陈云鹏 作品数:41 被引量:141 H指数:7 供职机构: 上海交通大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 上海市科技兴农重点攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 医药卫生 更多>>
寄主诱导下的玉米弯孢叶斑病菌致病性分化相关蛋白的动态变化研究 被引量:4 2008年 Reinoculation and two-dimensional electrophoresis were performed to analyze the pathogenicity differentiation of Curvularia lunata.Resistant host inbred lines Shen135,Mo17,and 78599-1 were reinoculated(six generations) with low virulent isolate WS18.Results showed that the disease index had no significant change for the first 2 generations of inoculation.At the third generation,the incidence of disease was increased and the number of differential expressed proteins of mycelia were more than that in the first 2 generations.More than 100 differential expressed proteins were found in the mycelia of fifth generation when compared with the original one.In the experiment,10 differentially expressed proteins were identified by MALDI-TOF-MS analysis.Three proteins were related directly to the differentiation of virulence,2 were related to allergen,4 were related to the metabolism of carbon or signaling pathway and 1 was unkonwn to Curvularia lunata. 翟羽红 陈捷 刘力行 黄秀丽 程小舟 朱恒 陈云鹏 徐书法关键词:玉米弯孢叶斑病菌 致病性分化 寄主植物 相关蛋白 玉米主产区 寄主选择性 短小芽孢杆菌表面活性素基因克隆及其抑菌活性研究 被引量:2 2016年 以短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)DX01菌株为供试对象,以其基因组DNA为模板,通过PCR扩增,成功克隆出表面活性素基因。构建了原核表达载体pET28a-SURF1,在大肠杆菌BL21中进行了IPTG诱导表达,经过柱纯化和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),证实pET28a-SURF1在大肠杆菌BL21中成功表达。通过玉米小斑病病菌分生孢子萌发试验、对玉米小斑病病和稻瘟病病菌平板抑菌试验,测定了表面活性素融合蛋白对玉米小斑病病菌和稻瘟病两种病菌的抑菌活性。 程杰杰 孙帅欣 殷超凡 陈云鹏关键词:短小芽孢杆菌 原核表达 抑菌活性 短小芽胞杆菌抑菌蛋白TasA基因克隆及功能分析 被引量:7 2014年 为了研究短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的抑菌相关基因的功能,采用PCR方法从DX01基因组DNA中扩增出编码TasA基因的全长DNA序列,并构建原核表达载体pET2-TasA,在大肠杆菌Escherichia coli BL21中表达获得TasA基因的融合表达蛋白,分别利用悬滴法和平板打饼法检测融合蛋白对玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)分生孢子萌发和对玉米小斑病菌及水稻稻瘟病菌菌丝体生长的抑制活性,结果表明TasA融合蛋白对这2种植物病原真菌的生长有着显著的抑制作用。TasA基因包含1个780bp的完整开放阅读框(GenBank:KC692521),编码259个氨基酸残基;该序列与B.subtilis菌株PEBS2501(GenBank::FJ713581)、B.amyloliquefaciens HF-01(GenBank:JF781312)和B.subtilis菌株BWST7003(GenBank:AP012496)同源抑菌蛋白基因序列相似性达99%。原核表达产物经SDS-PAGE分析检测到约32.3kDa的融合蛋白;经Ni-NTA柱纯化后的融合蛋白对供试病原菌均有显著的抑制作用。经测定发酵液的TasA融合蛋白产率为28μg/mL,短小芽胞杆菌抑菌蛋白TasA基因具有良好的抑菌效果。 刘通 陈云鹏 李琼洁 顾振芳关键词:抑菌蛋白 抑菌活性 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)DX01转座突变株的构建及转化体系的优化 被引量:5 2011年 Tn5转座子及其衍生载体被广泛应用于革兰氏阴性菌的基因功能研究,但尚未见有利用Tn5转座子导入革兰氏阳性菌短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)DX01菌株的报道。本研究通过构建Tn5转座载体,对短小芽孢杆菌DX01菌株进行了Tn5转座插入诱变,获得了大量的突变株。同时,考察了感受态细胞培养浓度、电击电压、电击缓冲液及复苏培养基的选择等对DX01电转化效果的影响,建立了实验条件下的最佳电转条件。从1 109个转化子中随机抽取20个继代培养15代后,进行了稳定性分析;对转化子的PCR及Southern blot分析证实Tn5已随机插入到DX01基因组中。 胡晓璐 沈新迁 傅科鹤 顾振芳 陈云鹏关键词:短小芽孢杆菌 突变 电击转化 固氮菌铵载体基因、突变体、固氮菌铵载体突变株及应用 本发明涉及固氮菌铵载体基因、突变体、固氮菌铵载体突变株及应用,固氮菌Kosakonia radicincitans GXGL‑4A,已于2016年6月2日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏登记号为CG... 陈云鹏 程杰杰 孙帅欣 李琼洁文献传递 一种适于杉科植物遗传多样性分析的RAPD体系的建立初探 被引量:4 2002年 以墨西哥落羽杉、中国柳杉及日本柳杉为代表样品,摸索出一套适于杉科植物遗传分析的RAPD方法,通过大量的引物筛选和扩大所用引物数量,将能从理论上筛选出特定的引物对,用于杉科植物的真假杂种鉴定、亲本确认以及分类学的研究。 陈云鹏 潘士华 张建军 竺唯杰 纽慧娟 曲志才 王敬文 沈大棱 叶增基关键词:杉科植物 RAPD分析 番茄花粉管导入方法 一种番茄花粉管导入技术,选择处于喇叭口期的花蕾隔离套袋,人工授粉后24~48小时,利用自然花粉管通道,将外源基因导入到拟改良受体品种。导入时先用刀片对受体材料平行截取2/3花柱,然后用微量注射器吸取10μl浓度为0.61... 陈火英 张建华 陈云鹏 庄天明文献传递 短小芽胞杆菌DX01菌株Tn5转座突变株的抑菌活性筛选体系的建立 被引量:5 2012年 为建立短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的Tn5转座突变株抑菌活性的高效筛选体系,采用发酵液平板抑菌法研究了各突变株发酵液对稻瘟病菌Magnaporthe grisea生长的影响,并测定了目标突变株的几丁质酶和蛋白酶活性及发酵液对稻瘟病菌分生孢子萌发的抑制率。从2 633个突变株中筛选出6个抑菌活性较对照菌株DX01显著变化的突变株。对照DX01发酵液对真菌孢子萌发的抑制率为36%,而突变株Tn5-901和Tn5-194则分别为96%和3%,抑菌活性与对照的差异达到极显著水平。其余4个突变株的几丁质酶、蛋白酶活性多重比较结果与发酵液平板抑菌结果并不完全一致,但发酵液平板抑菌法简单、高效,适用于短小芽胞杆菌突变株的抑菌活性初筛。 胡晓璐 陈云鹏 沈新迁 刘通 顾振芳关键词:抑菌活性 玉米弯孢霉叶斑病蛋白质组学研究进展 采用双向电泳技术,对从自然界分离的强、弱不同致病类型的玉米弯孢菌菌丝蛋白进行了分析。强、弱致病菌分别出现28个和8个致病性分化特异蛋白,共出现了39个表达丰度差异蛋白。本研究发现无论是强致病,还是弱致病菌株的蛋白质不是一... 陈捷 徐书法 黄秀丽 刘力行 陈云鹏关键词:蛋白质组学 玉米病害 致病性分化 质谱分析 利用RAPD检测技术推测杂交落羽杉群落间的亲缘关系 被引量:10 2002年 采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术,对8个可能是杂交墨西哥落羽杉片林样本、其杂交母本———墨西哥落羽杉和杂交父本的同类———柳杉,共计12个样本进行了亲缘关系鉴定和遗传多样性分析.从31个引物筛选出17个随机引物,共扩增出164条带.其中,多态带有162条,占全部条带的98.8%.检测结果表明:在编号为8,11,12的3个柳杉样本中,11号与原杂交父本亲缘关系最近;1,4,9号是杂交墨杉群落的可能性最大;5号可能是未杂交的墨杉纯林;其他群落的样本是否为杂交墨杉尚不能通过本试验得出明确结论. 陈云鹏 潘士华 张建军 竺唯杰 纽慧娟 曲志才 王敬文 沈大棱 叶增基关键词:群落 亲缘关系 RAPD 聚类分析