刘曦
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：武汉市科技攻关计划项目湖北省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基因IV型HEV ORF3真核表达质粒的构建与鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的构建基因IV型HEV ORF3的真核表达载体。方法从患者血清中提取HEV RNA,利用RT-PCR技术扩增HEV ORF3基因,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后连接到经同样酶切的pEGFPC2真核表达载体,转化DH5α菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒pEGFPC2-ORF3。将重组质粒用脂质体法转染HepG2细胞,Western blot分析鉴定EGFP-ORF3融合蛋白的表达。结果真核表达质粒转染HepG2细胞,Western blot在39.8kD左右有一条强的棕色条带。结论成功构建pEGFPC2-ORF3真核表达质粒,在HepG2细胞表达融合蛋白,为进一步研究该蛋白生物学功能奠定了基础。
- 章述军田德英刘曦贾昱娴
- 关键词：HEV真核表达绿色荧光蛋白
- 365例乙型肝炎基因型分布与临床相关性研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨湖北地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布情况以及其与临床的相关性。方法:选取湖北地区HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎患者365名,应用多对型特异性引物聚合酶链反应检测HBV的基因型。结果:在365份HBV DNA阳性血清中,除3份标本不能分型外,B型占78.45%,C型和BC混合型占17.68%和3.87%,未发现其他HBV基因型。B型患者血清ALT水平显著高于C型和BC混合型患者(P=0.01,P<0.001),血清TB i、lHBeAg阳性率在各基因型患者间差异无显著性意义。慢性肝炎患者中B基因型显著多于C基因型(P=0.012),肝硬化及肝癌患者中,B、C基因型分布的差异有显著性意义(P=0.007,P=0.001),重症肝炎患者的基因型分布无显著性意义。结论:湖北地区存在B、C、BC混合3种HBV基因型,且以B型为优势基因型。在慢性肝炎患者中B型比例较高,肝硬化及肝细胞癌患者中C型比例较高。
- 贾昱娴田德英章述军刘曦
- 关键词：病毒性肝炎乙型基因型型特异性引物
- 188例散发性急性戊型肝炎临床分析被引量：8
- 2009年
- 目的:总结散发性急性戊型肝炎(AHE)的临床特征。方法:回顾性分析188例急性戊型肝炎患者的临床资料。结果:188例散发性急性戊型肝炎以男性患者(83%)多见。临床表现以黄疸(81.9%)、乏力(70.2%)、纳差(64.4%)和腹胀(24.5%)最为常见。男性黄疸发生率和总胆红素(TBil)峰值均显著高于女性(P均<0.01)。老年组(≥60岁)γ-谷氨酰转移酶(GGT)峰值、凝血酶原活动度(PTA)最低值、胆碱酯酶(CHE)最低值和血清白蛋白(ALB)最低值均显著低于非老年组(<60岁)(P均<0.05)。老年组重型AHE发生率和死亡率均高于非老年组(P均<0.01)。结论:散发性AHE以男性多见,老年组患者可能由于其肝脏储备功能差而导致重型AHE发病率和死亡率高于非老年组患者。
- 章述军田德英陈淼周健王坤贾昱娴刘曦
- 关键词：戊型肝炎老年人
- Ⅰ型HEV ORF3-pEGFPN1真核表达质粒的构建与鉴定
- 2009年
- 目的:构建表达Ⅰ型HEV ORF3-pEGFPN1融合蛋白的真核表达载体;获得重组质粒稳定转染的LO2细胞系。方法:从猕猴胆汁提取RNA,利用RT-PCR及PCR技术从HEV基因组中扩增出ORF3基因片断,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后连接到经同样酶切的pEGFPN1真核表达载体,转化DH5a菌株感受细胞,获得阳性重组质粒ORF3-pEGFPN1。将阳性克隆用脂质体法转染LO2细胞系,G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE、Western blot分析鉴定ORF3-pEGFPN1融合蛋白的表达。结果:真核表达质粒转染LO2细胞,SDS-PAGE显示在39.8kD左右蛋白表达量明显高于对照组,Western blot在39.8kD左右有一条强的棕色条带。结论:成功构建ORF3-pEGFPN1真核表达质粒,能在LO2细胞表达融合蛋白,为进一步研究该蛋白生物学功能奠定基础。
- 刘曦田德英章述军贾昱娴
- 关键词：肝炎病毒戊型真核表达融合蛋白
