靖杰
- 作品数：41 被引量：91H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 重组H8N4亚型禽流感病毒的拯救
- 2012年
- 将H8N4亚型流感病毒的HA和NA基因插入双向转录/表达载体pHW2000中,并与本实验室保留的适应毒株A/PR/8/34(H1N1)的6个质粒pHW2000-PB2、pHW2000-PB1、pHW2000-PA、pHW2000-NP、pHW2000-M、pHW2000-NS共转染293T和MDCK混养细胞,在细胞内部完成病毒粒子的组装,然后接种SPF鸡胚,经3代扩毒后,成功拯救了H8N4亚型重组流感病毒,并对其进行鉴定及生物学特性分析。本研究结果为该亚型禽流感病毒变异机理研究及疫苗的研制等奠定了基础。
- 崔鹤馨李沂田宇飞袁森凡敏靖杰齐延新郭欢欢田明尧金宁一
- 关键词：病毒拯救禽流感病毒重组病毒
- Sindbs结构蛋白基因表达及其多克隆抗体制备
- 我国从新疆按蚊和云南不明原因发热患者血中分离到SINV，但未见该病毒流行的报道。建立了一种高效特异的ELISA快速诊断方法，成功获得了Sindbs E基因的高效表达产物，制备了特异性和效价较高的特异性E蛋白多克隆抗体。该...
- 刘昊鲁会军刘振江靖杰任静强刘燕瑜金宁一
- 关键词：结构蛋白基因表达抗体制备
- 犬圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：11
- 2017年
- 犬圆环病毒(DogCV)是圆环病毒科新发现的圆环病毒,旨在建立犬圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法。试验用PCR方法克隆犬圆环病毒ORF2基因保守区域,构建标准阳性质粒pClon007-ORF2。以标准阳性质粒pClon007-ORF2为模板对荧光定量PCR反应体系进行优化。结果表明,所建立的方法 Ct值与标准品在4.67×10~9 copies/μL^4.67×10~3 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-3.445。该方法检测灵敏度为4.67×10~1copies/μL。该方法对狂犬病病毒、犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒2型等犬常见病原的检测均无交叉反应;所有稀释度标准品模板均在83.35℃出现窄的特异性熔解峰。临床样品检测表明,所建立的实时荧光定量PCR对犬圆环病毒的阳性检测率为12.50%(4/32)。
- 孙文超解长占赵冠宇曹亮郑敏曹慧慧张红云韦显凯韩继成温树波肖朋朋靖杰张萍鲁会军金宁一
- 关键词：SYBR实时荧光定量PCR
- 3种常见呼吸道病毒检测基因芯片的制备被引量：6
- 2013年
- 目的建立一种可同时检测鼻病毒、呼吸道合胞病毒以及腺病毒的基因芯片方法。方法根据GenBank已发表的鼻病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒的基因序列,应用生物学软件设计相应的引物和寡核苷酸探针,构建检测芯片;使用巢式PCR扩增标记目的片段,将其与检测基因芯片进行杂交和扫描分析;通过特异性、灵敏性和重复性试验评估基因芯片方法。结果设计的全部探针均能与相应的标记样品特异性杂交,其中探针1a和1b可特异检测鼻病毒;探针2a、2b和2c可特异检测呼吸道合胞病毒,探针3a和3b可特异检测腺病毒。基因芯片法检测3种病毒的最低拷贝数分别是2.59×102个/μl、2.21×101个/μl和2.05×102个/μl。结论构建的基因芯片可特异性检测样品中低滴度的鼻病毒、呼吸道合胞病毒以及腺病毒,有望为临床提供确诊依据。
- 崔鹤馨田明尧姜庆利袁森田宇飞李沂刘昊靖杰阎富龙金宁一朱光泽
- 关键词：鼻病毒呼吸道合胞病毒腺病毒巢式PCR基因芯片
- Quil A与PICKCa的免疫调节作用研究被引量：1
- 2011年
- 为了探讨Quil A、PICKCa及二者联合使用对实验动物的免疫调节作用,试验分别给小鼠和猪注射Quil A、PICKCa及两者混合物,于注射后不同时间采血,检测细胞因子水平;注射后第7天检测猪T淋巴细胞的体外增殖反应。结果表明:小鼠和猪在注射药物之后均未出现任何不良反应;试验组动物的细胞因子水平均显著高于对照组;猪T淋巴细胞体外增殖能力也显著高于对照组。说明Quil A、PICKCa对小鼠和猪具有良好的免疫调节作用。
- 刘燕瑜任静强刘存霞靖杰鲁会军金扩世金宁一
- 关键词：佐剂免疫细胞因子淋巴细胞增殖
- 新城疫病毒CC株L基因的克隆及遗传进化分析
- 以新城疫病毒长春株(NDV CC株)为模板扩增L基因,由于L基因片段较大,故采用分段扩增的策略利用RT-PCR方法分两段L1及L2扩增新城疫病毒长春株L基因。完成基因测序之后,利用DNAStar中的MegAlign软件对...
- 靖杰鲁会军刘昊刘燕瑜刘存霞金宁一
- 关键词：新城疫病毒克隆同源性
- 文献传递
- Sindbs结构蛋白基因表达及其多克隆抗体制备
- 引言SINV世界性分布,在很多地区流行,印度、南非、澳大利亚、俄罗斯等地区均从库蚊标本中分离到该病毒。亚洲许多国家也有报道分离到该病毒,我国从新疆按蚊和云南不明原因发热患者血中分离到SINV,但未见该病毒流行的报道。所以...
- 刘昊鲁会军刘振江靖杰任静强刘燕瑜金宁一
- 转瓶培养与生物反应器微载体培养重组腺病毒的比较被引量：4
- 2016年
- 目的分别用3L转瓶和7L生物反应器微载体系统培养人胚胎肾细胞（HEK-293细胞）并接种H3型流感重组腺病毒,比较两种方法培养细胞及重组腺病毒的效果。方法分别用3L转瓶和7L生物反应器培养HEK-293细胞。转瓶每24h取样,生物反应器每12h取样,记录细胞总数。待细胞长满表面85%~90%时接种流感重组腺病毒,完全病变后收取病毒液并测定病毒滴度。结果转瓶培养HEK-293细胞3d,细胞增殖增加1.85~2.45倍,为（3.71~4.90）×107个[（2.95~3.90）×104 cells/cm2],生物反应器培养3d,细胞增长4.72~5.00倍,为（132.15~140.09）×107个[（24.88~28.72）×104cells/cm2]。转瓶培养重组腺病毒滴度为6.85TCID50/ml,生物反应器微载体系统培养腺病毒滴度为7.200TCID50/ml。结论生物反应器微载体系统培养流感重组腺病毒数量和滴度均高于转瓶培养,不但提高了疫苗的产量,还减少了细胞分泌物的残留,增强了疫苗接种的安全性。
- 郭海宁张萍韩继成靖杰曹亮肖朋朋解长占李一权马海彬南福龙崔卓栋李霄田明尧鲁会军金宁一
- 关键词：转瓶生物反应器微载体HEK-293细胞重组腺病毒
- 欧洲型PRRSV ORF3和ORF5基因核酸疫苗的构建及其免疫原性分析
- 引言与目的 PRRSV是重要的猪传染性疾病,从流行至今一直严重威胁着世界养猪业.PRRSV主要有两种基因型即欧洲型(EU,1型)和北美型(NA,2型),两者之间核苷酸序列同源性为54％～67％.过去,Ⅰ型PRRSV仅限于...
- 任静强鲁会军孙文超温树波刘昊阎富龙靖杰陆飞金扩世金宁一
- H3亚型流感重组腺病毒候选疫苗的构建及鉴定
- 2013年
- 目的研制一种制备工艺简单、无需鸡胚即可大量生产的预防季节性H3亚型流感重组腺病毒候选疫苗。方法构建含有外源H3HA基因的重组腺病毒穿梭载体质粒pacAd5-H3HA,并用酶切的方法进行鉴定;将鉴定阳性的pacAd5-H3HA与腺病毒骨架载体质粒线性化后用脂质体介导共转染HEK293细胞,分别采用RT-PCR、间接免疫荧光试验以及Western blot方法对构建的H3亚型流感重组腺病毒疫苗进行鉴定。结果 RT-PCR扩增出约1.8kb片段,与目的片段大小相同,表明外源基因H3HA成功插入重组腺病毒。间接免疫荧光试验显示重组腺病毒转染后的HEK293细胞中检测到特异性蛋白,Western blot显示在70ku处有一反应条带,表明该H3HA蛋白能被兔抗H3亚型HA蛋白血清识别。结论构建的H3亚型流感重组腺病毒能在HEK293细胞中表达具有反应原性的H3HA蛋白,为后续的动物实验奠定了基础。
- 温树波谭磊赵权任静强靖杰孙文超阎富龙张丹鲁会军金宁一
- 关键词：重组腺病毒疫苗HEK293细胞
