郎景民
- 作品数:10 被引量:43H指数:5
- 供职机构:内蒙古民族大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:黑龙江省农业科学院博士后基金中国博士后科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 牛乳腺炎无乳链球菌内蒙古分离株SIP基因抗原表位的高效表达及其免疫活性鉴定
- 本研究根据GenBank中已公布的牛源无乳链球菌SIP基因序列抗原表位序列设计1对引物,以无乳链球菌分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增出SIP抗原表位序列。对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及免疫活性鉴定。结果显示克...
- 郎景民布日额刘娣吴金花锡林高娃刘燕
- 关键词:无乳链球菌原核表达免疫活性
- 文献传递
- 一例鹅大肠杆菌病的诊断被引量:5
- 2009年
- 鹅大肠杆菌病(Goose E.coli disease,GED)是由鹅致病性大肠埃希氏杆菌所引起的一种细菌性疾病。随着我国集约化养禽业的发展,禽大肠杆菌病在各地发生日趋严重,感染率达5%-30%,病死率几乎高达90%以上,正在成为危害养鹅业的主要疫病之一,多以并发病或继发病的形式出现陉圳,危害极大,给养禽业带来巨大的经济损失。常见感染途径是经带菌卵、呼吸道和消化道传染,以排泄物污染的饮水造成感染发病尤为严重。本文对一起鹅大肠杆菌病进行了诊断,现报告如下:
- 张婷布日额吴金花郎景民
- 关键词:禽大肠杆菌病养鹅业大肠埃希氏杆菌E.COLI细菌性疾病
- 奶牛乳房炎生物制剂研究进展被引量:12
- 2009年
- 奶牛乳房炎(Mastitis)是奶牛最常见、最难防治、花费最多的疾病之一.奶牛乳房炎不仅给奶牛业带来极大的经济损失、制约奶牛业发展,还严重影响奶的品质和卫生,从而危及人的健康.目前控制奶牛乳房炎仍以传统的抗生素法治疗为主,但是所带来的耐药菌的产生及药残等成了更为严重的问题.而利用生物制剂防治奶牛乳房炎则具有无药残、不产生耐药、安全绿色的特点,因此愈来愈受人们的关注.本文就奶牛乳房炎生物制剂研究的最新进展进行综述.
- 郎景民布日额张婷刘丽姬守德
- 关键词:奶牛乳房炎生物制剂
- 牛源无乳链球菌sip蛋白抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立被引量:6
- 2011年
- 为测定牛源无乳链球菌表面免疫相关蛋白(sip)的抗原性,本实验通过建立间接ELISA方法,对该蛋白的抗原性进行分析及鉴定。根据无乳链球菌sip基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位优势区编码的基因序列,并将其与原核表达载体pET-30a(+)连接,构建重组质粒pET-sip,转化宿主菌BL21中,经IPTG诱导,获得重组蛋白,western blot分析表明,重组蛋白具有良好的抗原性。以纯化的表达产物作为包被抗原,建立检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.125μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,酶标二抗最适稀释度为1∶4 000。应用该方法对无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌兔阳性血清进行检测,结果表明,该方法具有良好的特异性和灵敏度。
- 郎景民布日额孙立杰刘娣吴金花锡林高娃刘燕史芬芳
- 关键词:无乳链球菌原核表达间接ELISA
- 牛源无乳链球菌sip基因编码抗原表位序列的原核表达及其初步应用研究
- 目的:构建无乳链球菌sip基因编码抗原表位序列的原核表达载体,在大肠杆菌中表达,并对其表达蛋白的免疫学活性及其应用进行研究。
方法:提取无乳链球菌临床分离菌株基因组DNA,根据GenBank公布的无乳链球菌sip基...
- 郎景民
- 关键词:原核表达间接ELISA免疫学活性
- 文献传递
- 高致病性PRRSV ORF6和ORF7基因的遗传变异分析被引量:1
- 2009年
- 从GenBank中选取8株国内报道的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒株,应用DNAStar软件对其ORF6、ORF7基因序列进行分析,与VR-2332株、LV株、国内及周边国家分离株进行核苷酸和推导氨基酸同源性比较,并绘制系统进化树.结果表明,高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒株的ORF6、ORF7核苷酸与VR-2332株的同源性为95.1%-95.4%、93.8%-94.1%,与欧洲型(LV)的同源性为69.4%-69.6%、67.9%-68.5%;ORF6、ORF7推导氨基酸与VR-2332株的同源性为97.7%、94.4%-95.2%,与欧洲型(LV)的同源性为80.0%-80.6%、65.3%-66.1%.系统进化树表明,8株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒株仍属于美洲型.说明猪繁殖与呼吸综合征病毒不断变异的现今,ORF6和ORF7基因依然高度保守.
- 张婷布日额张永富赵景海郎景民
- 关键词:高致病性ORF6ORF7
- 奶牛无乳链球菌内蒙古分离株SIP基因的克隆与序列分析被引量:2
- 2009年
- 试验根据GenBank公布的牛源无乳链球菌SIP基因序列设计并合成1对引物,通过PCR扩增获得SIP基因部分扩增产物。序列分析结果表明:SIP基因扩增产物大小为945 bp,编码315个氨基酸残基。标准菌株(+株)与内蒙古分离株(M株)的基因及氨基酸同源性为100%,这2个菌株与Gen-Bank上公布的B群无乳链球菌菌株(DQ914274)SIP基因及氨基酸同源性达到98.94%及99.68%。
- 布日额郎景民刘娣华育平吴金花
- 关键词:克隆
- 牛乳中无乳链球菌PCR快速检测方法的建立被引量:3
- 2009年
- 布日额郎景民华育平刘娣吴金花
- 关键词:无乳链球菌PCR方法牛乳相关蛋白蛋白基因RRNA
- 牛乳腺炎无乳链球菌内蒙古分离株sip基因抗原表位序列的高效表达及其抗原性鉴定被引量:7
- 2010年
- 目的本实验的目标是克隆、高效表达牛源无乳链球菌的sip基因抗原优势区序列,并进行其抗原性鉴定。方法根据GenBank中已公布的牛源无乳链球菌sip基因序列抗原表位序列设计1对引物,以无乳链球菌分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位序列,并进行克隆、测序、转化、表达及抗原性鉴定。结果克隆的sip基因抗原表位序列为897 bp,编码299个氨基酸,与GenBank中公布的牛无乳链球菌sip基因(AF151361)比对后,其相似性为99.8%,氨基酸相似性为99.7%;经高效表达后其可溶性表达率48.7%。重组蛋白的分子质量单位为40.3 ku。经纯化得到纯度在90%以上的SIP蛋白,Western blot显示重组蛋白能被抗无乳链球菌血清识别。结论本研究成功构建了rSIP-pET30(a)重组质粒,并高效表达SIP,且该重组蛋白具有抗原性,为建立奶牛隐性乳腺炎抗体监测方法与乳中无乳链球菌的检测方法奠定了基础。
- 郎景民布日额吴金花王学理锡林高娃刘燕
- 关键词:无乳链球菌原核表达抗原性
- 牛乳中无乳链球菌PCR快速检测方法的建立被引量:8
- 2009年
- 根据GenBank公布的的SIP基因序列,设计一对特异性引物,通过对PCR方法的优化,建立了牛无乳链球菌性乳房炎的快速PCR检测方法。用建立的PCR检测方法对患牛乳中无乳链球菌总DNA进行扩增,获得大小为945bp的DNA片段。特异性试验表明,停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌DNA均未扩出条带;敏感性试验表明,该对引物能够检测到的最低DNA浓度为1.25ng;重复试验表明该方法具有良好的重复性和稳定性。
- 布日额郎景民华育平刘娣吴金花
- 关键词:奶牛乳房炎无乳链球菌PCR