陈佳
- 作品数：10 被引量：28H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金：大庆市科技局攻关项目长江学者和创新团队发展计划黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生经济管理更多>>
- 东毕吸虫信号蛋白14-3-3基因的克隆与表达
- 本试验根据GenBank上发表的日本血吸虫、曼氏血吸虫和牛血吸虫信号蛋白14-3-3序列,依其保守区设计合成一对引物,以提取的东毕吸虫总RNA为模板,FT-PCR方法扩增信号蛋白14-3-3基因的中间片段,连接pMD18...
- 陈佳王春仁
- 关键词：东毕吸虫病信号蛋白14-3-3RACE克隆
- 文献传递
- PCR诊断牛新孢子虫病的初步应用被引量：5
- 2009年
- 目的以犬新孢子虫Nc-5基因为目的基因的PCR诊断方法,检测奶牛流产的胎牛脑组织的新孢子虫。方法根据GenBank发布的新孢子虫特异性基因片段Nc-5基因序列,设计1对特异性引物,以犬新孢子虫(Neospora caninum)标准株DNA为模板,PCR扩增Nc-5基因,与pMD18-T载体连接,转化大肠埃希菌JM109,获得阳性重组质粒pMD18-T-Nc-5,并测序。以环形泰勒虫、牛巴贝斯虫、刚地弓形虫、杜氏利什曼原虫以及犬新孢子虫标准株DNA为模板进行扩增以验证PCR的特异性,采用紫外分光光度计测定犬新孢子虫标准株DNA浓度和纯度,取高纯度的DNA样品用灭菌水稀释,分别取不同量的DNA进行PCR扩增,确定PCR方法的敏感性;利用该方法对32份奶牛流产的胎牛脑组织样品进行检测,同时,对其中23份流产的母牛血样进行ELISA血清学检测(作为对照),以评价犬新孢子虫PCR方法的检测效果。结果克隆的犬新孢子虫标准株目的基因大小为350bp,与GenBank(AY459289)中Nc-5基因序列一致性为98%,建立的犬新孢子虫PCR方法与环形泰勒虫、牛巴贝斯虫、刚地弓形虫和杜氏利什曼原虫均无交叉反应,最低能检测犬新孢子虫DNA3.125pg,检测流产胎牛脑组织阳性率为18.8%(6/32)。ELISA检验流产母牛血样抗体阳性率为17.4%(4/23),这4份阳性样品与其流产胎牛PCR检测结果均为阳性。结论建立的犬新孢子虫PCR诊断方法用于检测奶牛流产的胎牛脑组织新孢子虫的感染效果较好。
- 王春仁翟延庆赵兴存谭秋菊陈佳陈爱华王宇
- 关键词：犬新孢子虫PCR扩增胎牛
- 新孢子虫病免疫学诊断和免疫预防的研究进展被引量：2
- 2007年
- 新孢子虫病是一种对多种动物危害严重的原虫病，给畜牧业带来很大的经济损失，特别是奶牛饲养业。新孢子虫病越来越被人们所关注，特别是诊断和防制成为国内外兽医界研究的热点。该文对新孢子虫病免疫诊断方法的适用范围、优缺点及新孢子虫病免疫预防机制和疫苗研究情况进行了综述。
- 翟延庆陈佳王春仁
- 关键词：新孢子虫病免疫学诊断免疫预防
- 犬源华支睾吸虫28ku谷胱甘肽S-转移酶的原核表达与反应原性分析
- 2009年
- 本研究提取犬源华支睾吸虫总RNA,应用RT-RCR技术扩增28ku谷胱甘肽S-转移酶(Cs28GST)编码基因,PCR产物经T/A克隆后,亚克隆入pET-30a(+)原核表达载体,构建重组质粒pET-Cs28GST,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达;表达产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹分析和鉴定,研究结果显示犬源Cs28GST编码区含有639个碱基,编码212个氨基酸残基,表达的蛋白以包涵体形式存在,大小约为30.6ku,可被自然感染华支睾吸虫病犬的阳性血清识别,证明Cs28GST基因可在原核表达系统中高效表达并具有反应原性。
- 陈爱华王春仁陈佳王宇朱兴全程玉楠倪宏波
- 关键词：华支睾吸虫原核表达反应原性
- 东毕吸虫病ELISA诊断方法的建立
- 东毕吸虫病（orientobilharziasis）是由多种东毕吸虫（Orientobilharzia spp.）寄生于牛、羊等动物门静脉和肠系膜静脉内而引起的一种血吸虫病。该病主要分布于亚洲和欧洲的一些国家和地区,常呈...
- 陈佳
- 关键词：东毕吸虫病信号蛋白14-3-3RACE重组抗原间接ELISA
- 文献传递
- 东毕吸虫信号蛋白14-3-3基因的克隆与表达
- 陈佳王春仁
- 奶牛新孢子虫重组蛋白NcSRS2t间接ELISA方法的建立及初步应用被引量：16
- 2009年
- 以纯化的犬新孢子虫(Neospora caninum)重组蛋白NcSRS2t为抗原包被酶标板,通过对间接ELISA各反应条件的优化,确定了最佳反应条件。采用已建立的间接ELISA反应条件,对218份阴性血清的检测结果进行统计学分析,确定了间接ELISA的判定标准,即OD450nm值大于等于0.32为阳性,小于0.32为阴性。应用建立的间接ELISA方法对128份阴性血清和50份阳性血清(经IDEXX公司新孢子虫抗体检测试剂盒证实)进行检测,结果表明,间接ELISA方法的特异性为93.0%,敏感性为90.0%。采用本试验建立的新孢子虫间接ELISA诊断方法对黑龙江省克山、海林、双城、甘南、克东、富裕、牡丹江、大庆等8个县(市)奶牛场的540份奶牛血清进行了检测。结果表明,被检的540份奶牛血清样本中奶牛新孢子虫的抗体阳性率为13.33%。该间接ELISA诊断方法的建立及初步应用为新孢子虫病诊断试剂盒的研制和新孢子虫病的预防研究奠定了基础。
- 王春仁李志莲翟延庆倪宏波陈爱华陈佳王宇
- 关键词：新孢子虫间接ELISA
- 牛羊源土耳其斯坦东毕吸虫ITS和28S rDNA-LSU序列分析被引量：1
- 2008年
- 目的探讨牛羊源土耳其斯坦东毕吸虫(Orientobilharzia turkestanicum)核糖体内转录间隔区(ITS)和28S核糖体大亚基序列(rDNA-LSU)的差异。方法粪便检查、剖杀自然感染东毕吸虫的绒山羊、山羊、绵羊和黄牛,收集虫体,形态学鉴定为土耳其斯坦东毕吸虫。抽提成虫基因组DNA,扩增其ITS(包括ITS-1、5.8S rDNA和ITS-2)和28S rDNA-LSU序列,测序并分析以上序列,以及28S rDNA-LSU序列RNA二级结构。结果牛、羊源土耳其斯坦东毕吸虫的ITS-1、5.8S rDNA、ITS-2和28S rDNA-LSU序列分别长384、159、331和1304bp。牛源和羊源的ITS-1和5.8S rDNA序列完全相同;黄牛源、绵羊源和绒山羊源的ITS-2序列完全相同,与山羊源存在1个碱基的差异;绵羊源和绒山羊源的28S rDNA-LSU序列完全相同,与牛源和山羊源分别有2个碱基的差异。绵羊源和绒山羊源的28S rDNA-LSU序列RNA二级结构相同,与山羊源存在微小差异,但牛源与羊源存在较大差异。结论不同终末宿主源土耳其斯坦东毕吸虫的核糖体序列存在不同程度的差异,羊源28S rDNA-LSU序列的RNA二级结构相同或相似,但与牛源存在较大差异。
- 仇建华李利王春仁陈佳陈爱华翟延庆
- 关键词：土耳其斯坦东毕吸虫
- 绒山羊东毕吸虫病的诊断与治疗
- 2007年
- 东毕吸虫病是由裂体科、东毕属的各种吸虫寄生于牛、羊等反刍动物门静脉和肠系膜静脉内而引起的一种血吸虫病。该病在黑龙江省多呈地方性流行，给当地畜牧业生产造成很大经济损失。2006年9月，黑龙江省大庆市某个体养殖户饲养的绒山羊出现了以精神沉郁、贫血消瘦、腹部增大、排褐色或带有血液稀便、死前流产为主要症状的疾病，通过临床症状观察、病理剖检和实验室检查，确诊为东毕吸虫病，通过采用特效药物进行治疗，使病情得到了控制。
- 李利翟延庆陈爱华陈佳王春仁
- 关键词：东毕吸虫病绒山羊临床症状畜牧业生产
- 黑龙江省绿色食品网络营销研究
- 对黑龙江省绿色食品网络营销的研究是在网络营销大背景下展开的，研究的目的在于：提出网络销售绿色食品的模式，为我省绿色食品企业的销售提供新的思路;探讨绿色食品采用网络营销模式的可行性;确定影响绿色食品网络营销的主要因素，为绿...
- 陈佳
- 关键词：绿色食品网络营销影响因素LOGISTIC回归
- 文献传递
