黄以宁
- 作品数：44 被引量：174H指数：8
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- 发文基金：广东省科委社会发展攻关项目广州市科技局重点科研项目广东省自然科学基金更多>>
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- 产前HLA配型在同胞脐血移植中的应用
- ＜正＞目的探讨产前HLA配型在同胞脐血移植中的临床应用和意义。脐血作为继骨髓、外周血之后的第三种造血干细胞来源,已成为治疗小儿血液系统疾病、自身免疫性疾病和某些先天性遗传病的重要手段。例如β-地中海贫血是广东地区高发的单...
- 廖灿吴洁莹汤雪薇李焱许遵鹏陈劲松辜少玲黄以宁
- 文献传递
- 改良盐酸胍法提取脐血DNA用于HLA基因分型被引量：1
- 2006年
- 为了比较经典的盐酸胍(Gu·HCl)抽提DNA法和改良盐酸胍抽提DNA法在提取脐血DNA的效果,探讨这两种方法在脐血组织相溶性抗原(HLA)基因分型中的应用,使用盐酸胍抽提DNA法和改良盐酸胍抽提DNA法提取72例脐血标本的DNA,并分别测定其DNA的浓度和纯度,采用序列特异性引物聚合酶反应方法(PCR-SSP)比较这两种方法所提取的DNA。结果表明:两种方法提取脐血DNA均获成功;根据对DNA的质量监测发现,用改良盐酸胍抽提DNA在质量上较盐酸胍法好;用于HLA基因分型时,改良盐酸胍抽提DNA法可减少非特异性条带的出现。结论:改良盐酸胍抽提DNA法不但操作简便,成本下降,而且在最少血量中能提取出高纯度的DNA,减少非特异性条带的出现。该法完全可以满足脐血库的日常脐血样品DNA的提取以及脐血HLA基因分型的要求。
- 汤雪薇廖灿李焱谢杏梅黄以宁
- 关键词：DNA提取HLA基因分型
- 脐血干细胞库的建立及其临床应用被引量：22
- 2001年
- 目的 建立无关供者脐血干细胞库 ,用于治疗骨髓衰竭、恶性及非恶性血液病、某些遗传病、重型免疫缺陷等疾病的干细胞移植。方法 采集足月顺产或剖宫产的新生儿脐血 ,以羟乙基淀粉分离红细胞 ,DMSO/LMD冷冻保存。每份脐血常规检测细胞活率、有核细胞计数、祖细胞体外培养、CD3 4+ 细胞检测、HLA配型及病原学检测等。结果 共采集 2 318份脐血 ,合格 12 40份 ,合格率为5 3 5 % ,合格脐血采集的平均体积 (98.3± 2 7.0 )ml,分离后脐血有核细胞为 (1.2± 0 .5 )× 10 9,回收率为(88.90± 9.6 5 ) %。脐血细胞存活率为 (97.0 0± 2 .6 1) %。CFU GM数为 (5 .18± 14.35 )× 10 5,BFU E数为 (10 .35± 11.5 5 )× 10 5,CFU Mix数为 (1.0 3± 1.47)× 10 5。脐血分离后CD3 4+ 细胞百分率为 (0 .5±0 32 ) % ,细菌培养阳性 4例 ,4例脐血CMV IgM阳性。在广州脐血库的 172例脐血移植登记患者中 ,HLA匹配 4个位点以上的占 91.12 %。至 2 0 0 0年 5月共提供 9份应用于无关供者脐血移植 ,其中 6例植入 ,植入成功率 6 6 .7%。结论 脐血库的建立可使脐血能够较好地应用于造血干细胞移植治疗 。
- 廖灿刘斌黄以宁李焱赵民许遵鹏汤雪薇辜少玲谢杏梅
- 关键词：冷冻保存造血干细胞移植
- 广东汉族人群21号染色体4个短串联重复序列多态性被引量：4
- 2006年
- 目的调查广东地区汉族人群4个短串联重复序列D21S1433、D21S1442、D21S1444、D21S2051的多态性分布。方法采用荧光定量PCR(quantitativefluorescencePCR,QF-PCR)技术,对广东地区200份无亲缘关系样本进行等位基因分型,计算4个短串联重复序列的基因频率、基因型频率,等位基因杂合度,期望杂合性、多态信息含量和非父排除率。结果D21S1433、D21S1442、D21S1444、D21S2051分别检出9、10、9、5个等位基因,等位基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。D21S1433和D21S1442的杂合度较高,分别为0·818和0·820,D21S2051的杂合度最低,为0.261。结论D21S1433、D21S1442、D21S1444具有较高的杂合度和多态信息量,作为遗传标记较为理想;D21S2051杂合度较低,不能作为遗传标记物。
- 杨昕廖灿黄以宁李焱易翠兴吴韶清潘敏胡顺妍袁思敏
- 关键词：短串联重复序列遗传多态性等位基因
- 反向点杂交法用于80例β地中海贫血的快速产前诊断被引量：15
- 1996年
- 为探讨反向点杂交法（ＲＤＢ）在β地中海贫血（β地贫）基因诊断中的优越性，应用该方法对７６个家庭的８０例β地贫高风险胎儿进行产前诊断。在８０例被检胎儿中，完全诊断的有７７例：包括正常个体２２例；β地贫杂合子４９例；双重杂合子４例及纯合子２例。另有３例为不完全诊断，其中２例被排除了重症的可能；余１例有１／２的机会为β地贫双重杂合子。ＲＤＢ法可同时筛查１８种中国人β地贫突变，且操作简便快速。
- 廖灿徐湘民黄以宁刘忠英李坚刘忠英李坚彭朝晖蔡旭恒
- 关键词：地中海贫血产前诊断反向点杂交
- 荧光定量PCR产前快速诊断唐氏综合征可行性研究被引量：14
- 2006年
- 目的建立快速高效的产前诊断唐氏综合征的分子生物学方法。方法分别在21号染色体上选取7个微卫星重复序列(SmallTandemRepeat,STR)(D21S1433,D21S1442,D21S1444,D21S1411,D21S1412,D21S1413,D21S1414)作为遗传标记,利用荧光定量PCR(QF-PCR)扩增技术及片段分析技术,对250例羊水标本进行检测,并与羊水标本染色体核型分析结果进行对比。结果250例羊水标本中,核型分析发现24例21三体,2例性染色体数目异常,24例唐氏综合征样本采用QF-PCR全部检出。224例正常羊水标本中,QF-PCR检出阴性标本223例,1例样本呈假阳性,假阳性率为0.4%,24例21三体标本中,七对引物同时检测诊断阳性率为100%。所有试验结果均在24h内得出。结论QF-PCR作为一种快速、准确、高效的分子生物学方法,对诊断唐氏综合征具有重要意义。
- 杨昕廖灿黄以宁李焱李东至潘敏易翠兴吴韶清胡舜妍
- 关键词：荧光定量PCR唐氏综合征
- 应用反向斑点杂交技术进行脐血HLA-DRB基因分型方法的建立被引量：5
- 2002年
- HLA分子的多态性对于移植有十分重要的意义。常用的HLA基因分型方法中SSOP基因分型方法有较高分辨率 ,但操作过程复杂 ,仅适于大样本的HLA分型。PCR SSP基因分型方法分辨率较低 ,但操作过程简单 ,适于临床要求。有必要建立一种简便、快速、价廉、高分辨率的基因分型方法。本研究取 6 3份已知HLA DRB型的脐血标本 ,经盐酸胍方法提取DNA用于反向斑点杂交 (RDB)基因分型 ,同时采用SSOP和PCR SSP方法进行比较。结果表明 ,所有样本用RDB方法基因分型均获得成功 ,可准确地分辨 6 0个HLA DRB等位基因 ,且结果与用SSOP和PCR SSP方法的结果完全一致。结论提示 ,RDB方法可准确地分辨HLA DRB等位基因 ,分辨率高 ,操作简单 。
- 黄以宁廖灿汤雪薇李焱谢杏梅曾瑞萍
- 关键词：反向斑点杂交技术脐血白细胞抗原
- 实时荧光定量PCR快速分子诊断唐氏综合征被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨快速诊断唐氏综合征的检测方法 .方法 采用实时荧光定量PCR技术 ,检测唐氏患者 2 3例、正常人 33例 ,定量分析比较ΔCt值 .结果 正常组和唐氏组ΔCt值有显著性差异 (p <0 .0 0 1) ,并建立了相应的参考值范围 .结论 实时荧光定量PCR具有简单、快速、特异性高等优点 。
- 廖灿黄以宁杨昕涂新枝易翠兴潘敏
- 关键词：荧光定量PCR唐氏综合征
- 65例中国非亲缘性脐血造血干细胞移植的回顾研究被引量：5
- 2006年
- 目的1998-2004年，广州脐血库向国内25家移植中心提供非亲缘性脐血治疗恶性及非恶性肿瘤性疾病患者65例，对其进行回顾性分析，探讨与非亲缘性脐血移植密切相关的影响因素。方法脐带血均采自广州市妇婴医院正常分娩的足月顺产产妇，脐血分离、冻存、复温方法参照纽约脐血库的标准及相关文献；选择脐血的依据是HLA相合程度及有核细胞数量。结果65例接受非亲缘性脐血移植的病例中，白血病49例，遗传缺陷性疾病16例；男性42例，女性23例；受者中位年龄10岁（1～33岁）；中位体重27kg（10～67ks）；HLA-A、B，DRB1匹配全相合9例，1个位点不合43例，2个位点不合13例；总有核细胞（TNC）中位输入量5．7×10^7／kg[（1．84～20．00）×10^7／ks]。移植后植入50例有核细胞总数（ANC〉500／μ1），植入的中位时间为17．5d（7～44d），植入率77％；41例受体发生GVHD，发生率为63％。30例长期存活（无病生存时间〉365d），无病存活率为61％。结论非亲缘性脐血移植具有良好的临床应用前景。
- 廖灿杨昕许遵鹏黄以宁吴韶清陈劲松李焱汤雪薇吴洁莹
- 关键词：造血干细胞移植胎血白血病
- 孕妇性传播疾病高危因素评分系统模式的建立
- 1998年
- 目的通过高危因素评估，建立起我国的孕妇性传播疾病（STD）的高危评分系统。方法前瞻性多中心随机抽取孕妇1656例，进行STD相关因素问卷、妇科检查及实验室检查，进行双盲检测系列STD、Cox比例风险模型等多项统计学处理。结果6种主要STh的总患病率为20．9％（346／1656），发病率首位是沙眼衣原体性宫颈炎，为19．1％（316／1656）。建立了STD高危因素评分模式三三分制。用该模式验证346例STD孕妇，其敏感性与特异性均大于60．0％（分别为61．7％与67．3％），优于国外模式。结论三三制STD高危因素评分模式轻国外多分制评分简便易行，更切合我国国情。
- 符玉良黄以宁张维森张秀兴刘岩平何桂荷武秋林肖燕青梁玉屏邓艳香温素玲
- 关键词：性传播疾病孕妇
