刘秀芳
- 作品数：11 被引量：69H指数：5
- 供职机构：南京中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市医学科技发展项目江苏省自然科学基金更多>>
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- 微卫星不稳定结直肠癌hMLH1、hMSH2和hMSH6基因种系突变检测
- 目的检测微卫星不稳定结直肠癌中hMLH1、hMSH2和hMSH6基因种系突变。方法抽取18例微卫星不稳定结直肠癌患者外周血,直接测序法检测hMLH1、hMSH2和hMSH6基因种系突变。结果18例结直肠癌患者中,共发现h...
- 金黑鹰丁义江杨柏林刘秀芳刘飞丁曙晴倪敏
- 关键词：微卫星不稳定结直肠癌错配修复种系突变
- 茶多酚对微卫星不稳定结直肠癌裸小鼠的抗肿瘤作用及其作用机制被引量：7
- 2008年
- 目的:探索茶多酚对微卫星不稳定结直肠癌裸小鼠的作用及其作用机制。方法:采用hMSH2缺失结肠癌细胞株Lovo细胞建立裸鼠的皮下瘤模型,4周后使用皮下瘤接种法建立结肠造口结肠癌原位移植瘤模型。40只模型裸鼠分为模型组和50、75、100mg/kg茶多酚组。腹腔注射茶多酚治疗5d后,计算肿瘤抑制率,并检测肿瘤微卫星不稳定情况和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、TGF-β2和胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)片段的变化情况。结果:使用50、75和100mg/kg 3个剂量茶多酚治疗后,在1、2、3和4周末,治疗组和模型组肿瘤抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.01);3个治疗组之间比较,差异无统计学意义。使用茶多酚治疗后肿瘤微卫星标志趋于稳定。结论:茶多酚对错配修复基因缺失的结直肠癌有明显抑制作用,其作用机制可能与抑制微卫星不稳定有关。
- 戴功建金黑鹰丁义江夏建国刘秀芳刘飞谈瑄忠耿建祥
- 关键词：茶多酚DNA错配修复基因缺失微卫星不稳定性裸小鼠
- 微卫星不稳定对散发性结直肠癌患者预后的影响被引量：6
- 2011年
- 目的探讨微卫星不稳定（MSI）对散发性结直肠癌预后的影响。方法收集2004年8月至2006年9月南京中医药大学第三附属医院手术治疗并具有完整随访资料的134例结直肠癌病例．根据MSI检测结果将其分成MSI组和微卫星稳定（MSS）组。采用单因素和多因素预后分析来评估MSI的预后价值。结果134例患者中MSI组26例。MSS组108例。两组患者术后复发率分别为7．7％（2／26）和35．2％（38／108），差异有统计学意义（P=0．006）；两组患者5年生存率分别为92.3％和63．5％．差异亦有统计学意义（P=0．016）。经多因素分析，MSI为结直肠癌患者的独立预后因素（P=0．029）。结论微卫星不稳定是影响散发性结直肠癌患者预后的重要因素。
- 王小峰金黑鹰丁义江樊志敏刘秀芳耿建祥
- 关键词：结直肠肿瘤微卫星不稳定预后
- 下调AP-1基因表达在冬凌草甲素抑制结直肠癌中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨冬凌草甲素对结直肠癌的抑制作用及其机制。方法以冬凌草甲素水溶液处理LoVo和SW480结直肠癌细胞株，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率，以Illumina表达芯片检测LoVo细胞和SW480细胞基因表达的变化，对变异的基因进行定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测，建立结肠造口的结肠癌原位移植模型，以冬凌草甲素水溶液对动物模型进行腹腔注射，观察肿瘤的增殖并对上述发现的相关变化基因进行RT—PCR检测。结果冬凌草甲素在25mg／L剂量即对LoVo细胞和SW480细胞产生80％以上的抑制率，而且随药物剂量升高和时间延长，抑制率呈逐渐上升趋势；经冬凌草甲素处理后基因表达发现在LoVo结直肠癌中冬凌草甲素可以明显促进CKS2、SFN、SERTAD1、HERC5、RECQL4、GADD45AQ、bax、bxl-2等基因的表达，明显抑制了AP-1、NFkb和p38；而在SW480结直肠癌中冬凌草甲素可以促进ABCG1、ERCC1、HERC5、TERF2IP和TERF2IP等基因表达；与对照组比较，应用冬凌草甲素处理后的结肠癌结肠造口原位移植模型肿瘤生长速度明显低于对照组（P〈0．01），而SW480结直肠癌和LoVo结直肠癌在冬凌草甲素处理后肿瘤的生长速度差异无统计学意义（P〉0．05）。在肿瘤模型中仅仅发现AP-1基因表达下调，其余的基因均无上调或下调，在4周时定量RT-PCR检测发现，不仅AP-1基因下调，而且核因子（NF）-κB和p38明显下调。结论冬凌草甲素体外和体内研究都能明显抑制结直肠癌肿瘤的增殖，而且对2种肿瘤细胞株抑制率差异无统计学意义；在体外研究中发现冬凌草甲素可能抑制多种基因的信号转导途径，但是在在体研究中，只发现AP-1、NF-κB和P38下调，而且AP-1基因下调出现要早于其他2个基因，提示AP-1基因的下调可能是冬凌草甲素抑制结直肠癌的早期事件，AP-1抑制可能影响了NF-κB和MAKP途径基�
- 金黑鹰戴功建丁义江夏建国刘秀芳刘飞谈瑄忠耿建祥
- 关键词：冬凌草甲素结直肠癌AP-1
- 支气管哮喘患者中医四诊信息调查及验证性因子分析被引量：25
- 2005年
- 目的:收集支气管哮喘患者中医四诊信息,进行证候分类。方法:随机调查430例支气管哮喘患者,详细记录四诊信息,用Amos软件建立数据模型,进行验证性因子分析(confirmatoryfactoranalysis,CFA)。结果:行四因子、五因子及六因子分析,其中六因子分析结果与临床实际相一致。结论:按六因子分析结果排序,以标准回归系数0.4作为主次证界值,将支气管哮喘分为寒饮伏肺证、痰热蕴肺证、风痰阻肺证、肺肾气虚证及脾气不足证等5大类证候。
- 史锁芳刘秀芳严志林王道成孔祥文沈镇苍陈启光闵捷
- 关键词：哮喘四诊证候分类验证性因子分析
- 结肠造口结肠癌原位移植模型的建立被引量：2
- 2009年
- 目的建立一种新型的结肠癌原位移植模型—结肠造口结肠癌原位移植模型。方法对不同的BALB／C nu／nu裸鼠分别进行皮下结肠癌细胞接种和进行结肠造口，将皮下形成的肿瘤制成细胞悬液后种植在造口处，待肿瘤生长至5mm时使用氟尿嘧啶（5-Fu）腹腔注射。观察肿瘤生长、淋巴结转移及肿瘤的病理情况。结果10只造口成功的裸鼠全部生长出肿瘤，5只5-Fu处理组裸鼠的生存时间为（15.2±3.7）周，未处理组生存时间为（12.3±2.8）周，差异有统计学意义（P=0.001）。处理组中1例发现淋巴结转移，而未处理组有2例淋巴结转移（P=0.49）。病理检查：造口处生长的肿瘤皆为低分化癌，肠系膜淋巴结处为转移性肿瘤。结论结肠造口结肠癌原位移植模型是一种便于观察、可以反复取样且肿瘤生物学特性符合结肠癌的理想模型。
- 金黑鹰刘秀芳丁义江恽时锋刘飞
- 关键词：结直肠肿瘤动物结肠造口生物学特征
- 黄芩苷对错配修复基因缺失LoVo细胞的抑制作用及其机制被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨黄芩苷诱导LoVo细胞凋亡的作用及机制.方法:将黄岑苷40mg溶于19.8mL生理盐水+100μLHCl+100μLNaOH,阿斯匹林1.8g溶于2mL乙腈+4mL NaOH+2m LHCl,分别处理LoVo细胞,1g/L乙腈溶液为对照.采用体外培养技术、TUNEL法观察细胞凋亡率,变性凝胶电泳检测微卫星标志BAT-25、D2S123状况.结果:黄芩苷和阿斯匹林均能诱导LoVo细胞凋亡,在各时间点与对照组比较统计学差异有显著意义(P=0.0000);黄芩对结肠LoVo细胞的诱导凋亡作用明显强于阿司匹林,24h两者差异无统计学意义,96h和1wk两者差异统计学有显著意义(93.33%vs44.23%,63.29%vs23.20%,均P=0.0000),其作用时间在96h达到高峰,与时间不呈依赖关系.黄芩苷和阿司匹林均未影响LoVo细胞的BAT-25、D2S123微卫星状态.结论:黄芩苷具有较强诱导LoVo细胞凋亡的作用,但对LoVo细胞的BAT-25、D2S123微卫星状态无影响,其诱导LoVo细胞凋亡可能是通过其它作用途径.
- 杨柏霖刘飞谷云飞金黑鹰刘秀芳
- 关键词：黄芩苷凋亡微卫星不稳定聚合酶链反应-单链构象多态性
- HES1、JAG1、MT2A和MAFA介导茶多酚抑制微卫星不稳定结直肠癌被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨茶多酚是否能特异性抑制结直肠癌微卫星不稳定及其可能机制。方法:使用茶多酚的水溶液处理LoVo细胞(MSH2基因缺失的结肠癌细胞株)和SW480细胞(错配修复基因正常的结肠癌细胞株),四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖,基因扫描法检测细胞的微卫星序列变化,基因芯片检测茶多酚处理后LoVo细胞基因表达的变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测有变化的基因。结果:茶多酚对LoVo细胞和SW480细胞的抑制率随着药物浓度的增加而增加,随着时间的延长也呈逐渐上升趋势,但茶多酚对LoVo细胞的抑制率高于SW480细胞,在24、72h和1周时间点测得二者抑制率的差异有统计学意义。经过茶多酚处理后,LoVo细胞的微卫星序列有趋于稳定的趋势。基因芯片和实时荧光定量PCR检测结果提示茶多酚能抑制MT2A、MAFA、HES1和JAG1基因的表达,治疗前后基因表达差异均有统计学意义。结肠癌相关基因检查发现,茶多酚能上调BAX和抑制P38基因,治疗前后基因表达差异有统计学意义,但是对于核因子-κB抑制不明显。结论:茶多酚有使LoVo的微卫星状态趋于稳定的趋势,并可抑制MT2A、MAFA、HES1和JAG1等基因表达,同时上调BAX基因的表达和抑制P38基因的表达;但是对于这些途径怎么相互联系,哪些是始动原因,哪些是继发性原因还需要进一步研究。
- 许妍妍金黑鹰谈瑄忠刘秀芳丁义江
- 关键词：茶多酚结直肠癌微卫星不稳定
- 抗突变中药对错配修复基因缺失结直肠癌细胞的抑制作用被引量：13
- 2007年
- 目的:研究抗突变中药对错配修复基因缺失结直肠癌细胞的抑制作用.方法:使用具有抗突变作用的14种中药(冬凌草甲素、茶多酚、穿心莲内酯和黄芩苷等)处理hMSH2缺失结肠癌细胞株Lovo细胞和错配修复基因正常的结肠癌细胞株SW480细胞,采用MTT法观察细胞的增殖情况.多重荧光聚合酶链式反应(PCR)方法检测各浓度时Lovo细胞微卫星不稳定变化.结果:冬凌草甲素、茶多酚、穿心莲内酯和黄芩苷对Lovo细胞和SW480细胞有明显的抑制作用.冬凌草甲素、茶多酚和黄芩苷对Lovo细胞的抑制作用优于SW480细胞,特别是黄芩苷对Lovo细胞作用为SW480细胞的5倍,差异有显著意义.穿心莲内酯对SW480细胞的作用优于Lovo细胞,差异具有有显著意义.白藜芦醇、芦荟苷、丹参酮ⅡA、姜黄素4种中药成分作用于这2种细胞后,增殖抑制率较低,且加大药物浓度,增殖抑制率也无明显变化.仙灵脾等6种单味中药对2种细胞不但无明显抑制作用,反而显示有生长促进作用.另在各浓度,Lovo细胞微卫星均没有明显改变.结论:茶多酚和黄芩苷等具有抗突变作用的中药具有抑制错配修复基因缺失结直肠癌细胞的作用,其作用与剂量无关.
- 刘秀芳金黑鹰丁义江陆茵李璘丁曙晴刘飞倪敏王静
- 关键词：中药抗突变作用错配修复MTT法
- 支气管哮喘中医辨证现代化研究概况被引量：3
- 2005年
- 刘秀芳史锁芳
- 关键词：支气管哮喘辨证论治
