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谢俊仁: 作品数：110 被引量：136H指数：8; 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>; 发文基金：甘肃省自然科学基金国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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驽巴贝虫病间接ELISA检测方法的建立被引量：8: 2010年; 目的克隆表达驽巴贝虫诊断抗原基因BC48,建立间接ELISA诊断方法。方法从感染驽巴贝虫的毛驴血液中提取虫体基因组DNA,利用PCR技术扩增BC48基因,将其克隆入表达载体pET-28a,转化大肠埃希菌感受态细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用镍柱亲和层析法纯化蛋白。以该蛋白作为诊断抗原建立间接ELISA诊断方法 ,对反应条件进行优化,并对该方法的特异性和敏感性进行评价。结果扩增获得1272bp的BC48基因片段。重组表达质粒pET-28a-BC48诱导后获得大小约为Mr46000的可溶性融合蛋白,纯化后蛋白浓度为12.98mg/ml。间接ELISA方法条件优化的结果显示,最佳抗原包被浓度为65μg/ml,最适血清稀释度为1∶80,该融合蛋白可特异性地与驽巴贝虫感染血清结合,而不与马泰勒虫感染血清及阴性血清反应。使用该方法与镜检法检测17份散养毛驴血清样品,阳性检出率分别为3/17和2/17。结论以BC48重组蛋白为抗原建立的间接ELISA方法可用于马属动物驽巴贝虫病的检测。; 龚真莉刘光远谢俊仁柴慧萍张丽艳李知新田占成王路刘建刚; 关键词：纯化 ELISA

Bantam在长角血蜱不同变态发育时期表达谱及代谢通路分析: 为进一步研究Bantam与长角血蜱生长发育间的关系奠定基础.本研究参考miRBase数据库中Bantam(登录号：MI0012259)序列,设计特异性引物,RT：PCR方法获得Bantam序列并进行生物信息学分析.利用q...; 罗金刘光远谢俊仁田占成袁晓松王芳芳郭锦霞王素艳; 关键词：变态发育 MICRORNA 表达谱

关注动物亚健康被引量：3: 2009年; 近年来集约化和规模化养殖逐渐取代了分散的农户养殖模式,人工饲养的畜禽大多都是经过长期的选择性育种,生产性能虽然大幅提高,但造成畜群遗传背景趋于一致,品种相对单一,体质普遍比较敏感,对疫病的抵抗力(免疫力)下降,对环境的耐受力(抗逆性)降低等种种动物亚健康问题。又加之营养成分的改变、基础设施不配套、饲养密度过大、疫苗免疫程序不当、药物使用不合理、生活环境极端恶化、饲养管理方式不科学等一系列外在诱因的存在,动物亚健康状态更为严重,直接危害畜禽养殖业。中国农业科学院兰州兽医研究所谢俊仁在《关注动物亚健康》一文中详细阐述了这一问题,并介绍了其预防和治疗措施。; 谢俊仁; 关键词：亚健康动物生理功能临床症状

长角血蜱MESK基因的克隆及其生物学特性分析: 2013年; 为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析;构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了表达。48h后对细胞进行裂解,用兔抗长角血蜱阳性血清与表达出的重组蛋白进行反应,以检测重组蛋白的免疫活性。结果显示,MESK基因全长为1 426bp,包括1个1 185bp的开放阅读框。该基因含有5个N-糖基化位点、5个豆蔻酰化位点、9个酪氨酸蛋白Ⅱ激酶磷酸化位点、1个酪氨酸蛋白激酶位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、1个蛋白磷酸激酶C磷酸化位点。SDS-PAGE分析及Western-blot分析表明,表达出的重组蛋白的分子质量约为71ku,且以与兔抗长角血蜱阳性血清反应,免疫原性良好。结果表明,MESK基因可以作为一种重要的分子标记参与蜱分类的研究,在作为候选抗蜱疫苗的研究中具有重要的开发价值。; 赵波刘光远罗金张萍田占成谢俊仁田美媛王芳芳袁小松; 关键词：长角血蜱生物信息学克隆真核表达

微小扇头蜱不同发育阶段miRNA的动态分析: 尽管一些microRNA表达谱的研究已经在长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)唾液腺以及微小扇头蜱(Rhipisephalus(Boophilus) microplus)美国株中得到了一定的研究...; 罗金刘光远谢俊仁田占成袁晓松王芳芳郭锦霞王素艳; 关键词：MICRORNA 高通量测序发育阶段

羊巴贝斯虫对常见抗寄生虫化学药物的药敏试验研究: 目的:梨形虫病是一种虫媒病,广泛存在于热带和亚热带国家,属于自然疫源性疾病,给畜牧业造成严重的经济损失,目前尚无特效疗法,只能使用化学药物进行预防和治疗,其病原包括巴贝斯虫和泰勒虫两大类。由于常用的抗寄生虫药物对原虫病的...; 谢俊仁马米玲关贵全刘爱红刘军龙李有全罗建勋殷宏; 关键词：抗寄生虫药; 文献传递

长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA文库的构建及免疫学筛选: 长角血蜱（Haemaphysalis longicornis）及其传播的疾病严重威胁着我国畜牧业的发展。现在,对蜱的控制方法主要是化学药物应用,但随着蜱耐药性的产生以及环境污染和药物残留等严重公共卫生问题的出现迫使人们寻...; 谢俊仁; 关键词：长角血蜱 CDNA文库免疫学筛选; 文献传递

警惕:寄生虫侵染可给病毒的感染打开了门户,综合防治才是根本: 2009年; 疫病是畜牧养殖业承担的最大的风险之一,规模化的企业和养殖户对动物传染病的预防一般都比较重视,但是在一些养殖场常出现动物感染寄生虫的现象,若不引起足够的重视,不但降低饲料转化率,严重威胁公共卫生安全,还会给预防传染病带来安全隐患,造成巨大的经济损失,动物疫病的发生是动物与病原（包括细菌、病毒和寄生虫）相互斗争的过程,当动物抵抗力相对较强时,; 谢俊仁; 关键词：动物感染寄生虫动物传染病门户侵染公共卫生安全

马泰勒虫EMA1基因的克隆与生物学特性分析被引量：11: 2012年; 根据GenBank上登录的马泰勒虫美国株(AB043618)裂殖子表面蛋白抗原1(EMA1)基因,设计了2对引物,采用PCR技术首次扩增出我国马泰勒虫肇源株EMA1基因。将该基因克隆到pMD19-T载体后,进行序列测定及分析。将鉴定为阳性的克隆重组到原核表达载体pET-30a后进行表达,并纯化表达的重组蛋白,进行Western-blotting试验,以鉴定其生物学活性。结果,EMA1基因长819bp,编码272个氨基酸,将该基因编码蛋白的氨基酸序列与GenBank中登录的11种已知梨形虫的相应氨基酸序列进行比较分析,马泰勒虫肇源分离株与已报道的马泰勒虫(马巴贝斯虫)亲缘关系最近,其次是环形泰勒虫和斑羚泰勒虫,而与东方泰勒虫、瑟氏泰勒虫的亲缘关系较远。表达的重组蛋白是分子质量约为38ku的融合蛋白,且表达产物能被马泰勒虫标准阳性血清识别。结果表明,马泰勒虫EMA1作为一种良好的抗原分子,在虫株的分类学研究、流行病学调查以及候选疫苗的研制中有着重要的意义。; 罗金刘光远田占成谢俊仁沈辉田美媛; 关键词：克隆系统发育