郭富平
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
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- TGF-β1shRNA对高转移性人涎腺粘液表皮样癌生物学行为的影响
- 目的:建立TGF-β1 shRNA稳定转染涎腺粘液表皮样癌细胞株,观察转染质粒对高转移性人涎腺粘液表皮样癌生物学行为的影响。方法:将TGF-β 1 shRNA转染人涎腺粘液表皮样癌Ms 细胞后,以G418（600 mg／...
- 王静吴军正魏红宇付善民郭富平温德升
- 关键词：转化生长因子-Β1SHRNA涎腺粘液表皮样癌
- 文献传递
- 人涎腺上皮细胞体外培养及其生物学特性的初步研究被引量：4
- 2005年
- 目的建立体外培养人涎腺上皮细胞的方法,观察其体外生长的生物学特性。方法应用组织块培养法,用无血清培养基(SFM),无血清1∶1DMEM/F12以及含25ml/L胎牛血清的1∶1DMEM/F123种不同的培养基对10例人涎腺标本进行体外原代和传代培养。用倒置显微镜观察培养细胞体外生长的形态特征。用细胞计数法观察细胞生长情况。用HE染色、PAS染色、细胞角蛋白、Vimentin免疫组化染色对培养细胞进行形态学检查和鉴定。结果10例人涎腺标本在体外原代培养均有细胞长出,培养的细胞为上皮样。用SFM培养的细胞增殖较旺盛,可传代培养5次,用其它2种培养基培养的细胞仅可传代1次。细胞角蛋白染色阳性,Vi-mentin染色阴性,PAS染色阳性。结论应用组织块培养的方法可以获得原代和传代培养的人涎腺上皮细胞,SFM较1∶1DMEM/F12更适宜涎腺上皮细胞生长。
- 王静吴军正郭富平董纪军魏红宇
- 关键词：涎腺组织学技术细胞培养
- TGF-β1 shRNA对人涎腺粘液表皮样癌Ms细胞增殖的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:用TGF-β1shRNA稳定转染涎腺粘液表皮样癌Ms细胞,观察shRNA的基因沉默效应及其对细胞增殖的影响。方法:用Liperfetamine2000将TGF-β1shRNA转染Ms细胞,以G418(600mg/L)筛选21d,挑出单克隆获得稳定转染细胞系。RT-PCR法和免疫组化方法检测细胞中TGF-β1mRNA和蛋白的表达。利用MTT、软琼脂克隆形成实验、流式细胞仪、透射电镜等检测转染前后Ms细胞的增殖和形态特点,以空载体转染和未转染细胞为对照。结果:获得稳定转染TGF-β1shRNA的细胞系。TGF-β1shRNA阻断了Ms细胞中TGF-β1mRNA和蛋白的表达。未转染组,转染空载体组和转染shRNA组,细胞倍增时间分别为39.3h,40.1h和45.3h,Gl期细胞所占比例分别为54.2%,56.8%和61.7%,增殖指数PI分别为0.46,0.43和0.38;软琼脂克隆形成率分别为34.7%,33.3%和15.8%;超微结构观察见转染细胞细胞器扩张和肿胀,核浆比例变小,核仁减小,数目减少,核分裂像减少。结论:应用shRNA沉默TGF-β1基因可抑制Ms细胞的增殖。
- 王静吴军正魏红宇付善民郭富平温德升
- 关键词：转化生长因子-Β1SHRNA涎腺粘液表皮样癌
- 多西紫杉醇对腺样囊性癌SACC-83细胞增殖的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 :研究多西紫杉醇对涎腺腺样囊性癌SACC 83细胞增殖能力的影响。方法 :用细胞计数法、软琼脂克隆形成法、流式细胞术等研究药物对细胞增殖的抑制作用。结果 :多西紫杉醇对SACC 83细胞具有浓度依赖性和时间依赖性生长抑制作用 ,药物作用 2 4、48、72h的IC3 0 (nmol/L)分别为 1.3 9、1.2 6、0 .47,IC50(nmol/L)分别为 13 .0 2、3 .3 4、1.2 6,相对抗肿瘤活性 (RAA)值分别为 3 3 0、12 98、3 42 6;药物作用于细胞 72h后 ,对照组G1、S、G2 期细胞 ( % )为 73 .8、19.8和 6.4,IC3 0 组为 65 .0、2 9.5和 5 .5 ,IC50 组为 5 7.6、42 .4和 0 ;对照组、IC3 0 组、IC50 组克隆形成率 ( % )分别为 3 6.0± 0 .5、8.3± 2 .5和 0 .5± 0 .3。结论 :多西紫杉醇对腺样囊性癌ACC细胞增殖有明显的抑制作用。
- 穆云静吴军正贾永庆郭富平
- 关键词：涎腺腺样囊性癌多西紫杉醇
- 转化生长因子-β1 shRNA真核表达载体的构建被引量：4
- 2006年
- 目的构建转化生长因子β1(TGF-β1)的短发夹状RNA(shRNA)表达系统,为人涎腺粘液表皮样癌的治疗提供新的方法。方法根据Genebank提供的TGF-β1 mRNA序列,设计短链寡核苷酸,化学合成后经退火形成双链 DNA片段,克隆到pWH1载体中,用酶切方法对重组体进行鉴定:最后将构建的TGF-β1特异性shRNA表达载体转染涎腺粘液表皮样癌细胞,通过RT-PCR、免疫组化观察其对细胞TGF-β1 mRNA和蛋白水平表达的影响。结果经酶切、连接后构建的质粒称之为pWH1-TGF-β1。酶切证实成功构建了TGF-β1 shRNA表达载体,RT-PCR和免疫组化结果显示其能够在mRNA和蛋白水平抑制细胞内TGF-β1的表达。结论成功构建的TGF-β1特异性shRNA表达载体具有阻断TGF-β1表达的功能,可能为涎腺粘液表皮样癌治疗提供有效的方法和手段。
- 王静吴军正郭富平朱秀丽温德升
- 关键词：短发夹状RNA真核表达载体转化生长因子Β1
- 17β-雌二醇对涎腺黏液表皮样癌高转移细胞M_3SP_4的作用
- 2005年
- 目的:研究17β雌二醇(E2)对涎腺黏液表皮样癌高转移细胞系M3SP4细胞的作用。方法:采用细胞记数法、MTT、软琼脂克隆形成法及相关癌基因免疫组织化学的方法研究17β雌二醇对M3SP4细胞的增殖和对VEGF、cerbB2、Ki67、P16的影响。结果:雌激素在10-10～10-5mol/L时对M3SP4有促进作用,其中在10-7mmol/L时对M3SP4的促增殖作用最显著,体外实验表明细胞群体倍增时间减少了10.8%,克隆形成率增加了225%,免疫组化显示VEGF、cerbB2、Ki67的表达增强,而P16的表达明显降低。体内实验,实验组裸鼠在每天给予0.0052mg/d的E2时,肿瘤细胞M3SP4的生长增加65%,转移增加了609%。VEGF、Ki67和cerbB2有较强表达,明显强于对照组;相反抑癌基因P16的表达较弱。结论:雌激素可刺激涎腺黏液表皮样癌M3SP4细胞的增殖和转移能力。
- 郭富平吴军正王静虎元俊
- 关键词：涎腺黏液表皮样癌17Β-雌二醇
