关晓慧
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：天津医科大学代谢病医院内分泌研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 1,25-二羟基维生素D_3抑制脂肪细胞分化作用的研究被引量：5
- 2013年
- 目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对脂肪细胞分化的影响及其机制。方法以间充质干细胞系C3H10T1/2为研究对象,将其分为6组,分别为对照组、诱导分化组和4个不同剂量的1,25(OH)2D3处理组。其中对照组加入溶媒,诱导分化组加入脂肪细胞诱导分化试剂,1,25(OH)2D3处理组除了加入脂肪细胞诱导分化试剂外,予以10-9、10-8、10-7、10-6mol/L 1,25(OH)2D3处理。处理后5 d进行油红O染色,RT-PCR检测脂肪细胞特异性转录因子和Wnt/β-catenin信号通路相关因子表达水平,Western blot检测β-catenin蛋白水平。结果1,25(OH)2D3能够强烈抑制脂肪细胞生成,阻断脂肪细胞特异性转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)α及脂肪细胞表征因子aP2 mRNA表达,下调Wnt/β-catenin信号通路抑制因子分泌性卷曲相关蛋白1(sFRP1)mRNA,上调β连环素(β-catenin)蛋白水平。结论1,25(OH)2D3强烈抑制脂肪细胞分化,该作用可能与其激活Wnt/β-catenin信号通路有关。
- 关晓慧王君郭菲周杰王宝利
- 关键词：脂细胞骨化三醇Β连环素
- miR-223敲减慢病毒的构建
- 2015年
- 目的构建mi R-223敲减慢病毒,为进一步研究mi R-223的功能提供工具。方法采用Invitrogen公司mi R-RNAi在线设计工具,根据mi R-223成熟体序列设计了一对互补寡核苷酸片段,退火产物连接至pc DNA6.2-GW/Em GFP-mi R载体,经酶切连入p CDH-CMV-MCS-EF1-cop GFP载体,构建了mi R-223敲减慢病毒质粒,利用293T细胞将其包装成病毒,并感染ST2细胞,观察感染效率并用q RT-PCR检测mi R-223成熟体表达。结果酶切鉴定及测序结果显示成功构建了mi R-223敲减慢病毒载体,mi R-223敲减慢病毒包装并感染靶细胞,表达绿色GFP荧光蛋白的细胞约占细胞总数的80%-90%,病毒滴度为1×10^9PFU/m L,感染效率达90%。感染mi R-223敲减慢病毒的细胞mi R-223表达量（0.31±0.03）低于阴性对照（1.00±0.09）,为阴性对照的31%,差异有统计学意义（n=3,t=15.091,P〈0.05）。结论成功构建了mi R-223敲减慢病毒,为进一步研究mi R-223的功能准备了条件。
- 张欣关晓慧王宝利
- 关键词：微RNAS慢病毒属RNA干扰
