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实现人源FGF-21高效可溶性表达的两种策略被引量：4: 2012年; 采用分子伴侣协助蛋白表达的方法及乳糖自诱导的策略,实现人源FGF-21在大肠杆菌中的高效可溶性表达.结果显示,在分子伴侣Tig的协同表达下,融合蛋白TrxA-FGF-21可溶性达到92.4%.采用乳糖自诱导策略,融合蛋白TrxA-FGF-21表达量达到17.4%左右,菌体OD600达到12.4,可溶性TrxA-FGF-21相对产量是IPTG诱导发酵条件的5.5倍.该方法制备的重组FGF-21在C57BL/6小鼠体内具有降低血糖的生物学活性,甘油三酯水平与对照组相比也表现极显著差异(P<0.01).; 李娟刘雯肖磊劳勋赵丽芬黄静吴自荣; 关键词：分子伴侣

重组人GIP衍生物的克隆、表达、纯化及活性研究被引量：2: 2010年; 葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽(glucose-dependent insulinotropic polypeptide,GIP)具有促胰岛素分泌的作用,但因体内半衰期短而限制了其应用。对二肽酶4(dipeptidase IV,DPP IV)识别位点等氨基酸进行改造可有效延长其半衰期。通过人工合成基因或PCR定点突变的方法合成GIP不同突变体基因,将其克隆到大肠杆菌表达载体pET32a(+)中进行诱导表达,通过亲和层析,纯化获得各对应的多肽。经肠激酶酶切后,分别在昆明鼠及糖尿病模型鼠体内研究其生物活性。结果显示突变体mGIP243在昆明鼠体内具有显著的降血糖活性,当给药剂量为48nmol/kg时,其体内降血糖活性可延长至90分钟,相对于将第二位上的丙氨酸突变成丝氨酸的mGIP2和天然GIP半衰期显著延长。GIP类似物mGIP243在2型糖尿病模型鼠中也有降血糖活性,使其可能成为治疗糖尿病的候选药物。; 宋文程金明飞李冬青赵丽芬张洪丹黄静吴自荣; 关键词：原核表达血糖

一种GLP-1衍生物DLG3312及其固相化学合成方法: 本发明属于生物、化学工程技术领域，公开了一种GLP-1衍生物DLG3312，包括其互变异构体、溶剂化物和药物学可接受盐，其结构为X-Y-X；其中，X表示的序列为H-X8-EGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLV...; 劳勋吴自荣黄静赵丽芬李娟赵云耿旭汪正华; 文献传递

tGLP-1衍生物及其制备和应用: 本发明提供一种人GLP-1衍生物，即tGLP-1衍生物，所述衍生物的分子结构式为tGLP-1(7-38)，Seq ID NO.2；其中，Xaa2是Ser；Xaa20是Gln；Xaa28是Asp；Xaa30是Thr，Asp...; 李冬青赵丽芬宋文程王小溪金明飞黄静吴自荣; 文献传递

高效表达重组人胰高血糖素样肽-1(1-37)的基因工程菌及其构建方法和应用: 本发明公开了一种高效表达重组人胰高血糖素样肽-1（1-37）的基因工程菌，该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重组质粒是含人胰高血糖素样肽-1（1-37）的质粒pET32a(+)。本发...; 赵丽芬吴自荣黄静李冬青劳勋; 文献传递

垂体腺苷酸环化酶激活多肽38及其衍生物的表达、纯化和活性: 2011年; 目的提高垂体腺苷酸环化酶激活多肽38(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide 38,PACAP38)的体内稳定性、延长其生物学活性。方法对PACAP38的氨基酸序列进行改造(命名为PACAP38衍生物cPACAP38),并根据大肠杆菌密码偏爱性设计并合成PACAP38及其衍生物的基因片段;分别将两基因片段克隆至表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;表达的融合蛋白经镍离子亲和层析纯化,肠激酶切割获得目的多肽;通过小鼠饮食抑制试验比较两多肽的体内活性;长期给药观察小鼠腹腔糖耐量及小鼠血清甘油三酯、HDL、LDL和胆固醇的变化。结果两种融合蛋白Trx-PACAP38和Trx-cPACAP38的表达量分别占菌体总蛋白的22%和25%,为可溶性表达,纯化后纯度分别为90%和98%;PACAP38及cPACAP38均有抑制小鼠饮食的作用,cPACAP-38的效果优于PACAP38;连续给药10 d后,小鼠腹腔糖耐量、血清甘油三酯、HDL、LDL、胆固醇均无明显变化。结论已成功获得体内活性更稳定的PACAP38衍生物,为PACAP38的基础研究及应用奠定了基础。; 张洪丹肖磊赵丽芬王小溪黄静吴自荣; 关键词：垂体腺苷酸环化酶激活多肽长期给药葡糖耐量试验

胰高血糖素样肽-1（1-37）生物学活性及几丁质-PGA包裹tGLP-1作为口服药物的研究: 胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是由胰高血糖素原基因翻译加工后产生,主要是由末端空肠、回肠和结肠的L细胞所分泌。GLP-1可以刺激胰岛素的分泌,促进胰岛β-cell的增值、胰岛的再生,抑制β-cell的凋亡,并且能够抑制...; 赵丽芬; 关键词：口服

一种GLP-1衍生物DLG3312及其固相化学合成方法: 本发明属于生物、化学工程技术领域，公开了一种GLP-1衍生物DLG3312，包括其互变异构体、溶剂化物和药物学可接受盐，其结构为X-Y-X；其中，X表示的序列为H-X8-EGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLV...; 劳勋吴自荣黄静赵丽芬李娟赵云耿旭汪正华; 文献传递

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赵丽芬