志强彭全洲胡锦涛高利昆张石芬金红涛
- 关键词：微RNAS寡核苷酸类反义
- 人pEGFP-C2-PRDX3真核表达载体构建与在人髓母细胞瘤DAOY细胞中表达
- 2012年
- 目的构建人pEGFP-C2-PRDX3真核表达载体,并检测其在人髓母细胞瘤DAOY细胞中的表达。方法从人髓母细胞瘤DAOY细胞中提取总RNA,采用RT-PCR法对编码PRDX3的基因片段进行扩增,应用基因重组技术,将目的片段亚克隆到pEGFP-C2真核表达载体,经PCR、酶切和测序鉴定后,用脂质体法将重组质粒转染入DAOY细胞,分别采用RT-PCR法、West-ern blot法检测PRDX3在DAOY细胞中的表达。结果双酶切及测序结果验证PRDX3片段正确插入pEGFP-C2质粒,转染后的PRDX3基因mRNA及蛋白质水平均明显上调。结论成功构建了具有报告基因-增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的真核表达载体pEGFP-C2-PRDX3,为进一步研究PRDX3基因在人髓母细胞瘤中的生物学功能奠定了基础。
- 王晓玫金红涛成志强彭全洲胡锦涛高利昆许静张石芬曾照成刘汉勇
- 关键词：真核表达载体
- 反义miR-21抑制宫颈鳞状细胞癌CaSki细胞系生长体外研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨敲低miR-21表达对宫颈鳞状细胞癌细胞系CaSki增殖活性与凋亡的影响。方法实时荧光定量RT-PCR法检测正常宫颈组织、CaSki细胞转染前后miR-21的表达水平,采用MTT法、流式细胞术等技术检测转染后CaSki细胞增殖活性与凋亡的变化。结果 miR-21在CaSki细胞中表达水平为正常宫颈组织的3.25倍。CaSki细胞中转染反义miR-21(AS-miR-21)可显著抑制其表达。转染后24h、48h、72h、96h,MTT检测提示10nmol与20nmolAS-miR-21转染组中细胞增殖率较对照组明显降低(P<0.05),自48h抑制作用显现,且随着转染浓度增加,抑制作用增强,呈现剂量依赖性。细胞周期检测结果显示AS-miR-21转染组的G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少(P<0.05)。AnnexinⅤ联合PI技术检测细胞凋亡,结果显示AS-miR-21转染组早期凋亡细胞率[(23.40±2.16)%]明显高于空白对照组[(5.1±2.16)%]、阴性对照组[(6.87±0.55)%](P=0.000)。结论 AS-miR-21转染可敲低CaSki细胞中miR-21表达,并有效抑制细胞增殖活性,促进细胞凋亡。
- 王晓玫张石芬高利昆成志强彭全洲胡锦涛许静金洪涛
- 关键词：微RNASCASKI细胞
- 反义miR-21对荷人宫颈鳞癌裸鼠移植瘤生长和凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 目的构建荷人宫颈鳞癌裸鼠移植瘤模型,探讨干扰miR-21表达对移植瘤生长、凋亡的影响。方法将人工合成的反义寡核苷酸ASODN(AS-miR-21)转染SiHa细胞(抑制组),同时设阴性对照组和空白对照组,对数生长期的SiHa细胞分别接种于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长率。当肿瘤体积达0.2 cm3时采用AS-miR-21多点瘤周注射,观察其对移植瘤的影响。应用免疫组化技术、荧光TUNEL检测移植瘤细胞增殖活性和凋亡情况。结果 (1)成功构建人宫颈鳞癌裸鼠皮下移植瘤模型,抑制组、阴性对照组及空白对照组成瘤率分别为37.5%、75.0%、100.0%,瘤体平均体积为(732.80±56.32)mm3、(1228.46±78.53)mm3、(1301.26±80.63)mm3,平均生长率为18.32%、30.71%和32.53%,瘤重为(0.73±0.05)g、(1.26±0.12)g和(1.35±0.25)g,抑制组与阴性、空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);(2)免疫组化显示抑制组裸鼠瘤体Ki67表达显著下降;荧光TUNEL凋亡检测显示抑制组裸鼠肿瘤细胞凋亡率明显增多;(3)注射治疗剂量AS-miR-21两周后观察肿瘤组织局部坏死严重,胞核裂解、消失,凋亡明显增加。结论 AS-miR-21可下调裸鼠人宫颈鳞癌移植瘤中miR-21的表达,抑制移植瘤生长和促进其凋亡。
- 王晓玫许静成志强彭全洲胡锦涛高利昆张石芬
- 关键词：微RNASSIHA细胞裸鼠
- 右美托咪定滴鼻联合舒芬太尼在儿童肿瘤放射治疗中的应用研究被引量：8
- 2020年
- 目的:比较右美托咪定滴鼻联合舒芬太尼和单独使用水合氯醛在儿童肿瘤放射治疗过程中的疗效。方法:选取2018年11月至2019年9月深圳市人民医院行肿瘤放疗的48例患儿作为研究对象,随机分组为接受右美托咪定滴鼻联合舒芬太尼组(DS组)和口服水合氯醛组(C组)。观察比较两组镇静起效时间、苏醒时间和放射治疗时间,以及镇静前后平均动脉血压(MAP)、心率(HR)和血氧饱和度(SpO2)的变化情况,并统计两组不良反应发生情况。结果:研究纳入48例患儿,其中DS组24例和C组23例纳入最终分析。与C组相比,DS组患儿恢复时间更短,MAP、HR和不良反应发生率更低。两组患儿用药起效时间、治疗时间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:右美托咪定滴鼻联合舒芬太尼能安全地应用于儿童肿瘤放射治疗并缩短恢复时间。
- 马磊胡安民单智铭戴中亮许静
- 关键词：舒芬太尼儿童
- 上调microRNA-383对人髓母细胞瘤D341细胞系中PRDX3表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的探讨microRNA-383(miR-383)对人髓母细胞瘤D341细胞系中PRDX3基因的表达及细胞增殖活性与凋亡等细胞功能学的影响。方法应用实时荧光定量PCR法检测人髓母细胞瘤D341细胞系、正常脑组织中miR-383及PRDX3 mRNA表达水平;采用Western blot法检测人髓母细胞瘤D341细胞系、正常脑组织中PRDX3基因、蛋白表达水平;人工合成miR-383模拟体(mimics)转染MBD341细胞系,采用cck-8法、流式细胞术等实验方法检测转染人髓母细胞瘤D341细胞系后各组D341细胞增殖与凋亡、细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平的变化。结果人髓母细胞瘤BD341细胞系中miR-383表达水平为正常脑组织的0.524倍,明显下调。而PRDX3基因mRNA表达水平为正常脑组织的5.214倍,蛋白表达水平较正常脑组织明显上调。miR-383 mimics转染D341细胞系24、48 h,实验组miR-383表达水平均明显高于空白对照组,且48 h作用更加明显;而PRDX3基因mRNA、蛋白表达水平48 h较空白对照组降低。cck-8法检测提示实验组中细胞增殖率降低(P<0.05)。An-nexinV-FITC法检测转染后24、48 h细胞凋亡结果显示miR-383 mimics实验组细胞早期凋亡率明显增高,且24 h作用较明显(P=0.000)。细胞内活性氧水平和线粒体膜电位水平检测结果分别显示,转染后24、48 h实验组较对照组细胞内活性氧水平明显升高,而线粒体膜电位水平较对照组明显降低。结论与正常脑组织相比,miR-383在人髓母细胞瘤D341细胞系中表达降低,PRDX3基因表达升高。上调miR-383可敲低D341细胞系中PRDX3基因表达,并可抑制D341细胞增殖活性,促进D341细胞凋亡,出现D341细胞内活性氧水平升高、线粒体膜电位水平降低的细胞功能学变化。
- 王晓玫张石芬成志强彭全洲胡锦涛高利昆许静金红涛
- 关键词：髓母细胞瘤细胞功能
- 利用CRISPR/Cas9技术进行lncRNA snhg17-KO基因敲除小鼠模型的构建与鉴定
- 2021年
- 目的:构建lncRNA snhg17-KO基因敲除小鼠模型,为探讨snhg17在肿瘤发生中的作用机制及体内实验研究提供更特异可靠的动物模型。方法:确定snhg17-KO基因敲除小鼠特异性靶标sgRNA1、sgRNA2,引导与核酸酶Cas9结合进行RNA的体外转录,将有活性的sgRNA和Cas9RNA通过C57BL/6小鼠受精卵的显微注射方式,获取snhg17基因敲除的纯合子小鼠。运用聚合酶链反应(PCR)和基因测序方法,针对获得的子代小鼠,进行基因型的鉴定。结果:lncRNA snhg17-KO基因敲除小鼠模型构建成功。结论:本研究采用CRISPR/Cas9技术首次构建出snhg17基因敲除小鼠的动物模型,为探讨snhg17在肿瘤发生、发展中的作用提供更为便捷、可靠的动物模型及研究平台。
- 许静高琳洪马林赵盼
- 关键词：基因敲除
