关大伟
- 作品数：86 被引量：516H指数：15
- 供职机构：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 一种高效促进大豆根瘤菌竞争结瘤的大豆根系分泌物的制备方法
- 本发明一种高效促进大豆根瘤菌竞争结瘤的大豆根系分泌物的制备方法，属于生物工程技术领域。该方法包括下述步骤：(1)、对大豆种子进行表面灭菌处理；(2)、将经过灭菌的大豆种子在无菌条件下移至YMA琼脂表面皿中催芽，待种子发芽...
- 李俊马鸣超姜昕关大伟刘尧曹凤明陈慧君沈德龙杨小红李力
- 文献传递
- 应用多重PCR鉴定微生物肥料常用芽孢杆菌被引量：43
- 2008年
- 【目的】枯草群芽孢杆菌中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)和短小芽孢杆菌(B.pumilus)是微生物肥料中常用菌种,用传统方法鉴定费时费力,有必要建立检测和鉴定这些芽孢杆菌的种特异性PCR方法。【方法】利用已登录的gyrA、rpoA和16SrRNA基因序列分别设计和筛选上述菌种的特异引物并建立多重PCR反应体系。【结果】以基因组DNA为模板,扩增芽孢杆菌、类芽孢杆菌和短芽孢杆菌3属15种的标准菌株(共33株),4个目标种分别产生了大小不同的唯一的产物,除个别种与短小芽孢杆菌引物有交叉反应外,其余参考菌株均为阴性。从23株枯草群菌株的基因组DNA扩增发现,PCR鉴定与常规鉴定结果一致。【结论】本文建立的多重PCR方法具有较好的特异性,可快速准确鉴定枯草群的4个种,在微生物肥料检测方面有良好的实用前景。
- 曹凤明中国农业科学院农业资源与农业区划研究所沈德龙李俊关大伟姜昕李力冯瑞华杨小红陈慧君葛一凡
- 关键词：多重PCR微生物肥料
- Bradyrhizobium diazoefficiens 4534和4222菌株选择性结瘤的分子生物学机理比较研究
- 根瘤菌选择性结瘤的分子机理是长期关注的热点,也是制约根瘤菌发挥固氮应用潜能的关键所在.本研究以与大豆品种中黄13 存在结瘤能力显著差异的Bradyrhizobium diazoefficiens的两株菌为材料,在比较基因...
- 李俊马鸣超关大伟姜昕李力曹凤明
- 关键词：大豆根瘤菌
- 大豆根瘤菌菌株5873PCR鉴定方法、其所用的引物及应用
- 本发明大豆根瘤菌菌株5873 PCR鉴定方法、其所用的引物及应用，属于菌株鉴定技术领域。所述方法包括：以待测菌株的基因组DNA或菌株的纯培养菌液或根瘤破碎提取液经裂解、沸水浴、冻融后的液体为模板，以引物4‑4进行PCR扩...
- 马鸣超姜昕李俊王鹏辉关大伟曹凤明李力
- 文献传递
- 农用微生物菌剂功能评价技术规程
- 本文件规定了农用微生物菌剂功能评价的菌剂样品要求、评价内容、评价程序、评价项目与测定方法、结果判定和评价报告格式。本文件适用于农用微生物菌剂的功能评价。
- 关大伟李俊姜昕马鸣超曹凤明李力杨小红陈慧君杨一葛一凡冯瑞华
- 采用gfp和rfp基因标记评价大豆根瘤菌竞争结瘤能力被引量：7
- 2010年
- 采用二亲本接合方法,将绿色荧光蛋白基因(gfp)或红色荧光蛋白基因(rfp)分别导入与大豆品种中黄13相匹配的快生根瘤菌Sinorhizobium fredii SR25a、S.frediiUSDA205、与慢生根瘤菌Bradyrhizobium japonicum4222、B.japoni-cum4230和B.japonicum4534菌株中,得到6株标记成功的菌株,并检验标记菌株的外源基因在培养条件下和共生条件下的稳定性,以及对菌株结瘤性能的影响。进一步将带有不同荧光蛋白基因的供试菌株按等密度等体积配成9组,通过蛭石盆栽试验评价菌株的竞争结瘤能力。结果表明:外源基因能够遗传稳定,且不影响共生结瘤固氮行为,该标记方法可用于评价菌株竞争结瘤能力;慢生大豆根瘤菌的竞争能力明显高于快生大豆根瘤菌,其中慢生大豆根瘤菌B.japonicum4534竞争能力最强,其占瘤率比慢生菌株B.japonicum4230和B.japonicum4222分别高出35%和90%。结果证明gfp和rfp双标记技术为根瘤菌竞争结瘤能力评价提供了直观、简便、准确的检测手段。
- 肖文丽关大伟李俊曹凤明陈慧君
- 关键词：大豆根瘤菌竞争结瘤
- 一种原位高效复合根瘤菌群的筛选方法
- 本发明一种原位高效复合根瘤菌群的筛选方法，属于微生物技术领域。所述筛选方法包括下述步骤：（1）选取生长良好的新鲜大豆根瘤，不经过消毒，直接放入200 ml YMA液体培养基中，28±2℃培养5天；（2）吸取（1）中培养好...
- 赵宇宾李俊马鸣超姜昕关大伟曹凤明李力
- 文献传递
- 东北黑土微生物群落对长期施肥及作物的响应被引量：28
- 2016年
- 【目的】为表征长达35年轮作与施肥条件下东北黑土微生物群落特征,解析长期施肥及作物对土壤微生物丰度和群落结构的影响,探讨东北黑土微生物群落变化与施肥及不同作物间的相互关系,为进一步改良耕作制度与施肥方式提供依据。【方法】依托黑龙江省农业科学院长期定位试验站,选取玉米和大豆两种作物季的4个不同施肥处理：不施肥处理（CK）、有机肥处理（M）、无机肥处理（NPK）和有机肥配施无机肥处理（MNPK）的耕层土壤为研究对象,处理前加字母m表示玉米季样品,加字母s表示大豆季样品。借助Illumina Miseq高通量测序平台和Real-time PCR技术,以16S rRNA基因为分子标靶,研究作物与施肥方式对黑土中微生物群落结构和丰度的影响,分析群落变化与土壤化学性质的相关性。【结果】玉米季土壤16S rRNA基因拷贝数（6.32×10^8—8.83×10^8/ng DNA）比大豆季的低（0.96×10^9—2.30×10^9/ng DNA）;玉米季土壤微生物多样性（ACE指数为3 674.58—4 034.84）也低于大豆季（ACE指数为4 167.47—4 887.36）;玉米季的细菌丰度以Acidobacteria（24.47%—27.90%）最高,而大豆季丰度最高的是Proteobacteria（27.78%—34.40%）,Bacteroidetes和Actinobacteria丰度在两季作物中差异明显。同一作物季的有机肥无机肥配施处理的16Sr RNA基因拷贝数高于无机肥处理,且有机肥配施无机肥处理的微生物α多样性指数也比无机肥处理的高（sMNPK的Chao1指数比sNPK高出11.89%）;不同施肥处理之间群落组成存在差异,Alphaproteobacteria在sMNPK和sNPK处理的相对丰度分别比sCK增加3.31%、5.24%;Gammaproteobacteria在sMNPK和sNPK处理均比sCK处理增加1.72%和1.2%,二者相对丰度变化大。相关性分析显示,16Sr RNA基因拷贝数与土壤硝态氮和速效钾正相关;微生物菌落多样性指数与土壤全氮、硝态氮、铵态氮、有效磷和速效钾等化学性质密切相关。【结�
- 丁建莉姜昕关大伟马鸣超赵百锁周宝库曹凤明李力李俊
- 关键词：施肥作物微生物群落结构土壤化学性质黑土
- 大豆连作条件下施肥对东北黑土细菌群落的影响被引量：23
- 2017年
- 【目的】表征大豆连作条件下不同施肥处理土壤细菌的群落结构特征和组成差异,并侧重分析接种根瘤菌处理的不同之处;与土壤化学性质进行关联分析,探讨引起黑土细菌菌群变化的主效环境因子,为进一步了解连作条件下东北耕地土壤中细菌群落结构的变化以及大豆的高效种植和氮肥减施提供理论支持。【方法】依托5年大豆连作定位试验,选取不施肥(CK)、磷钾肥(PK)、氮磷钾肥(NPK)、磷钾肥+接种根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum 5821)处理(PK+5821)共4个处理的耕层土壤为研究对象,采用高通量测序(Illumina HiSeq)和real-time PCR技术,以16S rRNA基因V4区为分子标靶,解析不同施肥处理土壤细菌的菌群变化,并对细菌群落结构与环境因子进行相关性分析。【结果】与CK相比,施肥明显增加了大豆的产量和土壤养分的含量,但单施化肥降低了土壤的pH。接种B.japonicum 5821显著增加了土壤细菌的基因拷贝数,提高了土壤细菌的丰度。细菌门水平和纲水平的群落分析发现,变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)为土壤中的3大优势菌群,占所有优势菌门的70%以上;施肥明显降低了土壤中放线菌门的相对丰度,这与细菌纲水平的分析一致。多样性分析发现,CK处理与3个施肥处理的丰富度和多样性指数不同,且主坐标分析(PCoA)显示,3个施肥处理的细菌群落结构在PC1轴上聚在一起,而与CK处理是分开的,表明施肥明显改变了土壤细菌的群落构成。冗余分析(RDA)显示,全氮(F=3.2,P=0.002)对土壤细菌群落结构的影响最大,解释了24%的群落变化,各因子的贡献率依次为全氮>有效磷>速效钾>有机质>p H;Spearman相关性分析也表明,5项土壤化学指标均与不同优势菌门存在密切的相关关系。【结论】施肥改变了大豆连作条件下土壤细菌的群落结构。全氮是影响土壤细菌群落结构变化的主�
- 高圣超关大伟马鸣超张伟李俊沈德龙
- 关键词：黑土根瘤菌土壤化学性质细菌群落结构
- 我国大豆根瘤菌菌剂的应用及存在的问题与对策
- 根瘤菌与豆科作物所形成的共生固氮体系,不仅可为豆科作物提供大量的氮素营养,且对于维系自然界氮素循环、促进农业可持续发展具有重要的作用。然而,长期以来我国在大豆种植中施用大量化学氮肥,未能发挥根瘤菌的生物固氮作用,导致了资...
- 关大伟李俊曹凤明沈德龙姜昕
- 关键词：大豆根瘤菌
- 文献传递
