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水分亏缺条件下豌豆肌动蛋白异型体PEAcII基因的表达被引量：2: 2010年; 以培养3～4 d的豌豆幼苗为试验材料,以18S rRNA基因为内参基因,豌豆幼肌动蛋白异型体PEAcII基因为检测基因,在PEG6000模拟水分亏缺条件下,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)体系检测肌动蛋白异型体PEAcII基因在豌豆幼苗中的表达情况。在正常供水条件下,PEAcII在处理的第8 h表达量最高,水分胁迫下,PEA-cII基因在处理的0.5 h表达量下降,在处理的1 h时表达量最高,而后下降。无论是正常供水还是水分胁迫条件下,PEAcII基因的表达都是一个动态变化的过程。试验结果表明,肌动蛋白异型体PEAcII表达量的高低可能与豌豆幼苗适应水分亏缺的生理过程有关,这对于研究豌豆幼苗抗旱性机理以及检测豌豆幼苗的抗旱性强弱具有重要意义。; 张少斌刘曦赵依诗汪澈刘国琴; 关键词：豌豆幼苗半定量RT-PCR

植物微管结合蛋白被引量：6: 2009年; 本文介绍了植物微管结合蛋白MAP65家族的各个成员WVD2、SPR1、EB1、MOR1、MAP200/TMBP200、AtMAP18、PLD、MAP190和SB401的研究进展。; 张少斌刘曦张立军汪澈洪丽华; 关键词：植物细胞细胞结构

豌豆肌动蛋白异型体（PEAc3）与绿色荧光蛋白（GFP）的融合表达与生化特性分析: 肌动蛋白普遍存在于真核生物中,在各种肌动蛋白结合蛋白的调控下,参与多种细胞活动,包括细胞分裂、内吞作用、成核作用、细胞信号传导、重力感应及顶端生长、细胞器运动等。在植物细胞中,由多基因家族编码的肌动蛋白存在多种异型体,不...; 刘曦; 关键词：原核表达蛋白纯化; 文献传递

豌豆肌动蛋白异型体PEAc3基因的克隆及生物信息学分析被引量：1: 2012年; 根据NCBI文库中检索到的序列,采用RT-PCR技术克隆了豌豆肌动蛋白异型体PEAc3完整编码区的cD-NA序列,基因全长1134bp,开放阅读框编码377个氨基酸。氨基酸序列分析表明,该基因的编码蛋白PEAc3为可溶性蛋白,分子量41 668.7Da,没有信号肽部分,呈酸性,PEAc3包括ACTINS_1(编号:PS00406)、ACTINS_ACT_LIKE(编号:PS01132)以及ACTINS_2(编号:PS00432)3组肌动蛋白序列指纹图谱(Signature)。序列同源性分析表明,PEAc3与其它上百种植物肌动蛋白同源性高达89.07%。并讨论了模体中可结合配体的位点与功能之间的联系。; 张少斌王粲刘慧刘曦; 关键词：多序列比对

实时定量PCR检测豌豆黄化苗中肌动蛋白异型体Ⅱ的表达被引量：3: 2010年; 以18S rRNA为内参照基因,利用实时定量PCR方法检测了豌豆黄化苗在生长过程中肌动蛋白异型体ⅡPEAcⅡ的表达情况。结果表明:豌豆黄化苗中PEAcⅡ的表达量在检测的第1小时明显升高,约为起始表达量的2倍。随着培养时间延长,表达量下降,第12小时的表达量约为起始表达量的0.6倍。与光照培养下的正常苗相比,黄花苗中PEAcⅡ的表达量较高,在检测的第8小时,约为正常苗表达量的2.4倍。该试验建立的实时定量PCR方法可有效地用于豌豆肌动蛋白异型体基因表达的定量分析。; 张少斌赵依诗刘曦汪澈刘国琴; 关键词：豌豆黄化苗实时定量PCR

植物肌动蛋白功能的研究进展被引量：35: 2010年; 肌动蛋白结构与功能方面的研究属于生物学的基础性研究,随着科技的不断发展,近年来研究重点已经转移到了在其结合蛋白调控下的功能作用的研究。主要回顾近年来植物肌动蛋白功能方面的研究进展。; 刘曦张少斌汪澈; 关键词：肌动蛋白肌动蛋白结合蛋白

豌豆肌动蛋白异型体PEAc3的原核表达及其聚合特性分析: 2010年; 植物肌动蛋白在植物顶端生长、细胞分裂分化和细胞信号转导等多种生命活动中发挥着重要作用。豌豆中存在多种肌动蛋白异型体。研究豌豆肌动蛋白异型体PEAc3与组氨酸标签(His-tag)及绿色荧光蛋白(GFP)的融合表达,并分析了融合蛋白的聚合特性。采用RT-PCR的方法克隆PEAc3基因,构建原核表达载体pET30 a-His-PEAc3-GFP。用DNAman生物学软件分析表明,PEAc3融合蛋白全长675个氨基酸,分子量74.74 ku,等电点5.81。将pET30 a-His-PEAc3-GFP转入大肠杆菌BL21中,优化的诱导表达条件为:25℃,当菌液OD600达到0.8时加入IPTG(浓度0.1 mmol/L),诱导表达4 h。采用尿素变性复性、镍柱亲和层析的方法从包涵体中纯化获得高纯度融合蛋白。融合蛋白His-PEAc3-GFP能够体外聚合,聚合临界浓度为0.5μmol/L。单体His-PEAc3-GFP对DNaseⅠ有抑制作用,聚合后对肌球蛋白Mg-ATPase活性有一定的激活作用。上述结果表明,原核表达的His-PEAc3-GFP可能具有类似于一般肌动蛋白的聚合特性。; 张少斌刘曦刘国琴; 关键词：豌豆肌动蛋白

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刘曦