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15N标记创伤弧菌及其培养基的制备方法: 本发明的公开了一种15N标记创伤弧菌及其培养基的制备方法，培养基的制备方法包括下列步骤：（1）15N稳定性同位素标记光合细菌的培养；（2）15N标记创伤弧...; 李正义贾俊涛赵淑娟赵鹏姜英辉唐静马云; 文献传递

基于Taqman探针的水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR快速检测方法: 本发明公开了一种基于Taqman探针的麦氏弧菌（Vibriometschnikovii）的荧光定量PCR快速检测方法，采用麦氏弧菌特异性引物和TaqMan探针，即可对水产品中麦氏弧菌进行检测与...; 贾俊涛吴振兴李正义祝素珍姜英辉马云张健

单增李斯特氏菌SureTect实时PCR检测方法的比较研究被引量：3: 2014年; 目的评估食品中单增李斯特氏菌SureTect实时PCR检测方法的性能。方法按照ISO 16140:2003/Amd 1:2011《食品和动物饲料微生物学-可替代方法的验证方案》的要求对该方法进行了实验室内的方法比较研究(即实验室内的验证)。结果对于不同的食品类别,该方法的相对准确性在77%~85%之间,相对特异性在72%~83%之间,相对灵敏度在72%~91%之间,相对检测限在0.02~0.06 CFU/g。统计检验表明,该方法与参照方法在相对准确性、相对特异性和相对灵敏度方面无显著性差异,两种方法的相对检测限也无显著性差异。使用50株目标菌株和30株非目标菌株进行方法选择性实验,两种方法检测结果均一致。结论单增李斯特氏菌SureTect实时PCR检测方法是一种快速、准确和灵敏的检测方法。; 马云王明鑑贾臻罗世芝王蕾; 关键词：单增李斯特氏菌

四种基因定量方法对实时荧光PCR与微滴式数字PCR检测霍乱弧菌基因表达量的分析被引量：5: 2017年; 基因表达量测定对基因功能解析和探索生命机理具有重大意义,目前实时荧光PCR和微滴式数字PCR技术是进行基因表达量测定的有效方法。本文以低温处理的霍乱弧菌sfs、vcc、Rec A、hly及16S r RNA基因为研究对象,分别用实时荧光PCR和微滴式数字PCR技术对低温处理前后霍乱弧菌的上述基因表达量进行测定,实时荧光PCR实验数据分别采用??CT和ge Norm法进行分析,微滴式数字PCR实验数据分别采用相对定量和绝对定量法进行分析,获得处理组基因表达量相对于对照组的变化倍数;使用多维尺度法来分析四种基因定量方法的数据。结果表明,在本实验条件下,四种基因定量方法的分析结果存在差异;16S r RNA基因表达量发生了变化,不适合作为内参基因;微滴式数字PCR能更直观的给出基因表达量变化的结果,并且基因表达差异相对定量分析的准确度更高。; 唐静贾俊涛赵丽青王静张健姜英辉徐彪王昌军马云; 关键词：基因表达实时荧光定量PCR

基于Taqman探针的水产品中麦氏弧菌的荧光定量PCR快速检测方法: 本发明公开了一种基于Taqman探针的麦氏弧菌（Vibrio metschnikovii）的荧光定量PCR快速检测方法，采用麦氏弧菌特异性引物和TaqMan探针，即可对水产品中麦氏弧菌进行检测与监控。其中上游引物Vme...; 贾俊涛吴振兴李正义祝素珍姜英辉马云张健; 文献传递

浅析生物有机肥中功能微生物对食品质量安全的影响被引量：1: 2017年; 随着经济的快速发展和人们生活水平的不断提高,食品安全问题越来越受到人们的关注。在现代农业生产中,化学肥料的使用,为保证粮食稳产、高产等做出了重要的贡献,但粮食品质下降、生态污染、食品安全等一系列问题也随之显现。发展有机农业,生产安全、健康的绿色食品成为我国乃至世界农业发展的趋势。作为一种新型肥料,生物有机肥在粮食作物、经济作物、林业生产和园林绿化等领域均受到人们的重视。本文主要介绍了生物有机肥的功能微生物,论述了生物有机肥检测方面的问题和对食品质量安全等的影响,希望生物有机肥在减少化肥污染、改善生态环境、确保食品质量安全等方面发挥更好的作用。; 唐静马云赵丽青李明哲李正义贾俊涛姜英辉王昌军; 关键词：生物有机肥食品质量安全

RapidChek检测食品中单增李斯特菌的方法评价: 2017年; 目的评价RapidChek法检测食品中单增李斯特菌的检测效果并验证。方法采用t检验,比较RapidChek方法与GB 4789.30-2016方法的培养基增菌效果。依据ISO 16140:2003《食品和动物饲料微生物学-可替代方法的验证方案》,比较RapidChek检测方法与GB 4789.30-2016检测方法的检测效果,涉及的性能指标有相对准确性、相对特异性和相对灵敏度、包含性和排他性。结果 RapidChek检测方法增菌培养基效果优于GB 4789.30-2016方法增菌培养基LB_1。根据RapidChek检测方法、GB 4789.30-2016培养基+RapidChek试纸条方法、RapidChek培养基+GB 4789.30分离鉴定方法的统计检验得出,3种方法与参照方法在相对准确性、相对特异性和相对灵敏度方面无显著性差异。在包含性和排他性方面,RapidChek检测方法与GB 4789.30-2016检测方法的检测结果均一致。结论在所验证的指标上,RapidChek检测方法(包括与GB4789.30-2016组合的方法)与GB 4789.30-2016方法无差异。; 马云唐静赵立青李正义王昌军方佩佩姜英辉贾俊涛; 关键词：单增李斯特菌

数字PCR定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌方法的研究被引量：18: 2017年; 目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌的分析方法。方法选择基因hly A为靶序列,设计PCR扩增引物和Taq Man探针,优化反应条件和反应体系,通过细菌分离和dd PCR方法对靶标基因的检测特异性、灵敏度和重复性进行实验,并对定量结果进行分析。结果 ddPCR反应中的最佳探针浓度为5 pmol/μL,特异性好,检出限为(3.6±0.1)copies/20μL,重复性实验良好,标准偏差为0.067%。ddPCR的拷贝数(copy number)与细菌密度(colony forming units,CFU/mL)形成了较好的线性关系。结论本研究建立dd PCR的拷贝数和菌液密度或菌落数的线性关系,可以为单核细胞增生李斯特氏菌的快速定量检测提供参考。; 赵丽青方佩佩唐静马云李正义王昌军苏倩贾俊涛姜英辉; 关键词：单核细胞增生李斯特氏菌

进口黑虎虾中霍乱弧菌的鉴定及其挥发性产物分析被引量：3: 2017年; 目的对进口黑虎虾中分离的菌株F14-2进行种属鉴定,通过顶空气相色谱-质谱联用法(headspace gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC-MS)分析分离菌株液态培养代谢的挥发性产物。方法应用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统分析菌株的生理生化特征,利用荧光定量PCR特异性扩增检测病原菌,通过顶空气相色谱-质谱联用法分析分离菌株F14-2的代谢的挥发性产物。结果菌株F14-2为革兰氏阴性菌,生理生化特征与霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的相似性为98%,荧光定量PCR检测和血清凝集试验进一步确认为非O1非O139群霍乱弧菌,菌株F14-2在营养肉汤(nutrient broth)中代谢的挥发性产物主要有乙醇、异戊醇、乙酸和2-乙基己醇。结论进口黑虎虾中分离的菌株F14-2鉴定为霍乱弧菌,该菌产生的挥发性产物为霍乱弧菌的鉴定提供参考。; 王昌军赵丽青马云方佩佩崔淑华贾俊涛姜英辉唐静梁成珠李正义; 关键词：霍乱弧菌挥发性产物

国境口岸航空器医学真菌污染分析: 2013年; 目的对青岛国际机场的出入境航空器携带病原真菌污染分布进行分析及鉴定。方法在航空器不同部位采集样本,采用传统微生物学及分子生物学鉴定技术相结合的方法对航空器携带病原真菌进行鉴定分析。结果在出入境航空器中发现真菌258株,已鉴定出235株,共7个属种,分别属于青霉菌属(39.9%),曲霉菌属(35.7%),及其他检出率较低真菌(毛霉属、根霉属、枝孢菌、隐球菌属)。结论分析显示在机舱不同部位病原真菌检出率及类别有显著不同。; 姜光域薛晓宁李正义李伟才马云侯伟贾俊涛; 关键词：病原真菌航空器

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马云

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